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Cyclin E RNA干扰载体的构建及其对EC9706细胞Cyclin E表达的影响 被引量：1
1
作者 王娜 冷弘 +2 位作者 李敏 臧文巧 王媛媛 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第2期163-167,共5页
目的:构建CyclinE基因干扰载体,转染食管癌EC9706细胞,观察其对CyclinE基因表达的影响。方法:设计、合成靶向CyclinE基因siRNA,退火成双链后与pRNAT-CMV3.1/Neo载体连接。转染EC9706细胞后,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效果,RT-PCR、We... 目的:构建CyclinE基因干扰载体,转染食管癌EC9706细胞,观察其对CyclinE基因表达的影响。方法:设计、合成靶向CyclinE基因siRNA,退火成双链后与pRNAT-CMV3.1/Neo载体连接。转染EC9706细胞后,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效果,RT-PCR、Western-blot分别检测CyclinE基因mRNA和蛋白表达水平。结果:构建的2个CyclinE基因siRNA载体插入序列与所设计序列均一致;转染EC9706细胞后,干扰1组、干扰2组与无关siRNA对照组均产生绿色荧光,空白对照组无荧光产生。干扰1组、干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组CyclinEmRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(F=15.381,P=0.002),且干扰1组、干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组比较,CyclinEmRNA相对表达量均降低(P均<0.05)。结论:构建的靶向CyclinE基因RNA干扰载体能有效抑制转染细胞CyclinE基因的表达。 展开更多
关键词 CYCLINE RNA干扰 EC9706细胞
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复方大青叶注射液对体外培养HT-H9细胞CXCR4启动子活性的影响 被引量：1
2
作者 冷弘 刘慧涛 +4 位作者 臧玉翠 马云云 李敏 靳静 赵国强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第5期681-684,共4页
目的:探讨复方大青叶注射液对体外培养HT-H9细胞中CXCR4启动子活性的作用。方法:克隆人CX-CR4启动子序列,构建报告载体pGL4.17-CXCR4;转染HT-H9细胞株,G418筛选后分组,高、低剂量实验组分别用200、100mg/L大青液注射液处理,设注射水对... 目的:探讨复方大青叶注射液对体外培养HT-H9细胞中CXCR4启动子活性的作用。方法:克隆人CX-CR4启动子序列,构建报告载体pGL4.17-CXCR4;转染HT-H9细胞株,G418筛选后分组,高、低剂量实验组分别用200、100mg/L大青液注射液处理,设注射水对照组、空白对照组和未转染对照组;各组处理24h后,进行荧光素酶活性检测。结果:成功构建含人CXCR4启动子序列的报告载体PGL4.17-CXCR4;5组荧光素酶活性比较差异有统计学意义(F=135.510,P<0.001)。复方大青叶注射液高剂量组与低剂量组荧光素酶活性均明显低于对照组(P<0.01)。结论:复方大青叶注射液能够有效抑制体外培养HT-H9细胞中CXCR4启动子活性。 展开更多
关键词 复方大青叶注射液 CXCR4启动子 艾滋病 HT-H9细胞
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肠道病毒71型河南分离株2株全基因组序列分析 被引量：1
3
作者 冷弘 卢欣 +6 位作者 刘慧涛 马云云 王媛媛 马晶 郭茂峰 李敏 赵国强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第2期170-174,共5页
目的:了解2011年河南洛阳和南阳地区流行的肠道病毒71型(EV71)基因特征。方法:分离洛阳和南阳地区EV71病毒各一株,分别进行全基因测序和基因进化分析。结果:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011的VP1区序列在进化树上均属于C4亚型,与国... 目的:了解2011年河南洛阳和南阳地区流行的肠道病毒71型(EV71)基因特征。方法:分离洛阳和南阳地区EV71病毒各一株,分别进行全基因测序和基因进化分析。结果:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011的VP1区序列在进化树上均属于C4亚型,与国内流行株都具有较高同源性,与2008年广东流行株亲缘关系最近。这2株全基因核苷酸序列同源性为99.3%,氨基酸序列同源性为97.6%,并且氨基酸均没有发生明显改变。结论:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011属于C4亚型,与我省及我国既往流行株相比,未发生大的变异。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 手足口病 同源性分析 河南
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