GST pulldown技术检测HEK293T细胞Daam1的活性 被引量：1

1

作者 李卫星 杜军 朱一超 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1412-1416,共5页

目的:运用GST pulldown技术建立真核细胞中Daam1活性检测的可靠方法。方法:构建GST-RhoA的原核表达载体,并使其在大肠杆菌BL21菌株中大量表达。用GST pulldown和Western blot技术分别检测HEK293T细胞中活化的Daam1及Daam1蛋白的表达。结... 目的:运用GST pulldown技术建立真核细胞中Daam1活性检测的可靠方法。方法:构建GST-RhoA的原核表达载体,并使其在大肠杆菌BL21菌株中大量表达。用GST pulldown和Western blot技术分别检测HEK293T细胞中活化的Daam1及Daam1蛋白的表达。结果:在成功构建了GST-RhoA的原核表达载体,并使其在原核细胞中大量表达融合蛋白GST-RhoA后,用GST pulldown和Western blot技术证实HEK293T细胞中有活化的Daam1和Daam1总蛋白的表达。结论:本工作所建立的GST pulldown技术可以检测HEK293T细胞中Daam1的活性,从而为进一步深入研究Daam1在真核细胞中的功能提供了技术保障。 展开更多

关键词 GST pulldown HEK293T Daam1 真核细胞

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医学高职女生经前期综合征的心理干预与健康指导 被引量：5

2

作者 王卉 丁美红 +5 位作者 潘爱萍 张鹏 张玉玲 辛芳芳 陈涓 张凤 《护理研究（上旬版）》 2014年第6期2028-2030,共3页

[目的]探讨心理干预和生殖健康指导对泰州市医学高职女生经前期综合征的影响。[方法]对332例经前期综合征高职女生,在心理干预和生殖健康指导前后采用症状严重程度每日记录量表(DRSP)、症状自评量表(SCL-90)和中文版简明健康调查量表(SF... [目的]探讨心理干预和生殖健康指导对泰州市医学高职女生经前期综合征的影响。[方法]对332例经前期综合征高职女生,在心理干预和生殖健康指导前后采用症状严重程度每日记录量表(DRSP)、症状自评量表(SCL-90)和中文版简明健康调查量表(SF-36)进行问卷调查,并分析比较。[结果]干预后经前期综合征女生紧张、焦虑、忧郁、情绪波动、烦躁、注意力难以集中、人际关系、社交活动和工作学习效率降低较干预前降低明显(P<0.05或P<0.01),嗜睡、食欲改变、睡眠改变和躯体症状等没有明显变化(P>0.05);经前期1周强迫、人际关系、抑郁、焦虑、偏执、精神病性等因子差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),躯体化、敌对、恐怖等因子没有变化(P>0.05);经后4d^7d只有人际关系、偏执和精神病性差异有统计学意义(P<0.05);总体健康、生理职能、情感职能、社会功能、活力和精神健康等明显提高(P<0.05或P<0.01);生理功能和躯体疼痛没有变化(P>0.05)。[结论]经前期综合征可以采用心理干预和生殖健康指导,降低发生率,减轻症状,促进身心健康发展,提高生活质量。 展开更多

关键词 经前期综合征 症状严重程度每日记录量表 症状自评量表 简明健康调查量表 心理干预 生殖健康指导

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身体哲学对未来医学发展的启示 被引量：1

3

作者 李俊 《医学与哲学》 2020年第18期23-27,共5页

所有医学都是以人的身体为认知对象。近代意识哲学的兴起和科学技术的蓬勃发展,形成以理性为主导的科学认知模式,这种模式影响了医学在认识和研究人本身的立场和方式,主要表现为将身体视为一种生物性的事实存在,运用现代科学技术对其进... 所有医学都是以人的身体为认知对象。近代意识哲学的兴起和科学技术的蓬勃发展,形成以理性为主导的科学认知模式,这种模式影响了医学在认识和研究人本身的立场和方式,主要表现为将身体视为一种生物性的事实存在,运用现代科学技术对其进行不断还原。然而现代科学很难跨越活着的身体与作为试验研究对象的生物体之间的鸿沟,而且,医学在其漫长历史中积累的各种理论和经验,并不能以一种独断的方式予以否弃。当下,现代医学面临的理论困境、技术争议、伦理冲突等诸多现实问题,不仅需要用发展的态度来看待这些问题,更需要通过反思的目光重新省视人的身体,从中获取发展力量。 展开更多

