拟鹅观草属与鹅观草属和披碱草属属间及种间杂种的细胞学研究 被引量：7

1

作者 张春 王晓丽 +2 位作者 于海清 张海琴 周永红 《草业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期86-93,共8页

为探讨在二倍体拟鹅观草属物种中St基因组的分化及其系统关系,本试验通过对3个二倍体拟鹅观草的种间杂种及黎巴嫩拟鹅观草和托瑞拟鹅观草与4个四倍体鹅观草属物种(StY)和3个披碱草属(StH,StYW)物种的属间杂种F1花粉母细胞减数分裂中期I... 为探讨在二倍体拟鹅观草属物种中St基因组的分化及其系统关系,本试验通过对3个二倍体拟鹅观草的种间杂种及黎巴嫩拟鹅观草和托瑞拟鹅观草与4个四倍体鹅观草属物种(StY)和3个披碱草属(StH,StYW)物种的属间杂种F1花粉母细胞减数分裂中期I染色体配对行为及繁育特性进行分析。结果表明,1)中东的拟鹅观草二倍体物种(黎巴嫩拟鹅观草和托瑞拟鹅观草)中St染色体组与来自北美的物种(穗状拟鹅观草)可能存在差异;2)St染色体组在鹅观草属物种中(StY)和在披碱草属物种中(StH,StYW)均存在一定程度的变异,具有一定程度的分化;3)St染色体组与Y染色体组具有一定程度的同源性,亲缘关系较近,而与H染色体组的关系较远。 展开更多

关键词 种间杂交 属间杂交 染色体组分化 减数分裂 染色体配对

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ONO-AE-248诱发的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡 被引量：7

2

作者 刘佳佳 张姿 +2 位作者 何浩 李昕 何延政 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期541-543,共3页

目的:观察前列腺素E2受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248对中性粒细胞的影响。方法:运用电子显微镜、MTS法、RT-PCR和流式细胞术等技术,对中性粒细胞的形态变化、生物学活性及凋亡进行观察和评估,并对EP3受体进行分析。结果:中性粒细胞存在... 目的:观察前列腺素E2受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248对中性粒细胞的影响。方法:运用电子显微镜、MTS法、RT-PCR和流式细胞术等技术,对中性粒细胞的形态变化、生物学活性及凋亡进行观察和评估,并对EP3受体进行分析。结果:中性粒细胞存在EP3受体基因的表达,以5mmol/L的ONO-AE-248作用12h后,其多叶核融合为单叶核,核膜起泡、破裂,核质溢出,细胞死亡;但其快速死亡不具有细胞凋亡和坏死的形态特征且需要能量(ATP)供应。结论:ONO-AE-248所致这种新型细胞主动死亡的形式,可能为“非凋亡性程序化细胞死亡”的一种,这对于重新认识和定位中性粒细胞在非特异性免疫中的作用和地位提出了新的思路。 展开更多

关键词 ONO-AE-248 非凋亡性程序化细胞死亡 中性粒细胞 凋亡 坏死

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ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化 被引量：4

3

作者 张姿 刘佳佳 +4 位作者 姚富丽 何浩 羊建 谢华福 何涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期413-415,共3页

目的研究前列腺素E受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248诱导的中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化,探讨PMN死亡形式的多样性和复杂性。方法运用透射电镜、荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察PMN在自发性凋亡与ONO-AE-24... 目的研究前列腺素E受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248诱导的中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化,探讨PMN死亡形式的多样性和复杂性。方法运用透射电镜、荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察PMN在自发性凋亡与ONO-AE-248刺激下亚细胞微结构的变化。结果以5mmol/L的ONO-AE-248刺激PMN12h后,电镜观察绝大多数PMN的多叶核融合为单叶核,核质疏松,核膜分层、起泡甚至破裂,核质溢出,但细胞膜较完整,细胞器无明显改变。以荧光染料DAPI标染活细胞核,ONO-AE-248刺激后,PMN表现为多叶核融合成大而模糊的球形,核染色密度较低;ONO-AE-248刺激的PMN死亡仍有细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)的外翻。ONO-AE-248刺激组与自发性凋亡组PMN在线粒体的形态结构、分布和细胞质内的染色性均有明显差异。结论ONO-AE-248在体外能刺激人PMN发生非凋亡性程序化细胞死亡,这一刺激过程不影响自发性凋亡的PMN细胞膜PS的外翻,并且细胞核和线粒体的改变是其早期最为显著的形态学改变,提示二者可能是ONO-AE-248刺激的靶标和早期的药物反应中心。 展开更多

