甲基莲心碱对豚鼠心肌及猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用(英文) 被引量：18

1

作者 杨艳 税青林 +3 位作者 曾晓荣 刘智飞 周文 李妙龄 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期405-410,共6页

用膜片钳单通道技术 ,观察在细胞膜内侧加入甲基莲心碱 (Nef)后 K+通道特性的改变 ,以研究Nef对豚鼠心室肌细胞及猪冠状动脉平滑肌细胞K+通道的作用 .结果 :Nef可使心肌细胞及冠脉平滑肌细胞上 K+通道开放概率 (PO)降低 . 1 0 ,2 0μmol... 用膜片钳单通道技术 ,观察在细胞膜内侧加入甲基莲心碱 (Nef)后 K+通道特性的改变 ,以研究Nef对豚鼠心室肌细胞及猪冠状动脉平滑肌细胞K+通道的作用 .结果 :Nef可使心肌细胞及冠脉平滑肌细胞上 K+通道开放概率 (PO)降低 . 1 0 ,2 0μmol· L-1Nef分别使心肌细胞 K+通道降低 (50± 32 ) %和 (96± 5) % ,30 ,50 μmol· L-1的 Nef分别使猪冠脉平滑肌细胞上 K+通道 PO 降低 (51±2 1 ) %和 (71± 1 4) % .结果表明 ,Nef可从通道内口阻断心肌及平滑肌细胞上 K+通道 。 展开更多

关键词 甲基莲心碱 膜片钳技术 钾通道 心肌 冠状血管

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三种显微技术对人毛囊蠕形螨的观察和研究 被引量：9

2

作者 佘俊萍 张锡林 +3 位作者 王光西 荣华 牛慧 王利芳 《四川动物》 CSCD 北大核心 2011年第1期47-49,F0004,共4页

目的采用荧光显微镜、扫描电镜和激光共聚焦显微镜对人体毛囊形蠕形螨进行形态学观察。方法选用5μg/mL碘化丙啶(propidine iodide,PI)对虫体进行荧光染色,避光染色15min,分别置于荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察;2.5%戊二醛固定虫... 目的采用荧光显微镜、扫描电镜和激光共聚焦显微镜对人体毛囊形蠕形螨进行形态学观察。方法选用5μg/mL碘化丙啶(propidine iodide,PI)对虫体进行荧光染色,避光染色15min,分别置于荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察;2.5%戊二醛固定虫体标本,梯度酒精和叔丁醇脱水,金喷镀后扫描电镜观察。结果荧光显微镜下碘化丙啶对虫体有很强的结合力,虫体荧光信号均匀展示于细胞表面,充分展现虫体形态,扫描电镜更加清楚、细致地展示人体毛囊型蠕形螨的超微结构,激光共聚焦显微镜将虫体分层扫描图片进行三维重建,真实、完全、直观地展露了虫体。结论三种显微技术均可展示蠕形螨超微形态。PI对虫体有很好的荧光染色作用,使激光扫描共聚焦显微镜能够获得更加精准的超微形态结构,结合三维重建技术有着广泛的应用价值。 展开更多

关键词 毛囊形蠕形螨 碘化丙啶 荧光显微镜 激光共聚焦显微镜 扫描电镜

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免疫组化技术对斯氏狸殖吸虫成虫免疫诊断相关抗原的初步研究 被引量：4

3

作者 牛靖萱 张锡林 +3 位作者 王利芳 陈文碧 何谐 陈琳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期654-657,共4页