关键词 身体哲学 生活世界 整全性 民族医学 责任伦理

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人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA的检测在宫颈癌筛查中的初步评价 被引量：10

4

作者 姜俊 陈宜刚 +2 位作者 王华 叶军 冯蕾 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1261-1264,共4页

目的:评价支链DNA技术(bDNA)对HPV-E6/E7 mRNA的检测及其临床价值。方法:对167例宫颈癌筛查妇女宫颈脱落细胞用液基细胞薄层涂片技术行宫颈细胞学检查,同时采用bDNA技术检测HPV-E6/E7 mRNA。另从中随机选择43例患者[11例非典型磷状上皮... 目的:评价支链DNA技术(bDNA)对HPV-E6/E7 mRNA的检测及其临床价值。方法:对167例宫颈癌筛查妇女宫颈脱落细胞用液基细胞薄层涂片技术行宫颈细胞学检查,同时采用bDNA技术检测HPV-E6/E7 mRNA。另从中随机选择43例患者[11例非典型磷状上皮细胞(ASCUS)、17例低度磷状上皮内病变(LSIL)、15例高度磷状上皮内病变(HSIL)]检测HPV-E6/E7DNA。结果:①HPV-E6/E7 mRNA与HPV-E6/E7 DNA相关性分析显示:HPV-E6/E7 mRNA与HPV-E6/E7 DNA检测结果呈现显著正相关(r=0.465,P=0.002);②总体人群HPV-E6/E7 mRNA检出阳性率为43.1%,随着病理级别的升高,HPV-E6/E7mRNA阳性率(χ2=41.396,P<0.001)和copies量(H=39.350,P<0.001)均呈现趋势性升高;③HPV-E6/E7 mRNA对LSIL+诊断的灵敏度为67.1%(95%CI:56.1%-78.1%)、特异性为74.2%(95%CI:65.5%-82.9%)、准确性为71.3%(95%CI:64.4%-78.1%)、阳性预测值为65.3%(95%CI:54.3%-76.3%)、阴性预测值为75.8%(95%CI:67.2%-84.4%)。结论:HPV-E6/E7 mRNA与宫颈细胞学类型相关,其对LSIL+的诊断具有较高的效率,可能更为适用于宫颈癌的发病风险评估。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 非典型鳞状上皮细胞 低度鳞状上皮内病变 高度鳞状上皮内病变 E6 E7信使RNA E6 E7 DNA bDNA技术

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脑卒中患者下肢量化运动控制训练的临床观察 被引量：18

5

作者 吕尤焱 王永春 张黎明 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期603-605,共3页

脑卒中是中老年人的常见病和多发病,而且有年轻化的趋势,随着现代医疗技术的进步,脑卒中患者的死亡率显著降低,但有1/2的生存患者存在不同程度的躯体功能障碍[1],尤其下肢功能障碍严重影响患者的站立能力及正常步行功能,其中平衡及步行... 脑卒中是中老年人的常见病和多发病,而且有年轻化的趋势,随着现代医疗技术的进步,脑卒中患者的死亡率显著降低,但有1/2的生存患者存在不同程度的躯体功能障碍[1],尤其下肢功能障碍严重影响患者的站立能力及正常步行功能,其中平衡及步行能力障碍是最常见的症状。减重训练虽然效果确切[2],但费时、费力且因治疗师的能力而有所不同,无法定量评价。 展开更多

关键词 脑卒中偏瘫 运动控制 下肢功能障碍 步行能力 躯体功能障碍 治疗师 现代医疗技术 康复训练方法 临床观察 患侧下肢

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TK1、Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义 被引量：8

