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下调Hsa-circ-0101216表达对胰腺癌吉西他滨化疗耐药的影响及其机制
1
作者
刘海潮
刘少朋
+5 位作者
闫宏宪
白明辉
张继翔
李迎博
王闯
邹凯
《解放军医学杂志》
北大核心
2025年第6期656-664,共9页
目的分析Hsa-circ-0101216对胰腺癌吉西他滨(GEM)化疗耐药的影响及其机制。方法采用GEO数据库分析筛选胰腺癌GEM耐药细胞与亲本细胞间差异表达的circRNAs。采用间歇浓度梯度递增法构建胰腺癌GEM耐药细胞株(BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM),采...
目的分析Hsa-circ-0101216对胰腺癌吉西他滨(GEM)化疗耐药的影响及其机制。方法采用GEO数据库分析筛选胰腺癌GEM耐药细胞与亲本细胞间差异表达的circRNAs。采用间歇浓度梯度递增法构建胰腺癌GEM耐药细胞株(BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM),采用qRT-PCR检测细胞中Hsa-circ-0101216的表达情况。取胰腺癌GEM耐药细胞,设置sh-circ-0101216组(敲低circ-0101216)、sh-NC组(转染sh-NC)、空白对照组(不做任何处理),采用CCK-8法、EdU增殖实验检测各组细胞的GEM半数抑制浓度(IC50)及增殖能力,Western blotting检测多药耐药相关蛋白1(MRP1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、人类平衡型核苷转运体-1(hENT-1)的表达情况。构建人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,并设置sh-NC+GEM组与sh-circ-0101216+GEM组(n=6),比较两组裸鼠移植瘤体积及重量变化,采用Western blotting及免疫组化法检测移植瘤组织中MRP1、BCRP、hENT-1蛋白的表达,EdU增殖实验检测肿瘤细胞增殖能力。结果GEO数据库筛选出的胰腺癌GEM耐药细胞株中存在Hsa-circ-0101216表达上调。成功构建胰腺癌GEM耐药细胞株,且胰腺癌GEM耐药细胞BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM中Hsa-circ-0101216表达水平及IC50值明显高于亲本细胞(P<0.05)。sh-circ-0101216组胰腺癌GEM耐药细胞BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM中GEM IC50值、细胞活力、EdU阳性率及MRP1、BCRP蛋白表达水平均明显低于空白对照组及sh-NC组,hENT-1蛋白表达水平明显高于空白对照组及sh-NC组(P<0.05或P<0.001)。sh-circ-0101216+GEM组裸鼠皮下移植瘤重量、体积,瘤体内MRP1、BCRP蛋白表达水平和阳性表达率,以及EdU阳性率均明显低于sh-NC+GEM组,hENT-1蛋白表达水平及阳性表达率明显高于sh-NC+GEM组(P<0.05)。结论Hsa-circ-0101216在GEM耐药的胰腺癌细胞中高表达,敲低后可抑制胰腺癌细胞增殖,并增强胰腺癌细胞对GEM的化疗敏感性,其机制可能与调节跨膜转运蛋白的表达有关。
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关键词
Hsa-circ-0101216
胰腺癌
吉西他滨
增殖
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题名
下调Hsa-circ-0101216表达对胰腺癌吉西他滨化疗耐药的影响及其机制
1
作者
刘海潮
刘少朋
闫宏宪
白明辉
张继翔
李迎博
王闯
邹凯
机构
洛阳市中心医院肝胆胰外科
出处
《解放军医学杂志》
北大核心
2025年第6期656-664,共9页
基金
河南省医学科技攻关联合共建项目(LHGJ20240736)
洛阳市科技局指导性科技计划项目(2302039Y)
河南省医学科技攻关省部共建重点项目(SBGJ202102216)。
文摘
目的分析Hsa-circ-0101216对胰腺癌吉西他滨(GEM)化疗耐药的影响及其机制。方法采用GEO数据库分析筛选胰腺癌GEM耐药细胞与亲本细胞间差异表达的circRNAs。采用间歇浓度梯度递增法构建胰腺癌GEM耐药细胞株(BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM),采用qRT-PCR检测细胞中Hsa-circ-0101216的表达情况。取胰腺癌GEM耐药细胞,设置sh-circ-0101216组(敲低circ-0101216)、sh-NC组(转染sh-NC)、空白对照组(不做任何处理),采用CCK-8法、EdU增殖实验检测各组细胞的GEM半数抑制浓度(IC50)及增殖能力,Western blotting检测多药耐药相关蛋白1(MRP1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、人类平衡型核苷转运体-1(hENT-1)的表达情况。构建人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,并设置sh-NC+GEM组与sh-circ-0101216+GEM组(n=6),比较两组裸鼠移植瘤体积及重量变化,采用Western blotting及免疫组化法检测移植瘤组织中MRP1、BCRP、hENT-1蛋白的表达,EdU增殖实验检测肿瘤细胞增殖能力。结果GEO数据库筛选出的胰腺癌GEM耐药细胞株中存在Hsa-circ-0101216表达上调。成功构建胰腺癌GEM耐药细胞株,且胰腺癌GEM耐药细胞BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM中Hsa-circ-0101216表达水平及IC50值明显高于亲本细胞(P<0.05)。sh-circ-0101216组胰腺癌GEM耐药细胞BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM中GEM IC50值、细胞活力、EdU阳性率及MRP1、BCRP蛋白表达水平均明显低于空白对照组及sh-NC组,hENT-1蛋白表达水平明显高于空白对照组及sh-NC组(P<0.05或P<0.001)。sh-circ-0101216+GEM组裸鼠皮下移植瘤重量、体积,瘤体内MRP1、BCRP蛋白表达水平和阳性表达率,以及EdU阳性率均明显低于sh-NC+GEM组,hENT-1蛋白表达水平及阳性表达率明显高于sh-NC+GEM组(P<0.05)。结论Hsa-circ-0101216在GEM耐药的胰腺癌细胞中高表达,敲低后可抑制胰腺癌细胞增殖,并增强胰腺癌细胞对GEM的化疗敏感性,其机制可能与调节跨膜转运蛋白的表达有关。
关键词
Hsa-circ-0101216
胰腺癌
吉西他滨
增殖
Keywords
Hsa-circ-0101216
pancreatic cancer
gemcitabine
proliferation
分类号
R735.9 [医药卫生—肿瘤]
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1
下调Hsa-circ-0101216表达对胰腺癌吉西他滨化疗耐药的影响及其机制
刘海潮
刘少朋
闫宏宪
白明辉
张继翔
李迎博
王闯
邹凯
《解放军医学杂志》
北大核心
2025
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