目的初步分析斯氏狸殖吸虫成虫表膜和肠相关抗原,探讨肺吸虫病的免疫诊断的特异性诊断抗原。方法斯氏狸殖吸虫成虫制备成15μm的冰冻切片,肺吸虫患者血清识别斯氏狸殖吸虫成虫特异性抗原,采用免疫金标记和免疫酶标记检测技术对抗原进行... 目的初步分析斯氏狸殖吸虫成虫表膜和肠相关抗原,探讨肺吸虫病的免疫诊断的特异性诊断抗原。方法斯氏狸殖吸虫成虫制备成15μm的冰冻切片,肺吸虫患者血清识别斯氏狸殖吸虫成虫特异性抗原,采用免疫金标记和免疫酶标记检测技术对抗原进行定位,激光共聚焦显微镜技术进行半定量分析以及免疫透射电镜对其细微结构的观察。分实验组和对照组。结果肺吸虫患者血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原定位于虫体的表膜和肠腔,表膜抗原半定量分析平均灰度值为80.65,肠腔抗原半定量分析平均灰度值为71.26,电镜下可见胶体金附着于肠腔和表膜的双层结构。结论肺吸虫患者血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原都为表膜相关抗原和肠相关抗原,因此与肺吸虫病免疫诊断相关的诊断抗原为虫体表膜和肠上皮产生的相关蛋白。 展开更多

关键词 斯氏狸殖吸虫 表膜 肠腔 免疫组化

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荧光双染和三维重建技术对蠕形螨的形态观察和功能探讨 被引量：3

4

作者 佘俊萍 张锡林 +3 位作者 王光西 孙源 王利芳 胡朝惠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期705-708,共4页

目的分别采用两种荧光染料对人体蠕形螨染色后置于激光共聚焦显微镜下进行三维重建,对其重要结构进行功能性探讨。方法先用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)对虫体进性初染,再用碘化丙啶(propidium iodide,PI)复染,置... 目的分别采用两种荧光染料对人体蠕形螨染色后置于激光共聚焦显微镜下进行三维重建,对其重要结构进行功能性探讨。方法先用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)对虫体进性初染,再用碘化丙啶(propidium iodide,PI)复染,置于激光共聚焦显微镜下,用Imaris5.0软件进行三维重建,观测、鉴定毛囊蠕形螨形态特征。结果异硫氰酸和碘化丙啶均能与虫体充分结合,在三维重建技术下清楚观察到了虫体外部形态及前段摄食通道等内部结构。结论荧光双染和三维重建技术的结合,对深入研究人体蠕形外部形态、内部结构及探讨其功能、意义奠定了坚实基础。 展开更多

关键词 蠕形螨 异硫氰酸 碘化丙啶 三维重建

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云南省威信县24例肺吸虫病病原追踪调查 被引量：5

5

作者 王光西 黄玉清 +4 位作者 陈文碧 佘俊萍 王曼 毛樱逾 张锡林 《四川动物》 CSCD 北大核心 2012年第4期605-607,共3页

目的对云南省威信县肺吸虫病病原进行疫点追踪调查。方法收集2008～2011年确诊的来自威信县的肺吸虫病患者24例,根据病例追踪,自当地疫点采集溪蟹,带回实验室检查并殖吸虫囊蚴,鉴定虫种。结果 24例患者中游走性包块11例,占45.83%,胸腔... 目的对云南省威信县肺吸虫病病原进行疫点追踪调查。方法收集2008～2011年确诊的来自威信县的肺吸虫病患者24例,根据病例追踪,自当地疫点采集溪蟹,带回实验室检查并殖吸虫囊蚴,鉴定虫种。结果 24例患者中游走性包块11例,占45.83%,胸腔积液型11例,占45.83%,脑型1例,占4.16%,睾丸鞘膜积液1例,占4.16%。患者主要来自扎西镇、长安乡和双河乡。检查溪蟹278只,斯氏并殖吸虫囊蚴感染率为34.17%(95/278),其中扎西镇溪蟹囊蚴感染率为33.08%(43/130),平均感染度11.63(500/43),长安村溪蟹囊蚴感染率为35.14%(52/148),平均感染度8.98(467/52)。结论云南威信县是肺吸虫病疫源地,第二中间宿主为锯齿华溪蟹,致病虫种为斯氏并殖吸虫,应加强当地肺吸虫病防治。 展开更多