6

作者 冯蕾 饶秋 +4 位作者 刘标 樊祥山 石永利 孟凡青 冯振卿 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期983-988,共6页

目的:探讨细胞质胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)和Ki-67在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达水平及其对NSCLC患者预后的意义。方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学EnVisio... 目的:探讨细胞质胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)和Ki-67在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达水平及其对NSCLC患者预后的意义。方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学EnVision法检测TK1和Ki-67的表达,探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系。结果:NSCLC组织中TK1(60.89%)和Ki-67(55.45%)的阳性表达率均显著高于癌旁肺组织(P<0.01);Spearman等级相关分析显示二者的表达呈正相关(r=0.518,P<0.001);NSCLC中,TK1和Ki-67的表达均与肿瘤分化程度和TNM分期显著相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示随TK1表达的增强和Ki-67指数的增高,NSCLC患者的总体生存期逐渐降低(P<0.01);Cox回归分析提示肿瘤TK1表达和TNM分期是影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:TK1在NSCLC的表达与肿瘤的分化、进展有关,TK1表达有助于对患者预后的评价。 展开更多

关键词 细胞质胸苷激酶1 KI-67 非小细胞肺癌 组织芯片 预后

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FOXC1在非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义 被引量：3

7

作者 冯蕾 慕博华 +4 位作者 饶秋 张鹏 姜俊 赵燕 孟凡青 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1693-1697,共5页

目的:探讨FOXC1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平及其预后意义。方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学SP法检测FOXC1的表达,探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系。结果:NSCLC组织中高表达FOXC... 目的:探讨FOXC1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平及其预后意义。方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学SP法检测FOXC1的表达,探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系。结果:NSCLC组织中高表达FOXC1(60.87%)的细胞比率显著高于癌旁肺组织(25.40%)(P<0.001);NSCLC中,FOXC1的表达与TNM分期及淋巴结转移显著相关(P<0.01);Kaplan-Meier生存分析显示FOXC1高表达的NSCLC患者生存期明显低于低表达的患者(P<0.001)。结论:FOXC1在NSCLC中的表达与肿瘤的发生、进展有关,检测FOXC1的表达有助于对患者预后的评价。 展开更多

关键词 FOXC1 非小细胞肺癌 免疫组化 组织芯片 预后

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TIR/BB环拟似物AS-1对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用研究 被引量：3

8

作者 刁爱芹 张光际 +3 位作者 王卉 潘爱萍 袁海建 李建涛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1080-1086,共7页

目的:研究TIR/BB环拟似物AS-1对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分成4组:假手术组(sham)、肾缺血再灌注组(RIR)、AS-1+肾缺血再灌注组(AS-1+RIR)、溶剂+肾缺血再灌注组(溶剂+RIR)。采用夹闭双侧肾动... 目的:研究TIR/BB环拟似物AS-1对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分成4组:假手术组(sham)、肾缺血再灌注组(RIR)、AS-1+肾缺血再灌注组(AS-1+RIR)、溶剂+肾缺血再灌注组(溶剂+RIR)。采用夹闭双侧肾动、静脉45 min,再灌注24 h的方法构建肾缺血再灌注损伤模型。AS-1+RIR组与溶剂+RIR组在术前30 min按剂量50 mg/kg分别腹腔注射AS-1和溶剂,再灌注24 h后检测肾功能参数、血清炎症因子、凋亡指标及磷酸化NF-κB p65(pp65)表达水平。结果:与假手术组比较,缺血再灌注组血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、TNF-α、IL-6、p-p65、Cleaved caspase3及Bax的表达水平均明显提高(P<0.01),肾间质CD68+和MPO炎症细胞浸润增多,Bcl-2的表达量明显降低(P<0.01),Bcl-2/Bax的比值也降低。给予AS-1处理后可以使Scr、BUN、TNF-α、IL-6、p-p65、Cleaved caspase3、及Bax的水平明显降低(P<0.01),CD68+和MPO炎症细胞浸润减少;Bcl-2的表达量升高(P<0.01),Bcl-2/Bax的比值也升高。结论:TIR/BB环拟似物AS-1对小鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与其抑制NF-κB信号通路的活化,产生抗炎作用和抗凋亡作用有关。 展开更多