关键词 ONO-AE-248 中性粒细胞 线粒体 凋亡 非凋亡性程序化细胞死亡

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拟鹅观草属3种植物的核型研究(英文) 被引量：5

4

作者 于海清 丁春邦 周永红 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1590-1594,共5页

对禾本科小麦族拟鹅观草属物种Pseudoroegneria geniculata、P.geniculata ssp. scythica和P.geniculata ssp. pruinifera的核型进行了研究。结果显示:P.geniculata和P.geniculata ssp. scythica为四倍体物种,P.geniculata ssp. pruinif... 对禾本科小麦族拟鹅观草属物种Pseudoroegneria geniculata、P.geniculata ssp. scythica和P.geniculata ssp. pruinifera的核型进行了研究。结果显示:P.geniculata和P.geniculata ssp. scythica为四倍体物种,P.geniculata ssp. pruinifera为六倍体物种;P.geniculata、P.geniculata ssp. scythica和P.geniculata ssp. pruinif-era的核型公式分别为2n=4x=28=18 m(2sat)+10sm(2sat)、2n=4x=28=28 m(2sat)和2n=6x=42=36 m(6sat)+6sm(2sat);P.geniculata和P.geniculata ssp. pruinifera为2A核型,而P.geniculata ssp. scythica为1A核型。研究表明:3种植物的核型存在差异;P.geniculata ssp. pruinifera的核型为首次报道,其核型明显不同于P.geniculata和P.geniculata ssp.scythica。 展开更多

关键词 核型 拟鹅观草属 PSEUDOROEGNERIA geniculata P.geniculata ssp.scythica P.geniculata ssp.pruinifera

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ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化死亡线粒体形态结构的变化 被引量：2

5

作者 羊建 刘佳佳 +2 位作者 薛晓婕 张姿 何浩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期492-494,共3页

目的:探讨线粒体形态结构的变化在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中的作用及意义。方法:Ficoll法分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,与ONO-AE-248共同培养,透射电子显微镜观察线粒体形态结构的改变;流式细胞术检测线... 目的:探讨线粒体形态结构的变化在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中的作用及意义。方法:Ficoll法分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,与ONO-AE-248共同培养,透射电子显微镜观察线粒体形态结构的改变;流式细胞术检测线粒体膜势能的变化。结果:ONO-AE-248刺激6小时,中性粒细胞线粒体显著肿胀,嵴断裂,数目增多;ONO-AE-248早期迅速导致中性粒细胞线粒体膜势能的溃散。结论:线粒体变化是ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化死亡区别于凋亡的早期形态学特征事件之一。线粒体可能在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡中扮演更为关键性的角色。 展开更多

关键词 线粒体 中性粒细胞 ONO-AE-248 凋亡 非凋亡性程序化细胞死亡

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八肽胆囊收缩素对骨髓间充质干细胞诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响 被引量：3

6

作者 王丽 何涛 +2 位作者 于海清 李娟 段承刚 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期241-244,共4页