关键词 肺吸虫病 溪蟹 云南威信

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诃子鞣质提取物对白假丝酵母的抗菌活性研究 被引量：6

6

作者 周铁军 向丽 +1 位作者 杨成万 龚莉 《安徽农业科学》 CAS 2012年第15期8547-8550,共4页

[目的]研究诃子鞣质提取物对白假丝酵母的体外抗菌活性。[方法]利用超声波提取诃子有效成分鞣质,采用福林-酚比色法检测鞣质的含量,并采用微量稀释法研究诃子鞣质提取物对白假丝酵母的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC),观察光学显... [目的]研究诃子鞣质提取物对白假丝酵母的体外抗菌活性。[方法]利用超声波提取诃子有效成分鞣质,采用福林-酚比色法检测鞣质的含量,并采用微量稀释法研究诃子鞣质提取物对白假丝酵母的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC),观察光学显微镜和荧光显微镜下白假丝酵母形态结构的变化。[结果]诃子鞣质提取物对白假丝酵母的最低抑菌浓度为15.33 mg/ml,而最低杀菌浓度为30.67 mg/ml。诃子鞣质提取物可导致白假丝酵母细胞变形、形态结构改变,最终导致其死亡,同时会抑制细胞芽管、假菌丝的形成。[结论]诃子鞣质提取物对白假丝酵母具有抑制和杀灭作用。 展开更多

关键词 诃子 鞣质 白假丝酵母 抗菌活性

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分光光度法测定青果多酚的含量 被引量：6

7

作者 向丽 周铁军 王光西 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第6期1242-1244,共3页

以没食子酸为标准品,使用酚试剂,采用分光光度法对青果(Fructus canarii)多酚的含量进行检测。结果表明,酚试剂用量为1.5 mL,与6 mL质量分数10%的Na2CO3溶液混合,30℃反应60 min,于765 nm处测定吸光度,没食子酸浓度在0.5～2.5 mg/L范围... 以没食子酸为标准品,使用酚试剂,采用分光光度法对青果(Fructus canarii)多酚的含量进行检测。结果表明,酚试剂用量为1.5 mL,与6 mL质量分数10%的Na2CO3溶液混合,30℃反应60 min,于765 nm处测定吸光度,没食子酸浓度在0.5～2.5 mg/L范围内与吸光度有良好的线性关系,回归方程为y=0.121 2x+0.004 0。该方法能较准确地定量分析青果多酚含量,具有简便、快速、稳定,重现性好的优点。 展开更多

关键词 分光光度法 酚试剂 青果(Fructus canarii) 多酚

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人乳头瘤病毒16型L1基因乳酸杆菌表达载体的构建 被引量：3

8

作者 罗波 段素群 +1 位作者 郑小莉 毛樱逾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期50-52,共3页

目的:构建含人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的乳酸杆菌分泌表达载体。方法:从培养的CasKi细胞中提取DNA为模板,经PCR得到HPV16L1衣壳蛋白基因,将其连接入乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523质粒中,并转化入Top10菌中保存。结果:构建的HPV16L1-... 目的:构建含人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的乳酸杆菌分泌表达载体。方法:从培养的CasKi细胞中提取DNA为模板,经PCR得到HPV16L1衣壳蛋白基因,将其连接入乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523质粒中,并转化入Top10菌中保存。结果:构建的HPV16L1-pVE5523重组表达载体经PCR鉴定正确;获得的目的基因片段经测序与GenBank公布的HPV16L1基因序列符合。结论:成功构建了HPV16L1-pVE5523表达载体。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 L1基因 乳酸杆菌 pVE5523 表达载体