关键词 TIR/BB环拟似物AS-1 肾脏 缺血再灌注损伤

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17β-雌二醇对机械牵拉诱导心肌细胞integrin β1/FAK/p38 MAPK信号转导的影响 被引量：1

9

作者 刁爱芹 潘爱萍 +4 位作者 王卉 周瑞芳 李晓洁 张鹏 李建涛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1357-1360,1408,共5页

目的:研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对体外机械牵拉诱导心肌细胞integrinβ1/FAK/p38 MAPK信号转导的影响。方法:以机械牵拉刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型,采用免疫共沉淀方法检测integrinβ1和FAK的结合... 目的:研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对体外机械牵拉诱导心肌细胞integrinβ1/FAK/p38 MAPK信号转导的影响。方法:以机械牵拉刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型,采用免疫共沉淀方法检测integrinβ1和FAK的结合情况,Western blot方法检测FAK和p38 MAPK磷酸化水平的变化。结果:机械牵拉心肌细胞24 h后,integrinβ1和FAK的结合显著增加,FAK和p38 MAPK磷酸化水平亦明显增强。100 nmol/L E2预处理30 min可明显减轻机械牵拉诱导的心肌细胞integrinβ1和FAK的结合增加,抑制FAK和p38 MAPK磷酸化的水平增强,该效应可被雌激素受体非特异性拮抗剂ICI182780逆转。结论:100 nmol/L的E2能够抑制机械牵拉诱导心肌细胞肥大发生发展过程中integrinβ1对其下游FAK招募结合增加,降低FAK及p38MAPK的磷酸化活性,提示E2与雌激素受体结合后通过抑制integrinβ1/FAK/p38 MAPK信号转导途径的激活,从而发挥心血管保护作用。 展开更多

关键词 雌激素 机械牵拉 心肌细胞 INTEGRIN β1/FAK/p38 MAPK

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人体常用体表骨性标志在康复治疗中的应用研究 被引量：2

10

作者 张黎明 金建明 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1352-1355,共4页

表面解剖学（surface anatomy）是研究人体深层结构与表面关系的科学，它借助于人体的表面形态特征，如骨性标志、肌性标志、皮纹标志和一些标志线来确定深部脏器和结构的体表定位、大小、范围和走向，为体格检查和技术操作、手术定位... 表面解剖学（surface anatomy）是研究人体深层结构与表面关系的科学，它借助于人体的表面形态特征，如骨性标志、肌性标志、皮纹标志和一些标志线来确定深部脏器和结构的体表定位、大小、范围和走向，为体格检查和技术操作、手术定位等提供比较强的应用性解剖知识，是解剖学知识走向实际应用的桥梁和纽带。 展开更多

关键词 骨性标志 体表定位 应用 康复治疗 表面解剖学 表面形态特征 深层结构 深部脏器

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支架式教学对实习护生临床沟通能力的影响 被引量：9

11

作者 张鑫 周涛 《护理学杂志》 CSCD 2013年第21期72-74,共3页

目的探讨支架式教学对专科实习护生临床沟通能力的影响。方法将90名护生随机分成两组各45名。对照组采用常规带教方法实习,观察组在常规带教方法上开展支架式教学。分别在实习1周和6个月时评价护生的临床沟通能力。结果观察组在敏锐倾... 目的探讨支架式教学对专科实习护生临床沟通能力的影响。方法将90名护生随机分成两组各45名。对照组采用常规带教方法实习,观察组在常规带教方法上开展支架式教学。分别在实习1周和6个月时评价护生的临床沟通能力。结果观察组在敏锐倾听、确认患者问题、验证感受、共同参与和建立和谐关系方面评分显著高于对照组(均P<0.01);但两组护生在传递有效信息方面无统计学差异(P>0.05)。结论支架式教学能较好地提高实习护生的临床沟通能力。 展开更多