为探讨八肽胆囊收缩素(CCK8)对骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响,在β-巯基乙醇诱导MSCs分化的基础上加入CCK8,观察诱导期间细胞形态变化及分化细胞的存活时间,免疫细胞化学法鉴定神经元特异性巢蛋白(Nestin... 为探讨八肽胆囊收缩素(CCK8)对骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响,在β-巯基乙醇诱导MSCs分化的基础上加入CCK8,观察诱导期间细胞形态变化及分化细胞的存活时间,免疫细胞化学法鉴定神经元特异性巢蛋白(Nestin)的表达,唑盐比色实验(MTT)法检测细胞活性。结果表明,加入CCK8的部分实验组与基础诱导组相比,可延长神经元样细胞的生存时间;诱导后5 h,Nestin阳性表达率变化不明显(P>0.05),诱导后10 h,神经元样细胞的活性可明显增强(P<0.05)。该结果说明,CCK8在β-巯基乙醇体外诱导大鼠MSCs分化为神经元样细胞后的过程中,可一定程度延长细胞的存活时间,具有抗细胞凋亡作用。 展开更多

关键词 八肽胆囊收缩素 骨髓间充质干细胞 神经元 分化

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肠内免疫营养和生态营养对创伤后大鼠免疫功能的影响 被引量：3

7

作者 綦晓龙 陈川宁 +1 位作者 徐亮 余利坚 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2013年第4期235-238,共4页

目的:探讨肠内免疫营养和生态营养对创伤后大鼠肠免疫功能的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组、普通营养组、免疫营养组和生态营养组。通过胃造口术建立动物创伤模型,给予不同成分的肠内营养7 d,观察各组大鼠小肠黏膜形态,检测小肠... 目的:探讨肠内免疫营养和生态营养对创伤后大鼠肠免疫功能的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组、普通营养组、免疫营养组和生态营养组。通过胃造口术建立动物创伤模型,给予不同成分的肠内营养7 d,观察各组大鼠小肠黏膜形态,检测小肠黏膜中IgA、CD3+、CD4+、CD8+细胞的数量。结果:免疫营养组和生态营养组大鼠术后恢复良好。生态营养组大鼠腹泻累计次数低于普通营养组和免疫营养组(P<0.05)。三个营养组大鼠的小肠上皮细胞绒毛高度、肠腺隐窝深度、黏膜厚度、绒毛表面积等检测值均优于对照组(P<0.05);对照组和普通营养组大鼠小肠黏膜IgA、CD3+、CD4+、CD8+细胞数量明显少于免疫营养组和生态营养组(P<0.05)。结论:应用肠内营养,特别是肠内免疫营养和生态营养,能较好地改善大鼠的小肠免疫屏障功能,增强肠道免疫功能,促进创伤后的恢复。 展开更多

关键词 肠内营养 免疫营养 生态营养 创伤

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丙酮-火焰原子吸收光谱法在检测桂圆核微量元素中的应用 被引量：2

8

作者 杜军 刘晓燕 +2 位作者 唐斌 张燕军 杜曦 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第25期11851-11852,共2页

[目的]确定泸州产桂圆核中微量元素含量。[方法]采用硝酸+高氯酸对桂圆核进行消解,丙酮-火焰原子吸收光谱法测桂圆核中Ca、Fe、Zn、Ni、Mn、Cu 6种微量元素含量。[结果]桂圆核中Ca、Fe、Zn、Ni、Mn、Cu 6种微量元素含量分别为4 776.164... [目的]确定泸州产桂圆核中微量元素含量。[方法]采用硝酸+高氯酸对桂圆核进行消解,丙酮-火焰原子吸收光谱法测桂圆核中Ca、Fe、Zn、Ni、Mn、Cu 6种微量元素含量。[结果]桂圆核中Ca、Fe、Zn、Ni、Mn、Cu 6种微量元素含量分别为4 776.164、385.785、164.124、9.590、33.906、28.218μg/g,相对标准偏差为1.6%~3.9%,回收率为95.7%~102.5%;丙酮对测定有一定的增敏作用。[结论]桂圆核中含有大量人体必需的Ca、Fe、Zn微量元素。采用丙酮-火焰原子吸收光谱法测桂圆核中微量元素方法可行。 展开更多

关键词 桂圆核 丙酮 原子吸收光谱 微量元素 含量测定

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ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的生化信号转导初探 被引量：1

9

作者 何浩 刘佳佳 +6 位作者 张姿 李昕 段承刚 谢华福 刘晓燕 何涛 何延政 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期398-401,406,共5页

