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PKCβ/p66Shc氧化应激通路介导高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡的作用
被引量：
13
1
作者
车忠丽
董文斌
+5 位作者
李清平
雷小平
康兰
郭琳
翟雪松
陈枫
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1066-1069,共4页
目的探讨PKCβ/p66Shc氧化应激通路介导高氧诱导人A549肺泡上皮细胞凋亡的作用。方法在体外培养人A549肺泡上皮细胞,随机分为对照组(仍置于含5%CO2培养箱中)、高氧组(通入3 L/min的900 ml/L O2和50 ml/L CO2高纯混合气,10 min后密闭培养...
目的探讨PKCβ/p66Shc氧化应激通路介导高氧诱导人A549肺泡上皮细胞凋亡的作用。方法在体外培养人A549肺泡上皮细胞,随机分为对照组(仍置于含5%CO2培养箱中)、高氧组(通入3 L/min的900 ml/L O2和50 ml/L CO2高纯混合气,10 min后密闭培养)、LY333531组(用终浓度为10μmol/L的等量PKCβ特异性抑制剂LY333531培养液预处理24 h后,用高氧诱导A549细胞,10 min后密闭培养)。倒置相差显微镜观察12、24、48 h后细胞形态变化,流式细胞仪检测24 h后细胞凋亡率,细胞免疫化学检测24 h后细胞中PKCβ/Pin1/p66Shc/p66Shc-Ser36蛋白的表达。结果与对照组相比,高氧组细胞形态变圆,间隙加大,活细胞数量明显降低,悬浮细胞明显增多;LY333531组活细胞数量较高氧组增多,悬浮细胞数减少,但是未达到对照组的水平。高氧组与对照组相比,细胞凋亡率明显增加,LY333531组的凋亡率低于高氧组,差异均有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,高氧组24 h后A549细胞内PKCβ/Pin1/p66Shc/p66Shc-Ser36蛋白表达均明显增加,LY333531组的表达低于高氧组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论高氧能诱导肺泡上皮细胞内PKCβ表达增多,LY333531则能抑制PKCβ蛋白的表达,进而减少Pin1、p66Shc、p66Shc-Ser36蛋白表达,从而减少A549细胞凋亡而减轻高氧诱导的人肺泡上皮细胞的损伤。
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关键词
高氧
蛋白激酶CΒ
氧化应激
肺泡上皮细胞
凋亡
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职称材料
促红细胞生成素对窒息新生儿血清诱导人肾小管细胞TLR4/MyD88表达的影响
被引量：
2
2
作者
孙凤杰
董文斌
+4 位作者
李清平
翟雪松
雷小平
熊涛
陈枫
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1064-1068,共5页
目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对新生儿窒息后血清诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)TLR4/MyD88(Toll-like receptors 4/myeloid differentiation factor 88)表达的影响。方法将HK-2分为对照组、窒息组、EPO组,每组12份,分别检...
目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对新生儿窒息后血清诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)TLR4/MyD88(Toll-like receptors 4/myeloid differentiation factor 88)表达的影响。方法将HK-2分为对照组、窒息组、EPO组,每组12份,分别检测TLR4和MyD88表达情况。对照组加入DMEM/F12培养液,窒息组加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液,EPO组加入含50 IU/ml的EPO培养液预处理后再加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液。其余培养条件3个实验组完全相同,即在37℃、50 ml/L CO2培养箱中培养24 h后,应用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测各组细胞TLR4特异性荧光抗体阳性结合率;免疫组织化学法(SP法)检测各组细胞MyD88表达情况。结果与对照组比较,窒息组细胞形态变化显著,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显增加;与窒息组比较,EPO组细胞形态明显改善,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EPO可减少新生儿窒息后血清诱导的人肾小管上皮细胞TLR4/MyD88的表达。
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关键词
促红细胞生成素
新生儿
窒息
TLR4/MyD88
肾损伤
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职称材料
题名
PKCβ/p66Shc氧化应激通路介导高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡的作用
被引量：
13
1
作者
车忠丽
董文斌
李清平
雷小平
康兰