关键词 护生 临床实习 支架式教学 临床沟通能力

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中年2型糖尿病病人肌少症患病情况及其对再入院的影响 被引量：7

12

作者 王燕 孟秀凤 +1 位作者 常清 华艳 《护理研究》 北大核心 2020年第3期532-535,共4页

[目的]探讨中年糖尿病病人肌少症的患病情况及其对再入院的影响。[方法]选择2015年6月-2017年5月符合条件的195例2型糖尿病病人为研究组,以同期体检的90例健康人为对照组。记录研究组和对照组的一般临床资料,并采用双能X线骨密度仪进行... [目的]探讨中年糖尿病病人肌少症的患病情况及其对再入院的影响。[方法]选择2015年6月-2017年5月符合条件的195例2型糖尿病病人为研究组,以同期体检的90例健康人为对照组。记录研究组和对照组的一般临床资料,并采用双能X线骨密度仪进行肌量测量,判断是否存在肌少症。随访1年后记录两组病人再入院情况。[结果]研究组相对骨骼肌质量指数显著低于对照组,肌少症患病率显著高于对照组。研究组中肌少症组再入院率为33.3%,无肌少症组再入院率为17.6%。Logistic多元回归分析显示,并发症、糖化血红蛋白和肌少症为影响再入院的独立危险因素。[结论]中年2型糖尿病病人容易发生肌少症,并且肌少症能够增加病人的再入院率,积极进行生活方式干预肌少症对于减少住院次数可能具有一定的意义。 展开更多

关键词 2型糖尿病 中年 肌少症 再入院 糖化血红蛋白

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褪黑素抑制缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化 被引量：1

13

作者 陈宜刚 许蕊 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1508-1513,共6页

目的:研究褪黑素对缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用,并初步揭示其分子机制。方法:在建立缺氧诱导SGC-7901人胃癌细胞发生EMT的基础上,通过免疫印迹方法检测蛋白表达水平、免疫荧光的方法检测蛋白在细胞中的分... 目的:研究褪黑素对缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用,并初步揭示其分子机制。方法:在建立缺氧诱导SGC-7901人胃癌细胞发生EMT的基础上,通过免疫印迹方法检测蛋白表达水平、免疫荧光的方法检测蛋白在细胞中的分布和表达,研究褪黑素对EMT过程的作用。结果:缺氧使SGC-7901人胃癌细胞发生EMT,表现为形态发生改变,上皮标志物表达量减少、间充质标志物表达增加,褪黑素可抑制缺氧条件下活性氧簇(ROS)的产生和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及EMT。结论:在缺氧条件下SGC-7901人胃癌细胞可发生EMT,褪黑素可抑制该过程。这些结果揭示了褪黑素在缺氧引起的肿瘤细胞EMT过程中发挥的抑制作用,为褪黑素的临床应用提供了重要的理论依据。 展开更多

关键词 缺氧 SGC-7901人胃癌细胞 上皮-间充质转化 褪黑素

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PGE_2通过Gαs-cAMP-PKA通路上调子宫内膜癌细胞VEGF的表达 被引量：1

14

作者 许燕 卢顺麟 冷静 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期553-556,共4页

目的 :探讨PGE2(prostaglandinE2,PGE2)对子宫内膜癌Ishikawa细胞血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号转导通路。方法:用PGE2、4种EP受体激动剂(17-phenyltrinor prostaglandin E2、butaprost、sulprostone和prosta... 目的 :探讨PGE2(prostaglandinE2,PGE2)对子宫内膜癌Ishikawa细胞血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号转导通路。方法:用PGE2、4种EP受体激动剂(17-phenyltrinor prostaglandin E2、butaprost、sulprostone和prostaglandin E1 alcohol)、EP2受体拮抗剂AH6809、PKA抑制剂H89、腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536处理Ishikawa细胞,通过Western blot实验检测VEGF蛋白表达水平的变化。结果:PGE2明显提高Ishikawa细胞VEGF蛋白的表达水平,10μmol/L PGE2处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平与对照组相比升高31.56%(P<0.05);10μmol/L EP1-4受体激动剂处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中EP2受体激动剂处理组上升了87.80%(P<0.05);10μmol/L EP2受体拮抗剂AH6809处理Ishikawa细胞后,Ishikawa蛋白的表达水平较PGE2处理组下调了45.66%(P<0.05)。25μmol/L AC抑制剂SQ22536、10μmol/L PKA抑制剂H89处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平较EP2受体激动剂处理组分别下降了29.00%(P<0.05)和57.50%(P<0.05)。结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA信号转导通路上调Ishikawa细胞VEGF蛋白的表达。 展开更多