目的:研究ONO-AE-248诱发中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡过程中,细胞死亡相关的蛋白分子caspase-3、caspase-8、p-38MAPK和PKC的作用,探讨这种细胞死亡的分子机制。方法:运用光镜和DNA电泳对PMN形态学变化和生化特征进行观察和... 目的:研究ONO-AE-248诱发中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡过程中,细胞死亡相关的蛋白分子caspase-3、caspase-8、p-38MAPK和PKC的作用,探讨这种细胞死亡的分子机制。方法:运用光镜和DNA电泳对PMN形态学变化和生化特征进行观察和评估;通过Western blot显示PMN中caspase-3、caspase-8活性改变和p-38MAPK磷酸化改变;运用MTS法检测PKC抑制剂对PMN活性的影响。结果:PMN经ONO-AE-248刺激,绝大多数分叶核融合成单叶核(12小时),DNA琼脂糖电泳结果显示缺乏梯状条带(24小时),而且ONO-AE-248对caspase-3、caspase-8活性和p-38MAPK磷酸化水平无明显影响。然而,PKC抑制剂STS和H-7能显著抑制ONO-AE-248对PMN的促死亡效应。结论:ONO-AE-248所诱导的PMN死亡可能是一种非凋亡性的主动性细胞死亡,即非凋亡性程序化细胞死亡。该死亡过程不依赖caspase-3、caspase-8的活化和p-38MAPK的磷酸化,但是PKC可能发挥正向的调控作用。 展开更多

关键词 ONO-AE-248 中性粒细胞 CASPASE PKC p-38MAPK

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缺氧复氧诱导人肾小管上皮细胞蛋白质组表达变化的初步研究 被引量：1

10

作者 张春燕 刘友平 +2 位作者 杨烨 龚舒 李洪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1000-1002,共3页

目的:采用将人肾小管上皮细胞置于缺氧环境中然后复氧的方法模拟缺血再灌注(ischemia reper-fusion,IR)所致肾损伤的发生和发展过程,研究IR对人肾小管上皮细胞表达蛋白质组的影响。方法:人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)常规培养,随机分为2... 目的:采用将人肾小管上皮细胞置于缺氧环境中然后复氧的方法模拟缺血再灌注(ischemia reper-fusion,IR)所致肾损伤的发生和发展过程,研究IR对人肾小管上皮细胞表达蛋白质组的影响。方法:人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)常规培养,随机分为2组,IR组缺氧培养8h,然后复氧培养24h,对照组常规培养,裂解细胞,提取全细胞蛋白。双向电泳(2-DE)分离,ImageMaster2D Platinum V5.0软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果:通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与HK-2缺氧复氧诱导的差异表达蛋白斑点为109个;经质谱鉴定的7个差异表达的蛋白斑点包括:核糖体蛋白S2、普通转录因子ⅡH亚基1变体、双链断裂修复蛋白rad-21同源物、富含亮氨酸重复序列蛋白-45、DNA依赖性蛋白激酶、丝/苏氨酸蛋白激酶Chk1和程序性细胞死亡蛋白-4。结论:IR组与对照组的表达蛋白质组相比较存在明显差异;7个与HK-2缺氧复氧诱导表达改变的蛋白质的功能涉及细胞增殖、细胞凋亡、细胞信号转导、抗细胞损伤等,提示IR的发生发展与相应的病理生理过程相关。 展开更多

关键词 再灌注损伤 缺氧复氧 肾小管上皮细胞 蛋白质组

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慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织蛋白质组的变化 被引量：1

11

作者 张春燕 杨烨 +2 位作者 李洪 陈燕 赵春玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2470-2472,共3页

