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川产道地药材三叶黄连HPLC指纹图谱研究 被引量:2
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作者 李春红 何兵 +1 位作者 梅志强 田吉 《安徽农业科学》 CAS 2012年第2期716-718,共3页
[目的]建立川产道地药材三叶黄连的指纹图谱检测标准。[方法]以盐酸小檗碱为参照物,采用依利特SinoChrom ODS-BP(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-浓度0.1%乙酸和10 mmol乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为3... [目的]建立川产道地药材三叶黄连的指纹图谱检测标准。[方法]以盐酸小檗碱为参照物,采用依利特SinoChrom ODS-BP(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-浓度0.1%乙酸和10 mmol乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为345nm。[结果]药材有14个共有峰,共有峰的参数符合"中药注射剂指纹图谱技术要求"的有关规定。[结论]该方法准确、重复性好,建立的指纹图谱检测标准,可作为川产道地药材三叶黄连质量评价与品种鉴别的重要依据之一。 展开更多
关键词 三叶黄连(RHIZOMA COPTIDIS) HPLC 指纹图谱
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四川泸州桂圆的RAPD分析 被引量:1
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作者 梅志强 李春红 +2 位作者 龚舒 刘晓燕 于海清 《安徽农业科学》 CAS 2012年第23期11616-11618,共3页
[目的]对四川泸州桂圆及广西桂圆进行品种鉴定和亲缘关系分析。[方法]以泸州黄舣、海潮、潮河、张坝和广西桂圆品种为试验材料,通过CTAB法提取其叶片总DNA,采用改良的RAPD(随机扩增多态性DNA)技术,筛选重复性好的20条随机引物,并改变从... [目的]对四川泸州桂圆及广西桂圆进行品种鉴定和亲缘关系分析。[方法]以泸州黄舣、海潮、潮河、张坝和广西桂圆品种为试验材料,通过CTAB法提取其叶片总DNA,采用改良的RAPD(随机扩增多态性DNA)技术,筛选重复性好的20条随机引物,并改变从退火到延伸的ramp参数,对5个不同产地的桂圆叶片总基因组DNA进行RAPD分析。[结果]PCR扩增共产生124条清晰可见、重复性好的条带,多态性条带72条占58%,同时,检测出5个桂圆样本的特异RAPD条带;降低ramp参数可以提高PCR产物的分辨率和产量。根据124条计分条带产生遗传关系聚类图,5个产地桂圆的相似系数介于0.59~0.80之间;通过UPGMA聚类分析结果显示,广西桂圆位于聚类树的基部,而泸州4个产地桂圆聚成姐妹支,海潮桂圆与张坝桂圆形成一支,潮河桂圆与黄舣桂圆形成另外一支,相似系数分别为0.80和0.78。[结论]该研究结果表明,泸州桂圆隶属于两大基因池,改良的RAPD技术能有效的进行桂圆品种鉴定及其亲缘关系分析。 展开更多
关键词 RAPD RAMP 桂圆 泸州
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ramp在提高桂圆RAPD分析效率中的应用研究 被引量:1
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作者 梅志强 李春红 +1 位作者 段承刚 刘晓燕 《安徽农业科学》 CAS 2012年第7期3903-3905,共3页
[目的]检验一种提高RAPD技术效率的新方法(调整ramp)。[方法]以四川、福建、广西、广东和海南的桂圆为材料,用改进的CTAB法提取桂圆叶的总DNA,选取了18种重复性好的随机引物来进行RAPD扩增。在RAPD试验中,参数ramp分别设为0.3和3.0℃... [目的]检验一种提高RAPD技术效率的新方法(调整ramp)。[方法]以四川、福建、广西、广东和海南的桂圆为材料,用改进的CTAB法提取桂圆叶的总DNA,选取了18种重复性好的随机引物来进行RAPD扩增。在RAPD试验中,参数ramp分别设为0.3和3.0℃/s,比较它们对桂圆样本RAPD扩增效果的影响,并对几个产地桂圆的亲缘关系进行分析。[结果]当ramp由3.0℃/s降低为0.3℃/s时,可明显提高RAPD的分辨率和产量;通过聚类分析表明5个品种桂圆的遗传距离为0.69~0.76。[结论]该试验证明降低ramp速度可明显提高RAPD技术的分辨率和产量,为RAPD技术提供了一种新的方法。 展开更多
关键词 RAPD RAMP 桂圆 效率
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楤木皂苷抗四氯化碳致大鼠肝纤维化作用 被引量:5
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作者 任美萍 刘艳 +3 位作者 李华 刘明华 张红 吴剑波 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期958-960,966,共4页
