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纯培养微生物荧光原位杂交技术检测的影响因素探究被引量：3: 1; 作者吴冬梅薛正楷周荣清《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第3期96-100,共5页; 为了研究纯培养微生物荧光原位杂交技术(FISH)检测的影响因素,该实验以大肠杆菌(Escherichia coli)及植物乳杆菌(Lactobacillus planetarium)为研究对象,研究不同种属、不同生长期菌株、菌体预处理方式及杂交条件对基于探针EUB338的FIS... 展开更多; 关键词纯培养微生物荧光原位杂交技术检测预处理杂交条件; 在线阅读下载PDF 职称材料

产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA基因的克隆、表达及生物信息学分析被引量：1: 2; 作者薛正楷薛原 +2 位作者杨根庆张宿义倪斌《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第8期120-124,共5页; 通过克隆产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA全长基因,并对其进行表达和生物信息学分析。结果表明,SigA基因开放阅读框(ORF)有1 128个碱基,编码327个氨基酸,其分子质量为45.275 kDa;生物信息学预测表明,L.fusiformis与Lysinibacill... 展开更多; 关键词产己酸菌 Lysinibacillus fusiformis SigA基因生物信息学; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株整合型高抗性高效发酵己酸菌的选育研究被引量：1: 3; 作者薛正楷郑文武张宿义《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第8期143-150,共8页; 该试验采用同源重组技术从产己酸菌-纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)基因组中敲出α-淀粉酶基因、蔗糖磷酸化酶基因,同时敲进SigA和SigB基因,以提高L.fusifoemis的抗性,选育高效发酵己酸菌。结果表明,SigA和SigB双整... 展开更多; 关键词整合型产己酸菌选育发酵; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于荧光原位杂交法剖析窖泥微生物的预处理条件探究及应用: 4; 作者吴冬梅袁永飞 +3 位作者田殿梅薛正楷李进周荣清《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第12期155-159,共5页; 该研究首先对浓香型白酒窖泥样品的料液比、离心转速、超声波分散时间、Al_(2)(SO_(4))_(3)添加量等预处理条件进行优化;然后将纯培养菌体添加到窖泥样品,采用荧光原位杂交(FISH)法检测菌体回收率;最后按最优预处理条件处理不同窖龄窖... 展开更多; 关键词窖泥预处理条件优化回收率荧光原位杂交法; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株耐高乙醇和低pH己酸产生菌Lysinibacillus fusiformis-pBE_3-ep-SigB的构建被引量：3: 5; 作者薛正楷杨根庆 +1 位作者张宿义倪斌《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第5期162-168,共7页; 以Lysinibacillus fusiformis为出发菌,分别转染Sig A和Sig B突变基因,获得耐高乙醇和低p H胁迫的优良己酸产生菌。以p ET32a(+)-Sig A/Sig B为模板,采用均匀试验优化Sig A/Sig B易错聚合酶链式反应(ep PCR)扩增体系中的Mn^(2+)和Mg^(2+... 展开更多; 关键词 SigA基因 SigB基因易错PCR 高抗性产己酸菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名纯培养微生物荧光原位杂交技术检测的影响因素探究被引量：3: 1; 作者吴冬梅薛正楷周荣清; 机构泸州职业技术学院郎酒学院泸州市生物医学工程研究所四川大学轻纺与食品学院; 出处《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第3期96-100,共5页; 基金国家自然科学基金项目资助(31171742) 四川省重点研发项目-副产物综合加工利用(2021YFS0351)。; 文摘为了研究纯培养微生物荧光原位杂交技术(FISH)检测的影响因素,该实验以大肠杆菌(Escherichia coli)及植物乳杆菌(Lactobacillus planetarium)为研究对象,研究不同种属、不同生长期菌株、菌体预处理方式及杂交条件对基于探针EUB338的FISH检测结果的影响。