目的:比较慢性间歇性缺氧大鼠与正常大鼠肾脏组织蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织中的差异蛋白表达谱。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和慢性间歇性缺氧大鼠的... 目的:比较慢性间歇性缺氧大鼠与正常大鼠肾脏组织蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织中的差异蛋白表达谱。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和慢性间歇性缺氧大鼠的肾脏组织蛋白质样品进行二维分离,2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析,选取4个差异蛋白点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与慢性间歇性缺氧相关的差异表达蛋白斑点为112个;经质谱鉴定的4个差异表达的蛋白斑点,慢性间歇性缺氧组量下调的差异点1个,即线粒体ATP合成酶δ亚基;上调的差异点3个,分别为己糖激酶、儿茶酚-O-甲基转移酶、脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1。结论:大鼠肾脏组织慢性间歇性缺氧损伤相关的差异蛋白表达变化可能通过多种途经影响肾脏功能。 展开更多

关键词 慢性间歇性缺氧 肾 双向凝胶电泳 蛋白质组

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大鼠MSCs体外诱导分化为神经元样细胞过程中发生细胞凋亡的机制研究 被引量：1

12

作者 何涛 王丽 +2 位作者 刘哓燕 冯宁 李娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1931-1935,共5页

目的:探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化过程中凋亡发生的机制。方法:分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,随机分为3组:对照组为单纯β-巯基乙醇诱导分化组;NEK1/2抑制剂1,4-二氨基-2,3-氰基-1,4-双[2-氨基苯基硫代... 目的:探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化过程中凋亡发生的机制。方法:分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,随机分为3组:对照组为单纯β-巯基乙醇诱导分化组;NEK1/2抑制剂1,4-二氨基-2,3-氰基-1,4-双[2-氨基苯基硫代]丁二烯(U0126)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时加入10μmol/LU0126;蛋白激酶PKC激动剂氟波酯(PMA)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时分别加入30nmol/L、120nmol/L与300nmol/LPMA。诱导5h后终止反应,MTT法检测细胞活性,免疫细胞化学检测神经元特异性巢蛋白nestin及凋亡相关蛋白caspase、Bcl-2、Bax的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数。结果:诱导后5h与对照组相比,U0126组神经元样细胞的活性、nestin的表达、Bcl-2蛋白阳性表达率均出现增强或升高(P<0.05),细胞凋亡指数降低(P<0.05);300nmol/LPMA组则显著抑制神经元样细胞的活性和nestin的表达(P<0.05),增强Bax并降低Bcl-2的表达(P<0.05),细胞凋亡指数明显升高(P<0.05)。结论:大鼠MSCs诱导分化为神经元样细胞过程中发生凋亡机制涉及MAPK及PKC信号途径。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 神经元 细胞凋亡 信号转导

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川产道地药材三叶黄连HPLC指纹图谱研究 被引量：2

13

作者 李春红 何兵 +1 位作者 梅志强 田吉 《安徽农业科学》 CAS 2012年第2期716-718,共3页

[目的]建立川产道地药材三叶黄连的指纹图谱检测标准。[方法]以盐酸小檗碱为参照物,采用依利特SinoChrom ODS-BP(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-浓度0.1%乙酸和10 mmol乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为3... [目的]建立川产道地药材三叶黄连的指纹图谱检测标准。[方法]以盐酸小檗碱为参照物,采用依利特SinoChrom ODS-BP(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-浓度0.1%乙酸和10 mmol乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为345nm。[结果]药材有14个共有峰,共有峰的参数符合"中药注射剂指纹图谱技术要求"的有关规定。[结论]该方法准确、重复性好,建立的指纹图谱检测标准,可作为川产道地药材三叶黄连质量评价与品种鉴别的重要依据之一。 展开更多

关键词 三叶黄连(RHIZOMA COPTIDIS) HPLC 指纹图谱

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CCK_B受体诱发的小鼠神经元蛋白质磷酸化的研究 被引量：1

14

作者 何涛 李娟 +3 位作者 王丽 甘淋 宋杰 段承刚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期47-50,共4页