郭琳
翟雪松
陈枫
机构
泸州医学院
附属
医院
新生儿科
泸州医学院附属医院医学实验研究中心
出处
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1066-1069,共4页
基金
四川省教育厅科研基金(No.08ZA150)
四川省卫生厅科研基金(No.90191)
文摘
目的探讨PKCβ/p66Shc氧化应激通路介导高氧诱导人A549肺泡上皮细胞凋亡的作用。方法在体外培养人A549肺泡上皮细胞,随机分为对照组(仍置于含5%CO2培养箱中)、高氧组(通入3 L/min的900 ml/L O2和50 ml/L CO2高纯混合气,10 min后密闭培养)、LY333531组(用终浓度为10μmol/L的等量PKCβ特异性抑制剂LY333531培养液预处理24 h后,用高氧诱导A549细胞,10 min后密闭培养)。倒置相差显微镜观察12、24、48 h后细胞形态变化,流式细胞仪检测24 h后细胞凋亡率,细胞免疫化学检测24 h后细胞中PKCβ/Pin1/p66Shc/p66Shc-Ser36蛋白的表达。结果与对照组相比,高氧组细胞形态变圆,间隙加大,活细胞数量明显降低,悬浮细胞明显增多;LY333531组活细胞数量较高氧组增多,悬浮细胞数减少,但是未达到对照组的水平。高氧组与对照组相比,细胞凋亡率明显增加,LY333531组的凋亡率低于高氧组,差异均有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,高氧组24 h后A549细胞内PKCβ/Pin1/p66Shc/p66Shc-Ser36蛋白表达均明显增加,LY333531组的表达低于高氧组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论高氧能诱导肺泡上皮细胞内PKCβ表达增多,LY333531则能抑制PKCβ蛋白的表达,进而减少Pin1、p66Shc、p66Shc-Ser36蛋白表达,从而减少A549细胞凋亡而减轻高氧诱导的人肺泡上皮细胞的损伤。
关键词
高氧
蛋白激酶CΒ
氧化应激
肺泡上皮细胞
凋亡
Keywords
hyperoxia
protein kinase C beta
oxidative stress
alveolar epithelial cells
apoptosis
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
促红细胞生成素对窒息新生儿血清诱导人肾小管细胞TLR4/MyD88表达的影响
被引量：
2
2
作者
孙凤杰
董文斌
李清平
翟雪松
雷小平
熊涛
陈枫
机构
四川
泸州医学院
附属
医院
新生儿科
四川
泸州医学院附属医院医学实验研究中心
出处
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1064-1068,共5页
基金
四川省杰出青年学科带头人培养基金(No.04ZQ026-033)
四川省科技厅应用基础项目(No.2008JY0015)
文摘
目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对新生儿窒息后血清诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)TLR4/MyD88(Toll-like receptors 4/myeloid differentiation factor 88)表达的影响。方法将HK-2分为对照组、窒息组、EPO组,每组12份,分别检测TLR4和MyD88表达情况。对照组加入DMEM/F12培养液,窒息组加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液,EPO组加入含50 IU/ml的EPO培养液预处理后再加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液。其余培养条件3个实验组完全相同,即在37℃、50 ml/L CO2培养箱中培养24 h后,应用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测各组细胞TLR4特异性荧光抗体阳性结合率;免疫组织化学法(SP法)检测各组细胞MyD88表达情况。结果与对照组比较,窒息组细胞形态变化显著,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显增加;与窒息组比较,EPO组细胞形态明显改善,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EPO可减少新生儿窒息后血清诱导的人肾小管上皮细胞TLR4/MyD88的表达。
关键词
促红细胞生成素
新生儿
窒息
TLR4/MyD88
肾损伤
Keywords
erythropoietin
neonate
asphyxia
TLR4/ MyD88
renal injury
分类号
R722.1 [医药卫生—儿科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PKCβ/p66Shc氧化应激通路介导高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡的作用
车忠丽
董文斌
李清平
雷小平
康兰
郭琳
翟雪松
陈枫
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
13
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
促红细胞生成素对窒息新生儿血清诱导人肾小管细胞TLR4/MyD88表达的影响
孙凤杰
董文斌
李清平
翟雪松
雷小平
熊涛
陈枫
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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