关键词 PGE2 EP2受体 VEGF 子宫内膜癌

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超氧阴离子和细胞外信号调节激酶在金雀异黄素抑制人乳腺癌细胞浸润中作用的研究 被引量：1

15

作者 金建明 杜军 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1351-1355,共5页

目的:研究金雀异黄素对乳腺癌细胞(MDA-MB-231)浸润能力的影响及其可能机制。方法:不同浓度的金雀异黄素(25～100μmol/L)孵育MDA-MB-231细胞24 h,用Transwell assay检测细胞浸润能力;用免疫印迹法比较细胞内磷酸化和总细胞外信号调节激... 目的:研究金雀异黄素对乳腺癌细胞(MDA-MB-231)浸润能力的影响及其可能机制。方法:不同浓度的金雀异黄素(25～100μmol/L)孵育MDA-MB-231细胞24 h,用Transwell assay检测细胞浸润能力;用免疫印迹法比较细胞内磷酸化和总细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白含量的改变;用免疫荧光实验检测细胞内磷酸化ERK的分布;用DHE染色及荧光显微镜检测细胞内超氧阴离子水平。结果:金雀异黄素处理使细胞浸润能力降低;同时,金雀异黄素的处理引起细胞内磷酸化ERK量明显降低,且磷酸化ERK在核内含量明显下降;ERK抑制剂U0126作用于细胞亦能明显降低细胞的浸润能力;金雀异黄素处理还能使细胞内超氧阴离子含量明显下降,超氧阴离子清除剂TEMPOL不仅明显抑制磷酸化ERK含量,同时细胞浸润能力也明显降低。结论:金雀异黄素可能通过抑制乳腺癌细胞的超氧阴离子水平和ERK活性,进而抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的浸润能力。 展开更多

关键词 金雀异黄素 乳腺癌细胞(MDA-MB-231) 细胞外信号调节激酶 超氧阴离子 浸润

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稳定表达GFP-C-Daam1的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系的建立

16

作者 李卫星 杜军 +3 位作者 胡圳圳 田寅辉 刘皎婧 朱一超 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期925-929,共5页

目的:构建稳定表达GFP和GFP-C-Daam1的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系,以便进一步研究Daam1对乳腺癌细胞迁移能力的影响。方法:构建表达GFP和GFP-C-Daam1的慢病毒载体,通过慢病毒感染获取稳定表达目的基因的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系。用嘌... 目的:构建稳定表达GFP和GFP-C-Daam1的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系,以便进一步研究Daam1对乳腺癌细胞迁移能力的影响。方法:构建表达GFP和GFP-C-Daam1的慢病毒载体,通过慢病毒感染获取稳定表达目的基因的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系。用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞系,Western blot确定重组蛋白表达,并用Boyden chamber小室实验检测细胞运动能力的改变。结果:通过慢病毒感染,建立了稳定表达GFP-C-Daam1的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系,该细胞系具备更强的内在运动能力,表明目的基因的表达产物功能正常。结论:用慢病毒载体可以构建稳定表达GFP-C-Daam1的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系,从而得到研究活化的Daam1的可靠细胞膜型。 展开更多

关键词 C-Daam1 MDA-MB-231细胞 基因转染 稳定表达 细胞迁移

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EP2受体介导的前列腺素E_2影响胆管细胞癌细胞HuCCT1细胞间黏附因子-1表达和侵袭的研究