目的:从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度初步勾勒出CCKB型受体介导的胞内信号转导途径。方法:培养的小鼠大脑皮质神经元分为实验组、对照组和受体拮抗剂组,在无磷培养基加入[32P]-NaH2PO4标记细胞中的磷蛋白后,刺激组给予CCK8(10-7mol/L),... 目的:从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度初步勾勒出CCKB型受体介导的胞内信号转导途径。方法:培养的小鼠大脑皮质神经元分为实验组、对照组和受体拮抗剂组,在无磷培养基加入[32P]-NaH2PO4标记细胞中的磷蛋白后,刺激组给予CCK8(10-7mol/L),对照组加入等量的无磷培养基,受体拮抗剂组在分别加入CCKA型、CCKB型受体拮抗剂L364718、L365260以及L364718+L365260,浓度均为10-8mol/L,孵育10min后,再加入10-7mol/LCCK8,37℃作用60min,液氮中终止磷酸化反应。裂解细胞提取蛋白质,双向电泳分离,放射自显影7d后,获得磷酸化蛋白的放射自显影双向电泳图谱。采用PDQuest 2D分析软件对图谱进行差异分析,并在Swiss-Prot蛋白质数据库和自建磷蛋白数据库中查询定性。结果:CCK8作用60min后,小鼠神经元CCK8信号转导相关磷酸化蛋白有:多种蛋白激酶、细胞信号分子、生长因子受体、转录因子等。加入L364718后,神经元中PKCδ、P55G等的磷酸化水平降低,加入L365260后,PKCα、PKGβ、OGFR、EGFR等的磷酸化水平呈现不同程度的降低,表明皮质神经元中CCKB受体介导的信号转导更复杂。结论:CCKA型、GGKB型受体均可介导CCK8在神经元的信号转导,但CCKB型受体可能发挥了更重要的作用,其介导的信号途径可能包括:肌醇磷脂信使系统、cAMP-PKA途径、MAPK途径、JNK途径、PI3K-PKB途径和cGMP-PKG途径。 展开更多

关键词 胆囊收缩素 神经元 信号转导

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细胞衰老过程中JNK、p38和Akt的活性变化 被引量：1

15

作者 邹平 何涛 +3 位作者 陈颢 周艳艳 王羽 毛泽斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期571-574,共4页

研究发现衰老成纤维细胞抗凋亡.为探明其机制,检测与凋亡相关的信号传导通路JNK、p38和Akt在细胞衰老过程中是否发生改变.在本研究中,UV被用作JNK和p38传导通路的诱导剂,胎牛血清用作Akt通路的诱导剂.结果表明:p38和Akt在年轻和衰老细... 研究发现衰老成纤维细胞抗凋亡.为探明其机制,检测与凋亡相关的信号传导通路JNK、p38和Akt在细胞衰老过程中是否发生改变.在本研究中,UV被用作JNK和p38传导通路的诱导剂,胎牛血清用作Akt通路的诱导剂.结果表明:p38和Akt在年轻和衰老细胞中均能被相应的诱导剂活化;相反,UV照射却不能有效激活衰老细胞中JNK的活性.结果提示:衰老细胞对凋亡诱导不敏感可能与JNK不能被有效活化有关. 展开更多

关键词 信号传导 细胞衰老 凋亡

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阿托伐他汀对血管紧张素Ⅱ诱导的人肠系膜动脉平滑肌细胞增殖和细胞内NADPH氧化酶-活性氧通路的影响 被引量：2

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作者 罗廷福 李家富 +2 位作者 何涛 冯健 龚武田 《中国心血管杂志》 2010年第3期233-235,共3页