结果表明,菌体种类及菌体生长阶段均较明显影响FISH计数的准确性;确定超声分散菌体时间60 s(100 W、每30 s间歇)、溶菌酶处理60 min可较大幅度提高FISH对菌体的检出率;杂交时间和洗脱液中NaCl浓度对FISH检测结果影响小,杂交温度、杂交液中甲酰胺浓度对大肠杆菌影响小而对植物乳杆菌有一定影响。; 关键词纯培养微生物荧光原位杂交技术检测预处理杂交条件; Keywords pure culture microorganism fluorescence in situ hybridization detection pretreatment hybridization condition; 分类号 Q815 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA基因的克隆、表达及生物信息学分析被引量：1: 2; 作者薛正楷薛原杨根庆张宿义倪斌; 机构泸州职业技术学院白酒学院泸州市生物医学工程研究所同济大学化学科学与工程学院新乡医学院第三附属医院检验科泸州老窖股份有限责任公司泸州江潭窖酒业有限公司; 出处《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第8期120-124,共5页; 基金四川省科技支撑计划项目(NO.2014FZ0018) 泸州市生物工程研究所重点项目(BME201702); 文摘通过克隆产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA全长基因,并对其进行表达和生物信息学分析。结果表明,SigA基因开放阅读框(ORF)有1 128个碱基,编码327个氨基酸,其分子质量为45.275 kDa;生物信息学预测表明,L.fusiformis与Lysinibacillus sphaericus具有较近的亲缘关系,二者序列相似度达97%;该蛋白为亲水性可溶性蛋白,与Bacillus sp.B14905相似度达100%,其二级结构主要由α-螺旋和loop环状构成,α-螺旋和loop环状分别占其二级结构的60.15%和37.79%;预测并优化的三级结构由14个α-螺旋和15个loop构成。; 关键词产己酸菌 Lysinibacillus fusiformis SigA基因生物信息学; Keywords hexanoic-acid producing bacterium Lysinibacillus fusiformis SigA bioinformatics; 分类号 TS262.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株整合型高抗性高效发酵己酸菌的选育研究被引量：1: 3; 作者薛正楷郑文武张宿义; 机构泸州职业技术学院白酒学院泸州市生物医学工程研究所西南医科大学附属医院泸州老窖股份有限责任公司; 出处《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第8期143-150,共8页; 基金四川省科技支撑计划项目(NO.2014FZ0018) 四川省教育厅理工重点项目(18ZA0250) 泸州市科学技术和知识产权局社会发展项目(2017-S-45(3/3))。; 文摘该试验采用同源重组技术从产己酸菌-纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)基因组中敲出α-淀粉酶基因、蔗糖磷酸化酶基因,同时敲进SigA和SigB基因,以提高L.fusifoemis的抗性,选育高效发酵己酸菌。结果表明,SigA和SigB双整合菌株SigA-SigB4在pH 4、乙醇体积分数6%条件下,己酸产量达到360.86 mg/100 mL,比单整合菌株SigB3提高了1.17倍,比非重组出发株L.fusifoemis提高了8.97倍,且经过32代传代后,其高效产己酸效能无显著变化(P>0.05)。; 关键词整合型产己酸菌选育发酵; Keywords integrated strain caproic acid-producing bacterium breeding fermentation; 分类号 TS261.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于荧光原位杂交法剖析窖泥微生物的预处理条件探究及应用: 4; 作者吴冬梅袁永飞田殿梅薛正楷李进周荣清; 机构泸州职业技术学院郎酒学院泸州老窖股份有限公司泸州市生物医学工程研究所四川大学轻纺与食品学院; 出处《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第12期155-159,共5页; 基金国家自然科学基金项目资助(31171742) 四川省重点研发项目(21ZDYF4107) 四川省高校人文社科重点研究基地“川酒文化国际传播研究中心”资助项目(CJCB 2016-13)。; 文摘该研究首先对浓香型白酒窖泥样品的料液比、离心转速、超声波分散时间、Al_(2)(SO_(4))_(3)添加量等预处理条件进行优化;然后将纯培养菌体添加到窖泥样品,采用荧光原位杂交(FISH)法检测菌体回收率;最后按最优预处理条件处理不同窖龄窖池窖泥,并采用FISH法研究窖泥样品中的微生物。