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川产道地药材三叶黄连HPLC指纹图谱研究 被引量:2
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作者 李春红 何兵 +1 位作者 梅志强 田吉 《安徽农业科学》 CAS 2012年第2期716-718,共3页
[目的]建立川产道地药材三叶黄连的指纹图谱检测标准。[方法]以盐酸小檗碱为参照物,采用依利特SinoChrom ODS-BP(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-浓度0.1%乙酸和10 mmol乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为3... [目的]建立川产道地药材三叶黄连的指纹图谱检测标准。[方法]以盐酸小檗碱为参照物,采用依利特SinoChrom ODS-BP(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-浓度0.1%乙酸和10 mmol乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为345nm。[结果]药材有14个共有峰,共有峰的参数符合"中药注射剂指纹图谱技术要求"的有关规定。[结论]该方法准确、重复性好,建立的指纹图谱检测标准,可作为川产道地药材三叶黄连质量评价与品种鉴别的重要依据之一。 展开更多
关键词 三叶黄连(RHIZOMA COPTIDIS) HPLC 指纹图谱
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猪干扰素-γ基因在大肠杆菌中的克隆表达及其活性测定 被引量:3
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作者 王丽 刘金波 +3 位作者 何涛 郑小莉 梅志强 李洪 《中国医学工程》 2007年第8期628-632,共5页
目的在大肠杆菌中高效表达重组猪干扰素γ(porcineinterferongamma,poIFN-γ),并对其抗病毒活性进行初步研究。方法选择大肠杆菌偏爱密码子人工合成了猪干扰素-γ成熟蛋白编码基因,克隆至原核表达载体pQE30中,IPTG诱导表达,表达产物经... 目的在大肠杆菌中高效表达重组猪干扰素γ(porcineinterferongamma,poIFN-γ),并对其抗病毒活性进行初步研究。方法选择大肠杆菌偏爱密码子人工合成了猪干扰素-γ成熟蛋白编码基因,克隆至原核表达载体pQE30中,IPTG诱导表达,表达产物经变性、复性、纯化后,测定其抗病毒活性。结果目的蛋白以包涵体的形式在大肠杆菌中获得高表达,表达量占总菌体蛋白的84.5%,纯化后的纯度达到95%以上,在PK15细胞上抗滤泡性口炎病毒比活性为6.2×105U/mg。结论PoIFN-γ基因在大肠杆菌中得到了高效表达,表达产物具有抗病毒活性。 展开更多
关键词 猪IFN-γ 基因 原核表达 抗病毒活性
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骨桥蛋白基因真核表达载体构建及对结肠癌细胞的作用 被引量:1
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作者 王丽 刘晓燕 +1 位作者 李娟 杨志惠 《四川生理科学杂志》 2012年第1期1-3,共3页
目的:构建骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因真核表达载体,转染人结肠癌细胞SW480,分析其对SW480细胞株增殖及生存能力的作用。方法:构建重组表达载体pEGFP-N1/OPN,经测序鉴定无误后,转染人结肠癌SW480细胞。RT-PCR检测SW480细胞转染后OPN ... 目的:构建骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因真核表达载体,转染人结肠癌细胞SW480,分析其对SW480细胞株增殖及生存能力的作用。方法:构建重组表达载体pEGFP-N1/OPN,经测序鉴定无误后,转染人结肠癌SW480细胞。RT-PCR检测SW480细胞转染后OPN mRNA表达;Western blot检测SW480细胞转染后OPN蛋白表达量;Cell Counting Kit-8(CCK-8)测定细胞增殖;软琼脂克隆形成实验观察细胞的锚定非依赖性生长能力。结果:pEGFP-N1/OPN转染SW480后,OPN基因获得很好转录,OPN蛋白表达增高,转染OPN后SW480细胞增殖率(光吸收值)显著高于转染阴性组(P<0.05),软琼脂克隆形成速度增快,数量明显多于对照组和空载体组(P<0.05)。结论:OPN基因真核表达载体pEGFP-N1/OPN构建成功,OPN具有促进SW480细胞增殖、存活的作用,为进一步研究OPN作用机制奠定了重要基础。 展开更多
关键词 骨桥蛋白 结肠癌 增殖 存活
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