目的观察阿托伐他汀钙对血管紧张素Ⅱ的促人肠系膜动脉平滑肌细胞增殖和其诱导的平滑肌细胞内NADPH氧化酶-活性氧通路的干预作用。方法用组织贴块法培养的第2～4代人肠系膜动脉平滑肌细胞作为实验标本；以四甲基偶氮唑盐（MTT）法比色... 目的观察阿托伐他汀钙对血管紧张素Ⅱ的促人肠系膜动脉平滑肌细胞增殖和其诱导的平滑肌细胞内NADPH氧化酶-活性氧通路的干预作用。方法用组织贴块法培养的第2～4代人肠系膜动脉平滑肌细胞作为实验标本；以四甲基偶氮唑盐（MTT）法比色测定各组平滑肌细胞增殖率；流式细胞仪检测被双氢乙酰乙酸-二氯荧光黄（DCFH—DA）标记的细胞内活性氧；反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测细胞内p22phox蛋白mRNA的表达变化。结果（1）与空白对照组比较，加入血管紧张素Ⅱ药物组的细胞增殖率、细胞内活性氧物质生成量、细胞内p22phoxmRNA的表达均明显增高（P〈0．01）。（2）与浓度为10^-6moL／L血管紧张素Ⅱ孵育组比较，血管紧张素Ⅱ和阿托伐他汀钙共孵育组的细胞增殖率[阿托伐他汀组（0．242±0．018）比血管紧张素Ⅱ组（0．359±0．024），P〈0．01]、细胞内活性氧[阿托伐他汀组（130±29）比血管紧张素Ⅱ组（180±34），P〈0．01]、细胞内p22phox蛋白mRNA的表达[阿托伐他汀组（0．47±0．07）比血管紧张素Ⅱ组（0．71±0．05），P〈0．01]均降低。结论阿托伐他汀钙可以部分抑制血管紧张素Ⅱ的促人肠系膜动脉平滑肌细胞增殖和其诱导的细胞内NADPH氧化酶-活性氧通路的作用。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ NADPH氧化酶 阿托伐他汀

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八肽胆囊收缩素对小鼠神经元蛋白质磷酸化的影响

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作者 王丽 何涛 +4 位作者 李娟 刘晓燕 段承刚 谢华福 宋杰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第2期300-303,共4页

目的:从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度,对小鼠神经元在八肽胆囊收缩素(CCK8)刺激下的信号转导通路进行初步研究。方法:将培养的小鼠神经元分为对照组(加入无磷培养基)、实验组(加入CCK8)、拮抗剂组(分别加入CCKA受体拮抗剂L-364718和(或)C... 目的:从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度,对小鼠神经元在八肽胆囊收缩素(CCK8)刺激下的信号转导通路进行初步研究。方法:将培养的小鼠神经元分为对照组(加入无磷培养基)、实验组(加入CCK8)、拮抗剂组(分别加入CCKA受体拮抗剂L-364718和(或)CCKB受体拮抗剂L-365260)。采用双向电泳法观察CCK8和受体拮抗剂作用下蛋白质磷酸化水平的改变。结果:CCK8作用不同时间后,神经元蛋白质磷酸化状态发生明显改变,涉及的信号转导相关磷酸化蛋白质包括多种蛋白激酶、胞内信号分子、激素受体、转录因子等;动力学分析结果显示,主要的信号转导相关蛋白的磷酸化时间动力学曲线多数呈峰型;应用CCK受体拮抗剂作用后的结果表明,在皮质神经元中同时存在CCK的2种类型受体,其中B型受体介导的信号转导途径更复杂。结论:CCKA型、B型受体均可介导CCK8在神经元的信号转导,其中B型受体介导的信号途径可能包括肌醇磷脂信使系统、cAMP-PKA途径、MAPK途径和JNK途径等。 展开更多

关键词 胆囊收缩素 神经元 信号转导 时间动力学曲线 受体 拮抗剂 小鼠

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乙型肝炎核心抗原基因的合成及其原核表达载体的构建

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作者 王丽 刘金波 +2 位作者 段春燕 龚舒 何涛 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期1242-1245,共4页

目的:合成乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因并构建原核表达载体。方法:根据大肠杆菌偏嗜性密码子,利用SyntheticGeneDesigner软件对HBcAg基因进行密码子优化,分成24条相互重叠的寡核苷酸片段,采用PCR法扩增获得完整的HBcAg基因,经BamHⅠ... 目的:合成乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因并构建原核表达载体。方法:根据大肠杆菌偏嗜性密码子,利用SyntheticGeneDesigner软件对HBcAg基因进行密码子优化,分成24条相互重叠的寡核苷酸片段,采用PCR法扩增获得完整的HBcAg基因,经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到pET30a(+),得pET30a(+)-HB-cAg,经PCR扩增、酶切及测序鉴定后,定点突变法改正错误位点。之后将重组子转入BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况,WesternBlot检测蛋白抗原性。结果:成功构建了重组质粒pET30a(+)-HBcAg,SDS-PAGE分析显示目的蛋白主要以包涵体的形式在大肠杆菌表达,表达效率64%左右;WesternBlot显示表达产物具有较好的抗原性。结论:成功合成HBcAg基因并构建了原核表达载体。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒核心抗原 基因合成 定点突变 原核表达