结果表明,窖泥样品的最优预处理条件为料液比1∶16(g∶mL)、离心转速800 r/min、超声分散时间60 s、Al_(2)(SO_(4))_(3)添加量为4.17×10^(-5)mol/g窖泥。在此条件下,FISH法检测大肠杆菌(Escherichia coli)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的菌体回收率分别为62.50%、55.44%,表明优化后的预处理条件对于窖泥微生物的FISH检测是可行的。FISH法检测窖泥微生物,结果显示随着窖池窖龄的增加,窖泥样品中细菌、古菌及菌体总数差异明显,总体呈现出先增加后降低的趋势,在100年窖龄的窖泥样品中,微生物总量最高。; 关键词窖泥预处理条件优化回收率荧光原位杂交法; Keywords pit mud pretreatment condition optimization recovery rate FISH; 分类号 Q815 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株耐高乙醇和低pH己酸产生菌Lysinibacillus fusiformis-pBE_3-ep-SigB的构建被引量：3: 5; 作者薛正楷杨根庆张宿义倪斌; 机构泸州职业技术学院白酒学院泸州市生物医学工程研究所新乡医学院第三附属医院检验科泸州老窖股份有限责任公司泸州江潭窖酒业有限公司; 出处《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第5期162-168,共7页; 基金四川省科技支撑计划项目(NO.2014FZ0018) 四川省教育厅理工重点项目(18ZA0250) 泸州市科学技术和知识产权局社会发展重点项目(2017-S-45(3/3)); 文摘以Lysinibacillus fusiformis为出发菌,分别转染Sig A和Sig B突变基因,获得耐高乙醇和低p H胁迫的优良己酸产生菌。以p ET32a(+)-Sig A/Sig B为模板,采用均匀试验优化Sig A/Sig B易错聚合酶链式反应(ep PCR)扩增体系中的Mn^(2+)和Mg^(2+)浓度,通过ep PCR获得ep-Sig A/Sig B突变基因,与载体p BE_3-MCS连接后,构建L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig A/Sig B突变菌体库,将两种菌体库在p H值2~5和乙醇含量2%~12%条件下进行筛选。结果表明,L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig B重组菌株耐受最高乙醇含量为8%左右,最低耐受p H值为2.5左右;当乙醇含量为8%、p H值为3.5时,L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig B重组菌株的己酸产量达到(254.35±39.74)mg/100 m L,显著高于工程菌株L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig A的己酸产量(P<0.01),且为出发菌L.fusiformis己酸产量(93.62±10.33)mg/100 m L的271.68%,表明L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig B重组菌株具有较强的抗高乙醇浓度和低p H值胁迫产己酸的能力。; 关键词 SigA基因 SigB基因易错PCR 高抗性产己酸菌; Keywords SigA gene SigB gene erro-prone PCR highly resistance caproic acid-producing strain; 分类号 TS275.4 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	纯培养微生物荧光原位杂交技术检测的影响因素探究	吴冬梅薛正楷周荣清	《中国酿造》 CAS 北大核心	2021	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA基因的克隆、表达及生物信息学分析	薛正楷薛原杨根庆张宿义倪斌	《中国酿造》 CAS 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	一株整合型高抗性高效发酵己酸菌的选育研究	薛正楷郑文武张宿义	《中国酿造》 CAS 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	基于荧光原位杂交法剖析窖泥微生物的预处理条件探究及应用	吴冬梅袁永飞田殿梅薛正楷李进周荣清	《中国酿造》 CAS 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	一株耐高乙醇和低pH己酸产生菌Lysinibacillus fusiformis-pBE_3-ep-SigB的构建	薛正楷杨根庆张宿义倪斌	《中国酿造》 CAS 北大核心	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料