目的观察楤木皂苷对四氯化碳致大鼠肝纤维化的保护作用。方法采用质量分数为40%的四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,MASSON染色观察肝组织病理学改变,采集血清检测肝功能及透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)... 目的观察楤木皂苷对四氯化碳致大鼠肝纤维化的保护作用。方法采用质量分数为40%的四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,MASSON染色观察肝组织病理学改变,采集血清检测肝功能及透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、三型胶原蛋白(typesⅢ-collagen,COI-Ⅲ)含量的变化。结果楤木皂苷可抑制肝假小叶的形成和胶原纤维沉积,改善肝功能,降低血清中HA、LN、COI-Ⅲ的含量(P<0.05)。结论楤木皂苷有显著的抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 楤木皂苷 肝纤维化 肝功能
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头孢噻肟钠与奥硝唑氯化钠注射液配伍变色的考察 被引量:10
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作者 李荣 任美萍 +2 位作者 曾敬怀 张润 蒋英蓝 《中国药物警戒》 2013年第4期247-249,共3页
目的考察注射用头孢噻肟钠与奥硝唑氯化钠注射液配伍后的稳定性。方法测定两药配伍后的pH值,溶液颜色变化,采用紫外分光光度计测定吸收曲线变化及含量变化。结果头孢噻肟钠在236nm,奥硝唑在319nm处有最大吸收;混合液在40min时,由微淡黄... 目的考察注射用头孢噻肟钠与奥硝唑氯化钠注射液配伍后的稳定性。方法测定两药配伍后的pH值,溶液颜色变化,采用紫外分光光度计测定吸收曲线变化及含量变化。结果头孢噻肟钠在236nm,奥硝唑在319nm处有最大吸收;混合液在40min时,由微淡黄色澄清液变为淡粉红色;在4h内,混合液的外观、pH值、峰形、含量均无明显变化。结论头孢噻肟钠与奥硝唑氯化钠注射液配伍后可能会变色,临床应避免配伍。 展开更多
关键词 头孢噻肟钠 奥硝唑 紫外分光光度法 稳定性
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中国不同地区荔枝品种的RAPD分析 被引量:4
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作者 梅志强 李春红 龚舒 《安徽农业科学》 CAS 2012年第6期3209-3211,共3页
[目的]对不同地区荔枝品种进行RAPD分析,拟通过该研究为荔枝品种体系分类及育种工作奠定基础。[方法]以采自四川、广西、广东、福建和海南5个地区的荔枝品种为试验材料,通过改进的CTAB法提取其叶片总DNA,选取20对重复性好的随机引物进行... [目的]对不同地区荔枝品种进行RAPD分析,拟通过该研究为荔枝品种体系分类及育种工作奠定基础。[方法]以采自四川、广西、广东、福建和海南5个地区的荔枝品种为试验材料,通过改进的CTAB法提取其叶片总DNA,选取20对重复性好的随机引物进行RAPD扩增,并对该5个荔枝品种进行多态性和亲缘关系分析。[结果]5个荔枝品种多态性为61%,其相似系数为0.571 4~0.803 6,其中广东和广西的相似系数最大,为0.803 6,最小的是四川和海南,为0.571 4。适当延长退火到延伸的时间(即ramp),将其调为0.3℃/s时,可显著提高RAPD的分辨率和产量。[结论]该研究为荔枝品种体系分类以及进一步的育种研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 RAPD RAMP 荔枝 地区
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皂角刺总黄酮的含量测定 被引量:4
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作者 陈海霞 田吉 肖顺汉 《四川生理科学杂志》 2012年第3期101-103,共3页
目的:建立中药皂角刺中总黄酮的含量测定方法。方法:利用紫外可见分光光度法(比色法),以芦丁为标准品,在510nm处测定吸光度,对粗提取和纯化后的皂角刺总黄酮含量进行测定。结果:以芦丁为标准品,建立了标准曲线的回归方程为y=1.1939x-0.0... 目的:建立中药皂角刺中总黄酮的含量测定方法。方法:利用紫外可见分光光度法(比色法),以芦丁为标准品,在510nm处测定吸光度,对粗提取和纯化后的皂角刺总黄酮含量进行测定。结果:以芦丁为标准品,建立了标准曲线的回归方程为y=1.1939x-0.0068,r=0.9999,线性关系在0.053~0.848mg范围内。总黄酮平均回收率为96.7%,RSD为2.02%(n=6)。结论:该法方法简单,稳定性、重现性均良好,结果可靠,可作为皂角刺总黄酮的质量控制。 展开更多
关键词 皂角刺 总黄酮 分光光度法
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黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用及机制探讨 被引量:9
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作者 卢科莲 喻小兰 +1 位作者 夏纪毅 毛熙光 《山东医药》 CAS 2014年第27期4-7,共4页