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家兔缺血再灌注肾组织胰岛素受体的分析

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作者 何涛 谢华福 +2 位作者 段承刚 李蓉晖 冯志强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期866-869,共4页

目的 :观察家兔急性缺血再灌注 (IR)后不同时相 ,肾组织胰岛素受体及血清胰岛素水平的变化。方法 :采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。实验动物分为对照组、缺血再灌注 (IR)组 ,测定两组动物的肾组织胰岛素受体、血糖... 目的 :观察家兔急性缺血再灌注 (IR)后不同时相 ,肾组织胰岛素受体及血清胰岛素水平的变化。方法 :采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。实验动物分为对照组、缺血再灌注 (IR)组 ,测定两组动物的肾组织胰岛素受体、血糖和血清胰岛素水平。结果 :IR 2h时 ,对照组、IR组血清胰岛素水平均较术前显著升高 (P <0 0 5 ) ,但IR组胰岛素升高更为显著 (P <0 0 5vscontrol) ,4 8h时对照组胰岛素水平接近正常水平 ,IR组也明显低于 2h时 (P <0 0 5 ) ,但仍高于对照组 (P <0 0 5 )。IR 2h时 ,两组动物血糖均较术前增高 ,但以IR组增高更为显著 (P <0 0 5vscontrol)。放射性配基结合分析法中 ,Scatchard作图得到一下凹曲线。IR 2h ,IR组胰岛素高、低亲和力受体最大受体结合容量Bmax1和Bmax2 ,高、低亲和力常数Kd1和Kd2 均显著低于对照组 (P <0 0 5 )。 4 8h时 ,二组动物Kd1、Bmax1和Bmax2 无明显差异 ,但IR组Kd2 高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :实验结果显示 ,在肾IR过程中 ,内源性胰岛素的作用减弱 ,胰岛素受体数目的减少或与配体亲和力减弱。 展开更多

关键词 受体 胰岛素 再灌注 兔 肾

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ASC在ONO-AE-248诱发的中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中的作用

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作者 羊建 刘佳佳 +1 位作者 郑小莉 薛晓婕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期471-473,477,共4页

目的:探讨接受ONO-AE-248刺激后重要的差异表达蛋白——凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)的表达及意义。方法:Ficoll法新鲜分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞(Polymorpho-nuclear ne... 目的:探讨接受ONO-AE-248刺激后重要的差异表达蛋白——凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)的表达及意义。方法:Ficoll法新鲜分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞(Polymorpho-nuclear neu-trophils,PMN),与ONO-AE-248共同培养,2小时提取总RNA,并行反转录-PCR检测ASC mRNA的表达;12小时提取总蛋白,双向电泳分离后,采用PDQest2-DE软件分析找出差异表达的蛋白质斑点,并用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:ONO-AE-248刺激2小时中性粒细胞ASC mRNA的表达明显下调(P<0.01);12小时通过双向电泳和蛋白质质谱分析发现ASC为重要的差异表达蛋白且ONO-AE-248刺激后的表达量明显低于自发性凋亡组。结论:ONO-AE-248引起的ASC表达的下调可能是中性粒细胞凋亡和ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的关键性差异点。ONO-AE-248显著下调ASC的表达,可能是ONO-AE-248诱使中性粒细胞发生非凋亡性程序化死亡的根本原因之一。 展开更多

关键词 中性粒细胞 ONO—AE-248 非凋亡性程序化细胞死亡 凋亡 凋亡相关斑点样蛋白

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