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青果多酚超声波醇提工艺条件的研究 被引量：5

9

作者 向丽 周铁军 +1 位作者 叶迎春 王光西 《安徽农业科学》 CAS 2012年第2期772-774,共3页

[目的]研究超声波醇提青果多酚的工艺条件。[方法]采用超声波醇提青果多酚,通过单因素试验和正交试验优化最佳超声波提取条件。[结果]影响提取率的因素顺序为乙醇浓度>料液比>超声波功率>提取时间;超声波最佳提取条件为乙醇浓... [目的]研究超声波醇提青果多酚的工艺条件。[方法]采用超声波醇提青果多酚,通过单因素试验和正交试验优化最佳超声波提取条件。[结果]影响提取率的因素顺序为乙醇浓度>料液比>超声波功率>提取时间;超声波最佳提取条件为乙醇浓度40%、超声功率40 W、料液比1∶20(g/ml)、提取时间45 min,在此条件下,青果多酚的得率为3.422%。[结论]该研究优选出了超声提取青果多酚的最佳工艺条件,为青果药用价值的开发奠定了基础。 展开更多

关键词 青果(FRUCTUS CANARII) 多酚 超声波

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细胞爬片集成染色法及应用 被引量：2

10

作者 罗波 毛樱逾 +1 位作者 郑小莉 李洪 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第4期615-617,共3页

细胞爬片是根据实验研究的需要,使贴壁细胞在一定的固相表面（如盖玻片、载玻片）上贴壁生长而获得的一种体外细胞实验材料。许多被检样本量庞大、待测指标众多的科研课题,经常需要对大量的细胞爬片进行HE染色、

关键词 细胞爬片 集成 染色

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混合培养体系对实际染料废水的脱色与降解研究 被引量：4

11

作者 张金平 阚振荣 苏维 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第18期11032-11034,共3页

[目的]研究混合培养体系对染料废水的脱色和降解条件,为印染工业废水的大规模生物处理奠定基础。[方法]利用4株丝状真菌和4株细菌组建一真菌细菌混合培养体系,考察了该混合培养体系在不同条件下对2种染料废水的脱色与降解效果。[结果]2... [目的]研究混合培养体系对染料废水的脱色和降解条件,为印染工业废水的大规模生物处理奠定基础。[方法]利用4株丝状真菌和4株细菌组建一真菌细菌混合培养体系,考察了该混合培养体系在不同条件下对2种染料废水的脱色与降解效果。[结果]2种废水在中和预处理使pH在6.0左右后,真菌与细菌以2∶1同时接种效果较好,通氧有利于脱色与降解,处理时间因水质而异。对深蓝废水12 h脱色率和降解率分别达到98.36%和92.70%;对难于脱色的中红废水24 h脱色率和降解率分别达到87.22%和82.98%。通过全波长扫描图谱,证明了大部分染料被降解。[结论]通过研究确定了该混合培养体系对染料废水脱色和降解的最佳条件。 展开更多

关键词 实际染料废水 脱色 降解 混合菌群

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斯氏狸殖吸虫感染大鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化及意义

12

作者 王敏 王光西 +3 位作者 畅灵丽 李鹏华 张跃辉 陈枫 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第1期63-64,68,共3页

目的探讨斯氏狸殖吸虫病宿主体内T淋巴细胞亚群在免疫调节和发病中的作用。方法将35只清洁级Sprague-Dawley(SD)雄性成年大鼠随机分成7组,其中6组每只鼠腹腔注射斯氏狸殖吸虫囊蚴25个,分别于感染后1w、3w、5w、7w、11w、15w取大鼠外周全... 目的探讨斯氏狸殖吸虫病宿主体内T淋巴细胞亚群在免疫调节和发病中的作用。方法将35只清洁级Sprague-Dawley(SD)雄性成年大鼠随机分成7组,其中6组每只鼠腹腔注射斯氏狸殖吸虫囊蚴25个,分别于感染后1w、3w、5w、7w、11w、15w取大鼠外周全血,采用流式细胞术(FCM)检测CD4+、CD8+T淋巴细胞的百分率。最后一组为正常对照组。结果大鼠感染斯氏狸殖吸虫后其外周血CD4+T淋巴细胞亚群水平无明显变化;CD8+T淋巴细胞亚群水平感染后均高于正常水平,1w、5w、11w、15w与对照组比较有显著差异(P<0.05),其中5w增加最为显著;CD4+/CD8+细胞比值在感染后均低于正常水平,5w降至最低,5w、7w、11w与对照组比较差异显著(P<0.05)。结论感染斯氏狸殖吸虫的大鼠主要以CD8+T淋巴细胞反应为主,使机体呈免疫抑制状态,有利于斯氏狸殖吸虫的移行、生长和发育。 展开更多