目的观察黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能机制。方法体外培养的宫颈癌Hela细胞分为3组,A组加入100μmol/L黄芩素,B组加入200μmol/L黄芩素,C组加入不含黄芩素的无血清DMEM高糖培养基,处理24 h。相差显微镜观察细胞... 目的观察黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能机制。方法体外培养的宫颈癌Hela细胞分为3组,A组加入100μmol/L黄芩素,B组加入200μmol/L黄芩素,C组加入不含黄芩素的无血清DMEM高糖培养基,处理24 h。相差显微镜观察细胞形态及数量,流式细胞技术检测细胞周期,明胶酶谱法检测细胞培养基中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9活性,RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9、大鼠肉瘤蛋白(Ras)、细胞周期素D1(CyclinD1)、整合素β1(Integrinβ1)mRNA,Western blotting法检测MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1蛋白。结果与C组相比较,A、B组细胞数量减少,细胞形态从不规则类圆形转变为多角梭形。A、B、C组S期细胞百分比分别为24.58%、19.41%、34.05%,G1期细胞百分比分别为72.67%、79.17%、64.88%,A、B组与C组比较,P均<0.05。A、B、C组培养基中MMP-2活性分别为32.651±0.571、28.987±1.033、36.127±1.184,MMP-9活性分别为33.217±0.660、29.277±0.868、39.613±0.318,A、B组与C组比较,P均<0.05。A组MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1 mRNA表达水平分别为1.012±0.045、1.009±0.030、0.988±0.036、1.013±0.034、0.983±0.036,B组分别为0.849±0.026、0.914±0.027、0.626±0.029、0.806±0.037、0.799±0.037,C组分别为1.199±0.029、1.087±0.024、1.413±0.026、1.203±0.029、1.224±0.025,A、B组与C组比较,P均<0.05。A组MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1蛋白表达水平分别为0.693±0.025、0.886±0.032、1.127±0.028、1.061±0.028、1.159±0.031,B组分别为0.326±0.022、0.754±0.024、0.782±0.183、0.321±0.027、0.481±0.028,C组分别为1.914±0031、1.487±0.016、1.323±0.303、1.816±0.025、1.467±0.036,A、B组与C组比较,P均<0.05。结论黄芩素可抑制宫颈癌Hela细胞增殖,其机制可能为将细胞阻滞于G1期,降低细胞培养基中MMP-2、MMP-9活性,下调细胞MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1 mRNA及蛋白表达。 展开更多
关键词 黄芩素 宫颈癌 宫颈肿瘤 HELA细胞 基质金属蛋白酶 大鼠肉瘤蛋白 细胞周期素D1 整合素Β1
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维拉帕米对肝星状细胞凋亡和Bax表达的影响
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作者 任美萍 刘明华 +1 位作者 李蓉 李万平 《四川生理科学杂志》 2013年第2期55-57,共3页
目的:观察维拉帕米对人肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)凋亡以及凋亡相关蛋白Bax表达的影响。方法:采用不同浓度的维拉帕米对HSCs处理48h,CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8)检测细胞增殖抑制率,HE染色观察细胞形态超微结构的变... 目的:观察维拉帕米对人肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)凋亡以及凋亡相关蛋白Bax表达的影响。方法:采用不同浓度的维拉帕米对HSCs处理48h,CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8)检测细胞增殖抑制率,HE染色观察细胞形态超微结构的变化,流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测HSCs细胞的凋亡率,免疫组化SABC法检测Bax表达的变化。结果:维拉帕米可抑制HSCs的增殖,随浓度的增加,抑制作用增强,其IC50值为0.15±0.01mol.L-1;HE染色可见维拉帕米组出现不同程度的细胞体积变小、核浓缩深染等凋亡形态改变;AnnexinV/PI双染法检测显示,不同浓度的维拉帕米均可诱导HSCs细胞凋亡,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化检测显示,与对照组比较,维拉帕米组Bax表达增强(P<0.05)。结论:维拉帕米可诱导HSCs凋亡,增强Bax的表达。结果:维拉帕米;肝星状细胞;凋亡; 展开更多
关键词 时间生物学 凋亡
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