关键词 斯氏狸殖吸虫 大鼠 流式细胞术 CD4^+T淋巴细胞 CD8^+T淋巴细胞

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斯氏并殖吸虫抗原致大鼠脑组织病变的光镜、电镜观察

13

作者 黄玉清 李珍炼 +4 位作者 陈文碧 佘俊萍 杨朝鲜 程基焱 王光西 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1107-1109,共3页

目的研究斯氏并殖吸虫大鼠脑病的病理改变。方法自并殖吸虫流行区采集溪蟹,分离斯氏并殖吸虫囊蚴,经腹腔注射感染犬,3个月后剖杀,检获斯氏狸殖吸虫成虫制备抗原,用于制作SD大鼠肺吸虫脑病模型。将6只SD雄性大鼠随机等分为并殖吸虫注射... 目的研究斯氏并殖吸虫大鼠脑病的病理改变。方法自并殖吸虫流行区采集溪蟹,分离斯氏并殖吸虫囊蚴,经腹腔注射感染犬,3个月后剖杀,检获斯氏狸殖吸虫成虫制备抗原,用于制作SD大鼠肺吸虫脑病模型。将6只SD雄性大鼠随机等分为并殖吸虫注射抗原的实验组、注射生理盐水的对照组。24h后解剖大鼠,取脑组织、固定、切片。光镜观察大鼠脑组织病理变化,电镜观察超微结构病理变化。结果 HE显示抗原注射大鼠脑血肿周围组织水肿明显,且局灶状坏死,神经元皱缩,尼氏小体溶解,周围出现间隙,神经突呈浅淡或消失,可见单核细胞及胶质细胞反应。电镜显示抗原注射组大鼠大脑皮质神经元胞体肿胀,核移位且形状不规则,核膜凸凹不平,核质溢出;染色质为絮状;线粒体肿胀,粗面内质网扩张呈囊泡化;脂褐素较多。结论肺吸虫抗原注射大鼠脑可引起脑组织光镜和超微结构改变:细胞肿胀,线粒体肿胀,内质网扩张。 展开更多

关键词 斯氏并殖吸虫 抗原 大鼠 脑组织 超微结构病理

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斯氏并殖吸虫感染犬肝、肺组织中JAK-STAT和NF-Κβ的表达

14

作者 李珍炼 黄玉清 +2 位作者 张锡林 陈文碧 王光西 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期812-815,共4页

目的探讨JAK-STAT、NF-Κβ在斯氏并殖吸虫感染犬肺、肝组织表达和意义。方法自流行区采集溪蟹,分离斯氏并殖吸虫囊蚴,经腹腔注射感染犬,3月后剖杀,取肝、肺组织,固定、切片,HE染色后光镜下观察虫体周围的组织细胞反应,免疫组织化学方... 目的探讨JAK-STAT、NF-Κβ在斯氏并殖吸虫感染犬肺、肝组织表达和意义。方法自流行区采集溪蟹,分离斯氏并殖吸虫囊蚴,经腹腔注射感染犬,3月后剖杀,取肝、肺组织,固定、切片,HE染色后光镜下观察虫体周围的组织细胞反应,免疫组织化学方法观察JAK-STAT和NF-Κβ的表达水平。结果肝、肺组织中虫体周围出现较明显的坏死区、出血灶和炎症反应,有嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞的浸润;肝、肺组织中JAK-STAT、NF-Κβ呈阳性表达,比正常组织表达高(P<0.05)。结论斯氏并殖吸虫在肝、肺组织中的机械破坏作用和炎症病理反应激活了JAK-STAT、NF-Κβ信号的表达。 展开更多

关键词 JAK-STAT NF-ΚΒ 斯氏并殖吸虫 免疫组化

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斯氏狸殖吸虫线粒体Cytb基因在不同虫期的转录水平分析 被引量：1

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作者 王曼 张锡林 +4 位作者 黄玉清 陈文碧 佘俊萍 向丽 王光西 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1187-1191,共5页

目的研究斯氏狸殖吸虫线粒体Cytb(cytochrome B)基因在不同虫期的转录水平以更深入了解该吸虫的物质代谢途径,探索药物作用的药靶。方法分别提取斯氏狸殖吸虫5个虫期的总RNA,并反转录为cDNA。将目的基因质粒作为标准品制作标准曲线,以5... 目的研究斯氏狸殖吸虫线粒体Cytb(cytochrome B)基因在不同虫期的转录水平以更深入了解该吸虫的物质代谢途径,探索药物作用的药靶。方法分别提取斯氏狸殖吸虫5个虫期的总RNA,并反转录为cDNA。将目的基因质粒作为标准品制作标准曲线,以5个虫期的cDNA为模板,特异引物为实验组引物,卫氏并殖吸虫的18SrDNA基因引物作为内参引物做实时荧光定量PCR,分析斯氏狸殖吸虫线粒体Cytb基因分别在5个虫期的转录水平。结果标准曲线线性关系良好,回归系数γ=0.994。产物熔解曲线分析结果均显示为单一波峰。定量分析结果显示,斯氏狸殖吸虫线粒体Cytb转录主要在囊蚴期、30d幼虫期及60d童虫期,并且是逐步升高趋势,但成虫期转录较少,虫卵期没有转录。结论斯氏狸殖吸虫线粒体Cytb基因在不同虫期的转录水平有差别,在60d童虫期高转录,提示Cytb基因在幼虫的发育和移行中起着重要作用。 展开更多

关键词 斯氏狸殖吸虫 线粒体Cytb基因 REALTIME PCR 转录水平

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斯氏并殖吸虫线粒体Cytb基因的扩增、测序以及遗传进化分析 被引量：1

16

作者 王曼 张锡林 +4 位作者 黄玉清 陈文碧 佘俊萍 向丽 王光西 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1191-1195,共5页

目的扩增出斯氏并殖吸虫线粒体Cytb(cytochrome B)基因片段并测序,分析该基因对吸虫遗传分类的意义。方法提取斯氏并殖吸虫成虫基因组DNA,PCR扩增线粒体Cytb基因,克隆质粒并测序。在NCBI的GeneBank中作相似性和同源性检索,用DNAsis等软... 目的扩增出斯氏并殖吸虫线粒体Cytb(cytochrome B)基因片段并测序,分析该基因对吸虫遗传分类的意义。方法提取斯氏并殖吸虫成虫基因组DNA,PCR扩增线粒体Cytb基因,克隆质粒并测序。在NCBI的GeneBank中作相似性和同源性检索,用DNAsis等软件分析这些吸虫的线粒体Cytb基因,采用最大简约法(MP)和邻位相连法(NJ)构建系统进化树,用MEGA4软件对遗传距离进行计算分析。结果获得542bp的斯氏并殖吸虫线粒体Cytb基因片段,通过在GeneBank数据库中Blast发现,斯氏并殖吸虫的Cytb序列与日本血吸虫(中国流行区虫种)、异盘并殖吸虫、哈氏并殖吸虫以及巨睾吸虫等7种吸虫有相似性,斯氏并殖吸虫与日本血吸虫的遗传距离最近。结论线粒体Cytb基因可作为吸虫遗传进化分类的依据之一,也是斯氏并殖吸虫与血吸虫等易出现较高的交叉反应率的原因之一。 展开更多

关键词 斯氏并殖吸虫 线粒体Cytb基因 序列 遗传进化树

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