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作者 许燕 白小明 +4 位作者 张丽 马娟 张海 汪亦品 冷静 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期592-597,共6页

目的 :探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过EP2受体影响人胆管细胞癌细胞HuCCT1细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达及癌细胞的侵袭能力。方法:用PGE2、EP1～4四种受体激动剂(17-phenyltrinorPros... 目的 :探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过EP2受体影响人胆管细胞癌细胞HuCCT1细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达及癌细胞的侵袭能力。方法:用PGE2、EP1～4四种受体激动剂(17-phenyltrinorProstaglandin E2、Butaprost、Sulprostone和Prostaglandin E1 Alcohol)、EP2受体抑制剂AH6809、腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89处理HuCCT1细胞,通过Western blot、划痕试验等方法检测ICAM-1的蛋白表达水平以及HuCCT1细胞侵袭能力的变化。结果:PGE2明显提高HuCCT1细胞ICAM-1蛋白的表达水平,5μmol/L PGE2处理HuCCT1细胞24 h后,ICAM-1蛋白表达水平与对照组相比上升了66.17%(P<0.05),并呈浓度依赖性和时间依赖性;5μmol/L PGE2处理HuCCT1细胞24 h后,HuCCT1细胞的侵袭能力较对照组增强了43.29%(P<0.01)。10μmol/L EP1～4受体激动剂处理HuCCT1细胞24 h后,ICAM-1蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中EP2受体激动剂上升了257.88%(P<0.05),10μmol/L EP2受体激动剂处理HuCCT1细胞24 h后,HuCCT1细胞的侵袭能力较对照组增强了56.99%(P<0.01);10μmol/LEP2受体抑制剂AH6809处理后ICAM-1蛋白的表达水平与PGE2组相比下降了49.14%(P<0.05),细胞侵袭能力下降了52.06%(P<0.01)。25μmol/L AC抑制剂SQ22536、10μmol/L PKA抑制剂H89处理HuCCT1细胞后,ICAM-1蛋白的表达水平较EP2受体激动剂处理组分别下降了72.87%(P<0.05)和80.78%(P<0.05)。结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA信号转导通路上调HuCCT1细胞ICAM-1的表达,从而促进HuCCT1细胞的侵袭转移。 展开更多

关键词 胆管细胞癌 前列腺素E2 EP2受体 CAMP-PKA 细胞间黏附因子-1

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褪黑素对人胃癌细胞SGC-7901黏附和迁移的影响

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作者 陈宜刚 许蕊 +2 位作者 杨玲 崔洁 杜军 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1644-1648,共5页

目的 :研究褪黑素对人胃癌细胞SGC-7901黏附和迁移能力的影响及探索可能的分子机制。方法 :用不同浓度的褪黑素孵育人胃癌细胞SGC-7901 24 h,通过免疫印迹方法检测F-actin和G-actin蛋白表达水平,通过免疫荧光法检测细胞骨架结构的改变,... 目的 :研究褪黑素对人胃癌细胞SGC-7901黏附和迁移能力的影响及探索可能的分子机制。方法 :用不同浓度的褪黑素孵育人胃癌细胞SGC-7901 24 h,通过免疫印迹方法检测F-actin和G-actin蛋白表达水平,通过免疫荧光法检测细胞骨架结构的改变,通过细胞黏附实验观察胃癌细胞对血管内皮细胞黏附能力的变化,通过划痕实验检测褪黑素对细胞迁移能力的影响。结果:褪黑素使人胃癌细胞SGC-7901 F-actin量明显降低,同时细胞骨架结构发生重组,应力纤维出现断裂;褪黑素可抑制胃癌细胞的迁移及对血管内皮细胞的黏附能力。结论:褪黑素可能通过破坏细胞内应力纤维结构的稳定,最终导致了胃癌细胞的黏附和迁移能力的降低。 展开更多

关键词 SGC-7901人胃癌细胞 细胞骨架 褪黑素

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热酸蚀刻对氧化锆陶瓷初期粘结强度的影响

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作者 许少平 印厚才 谢海峰 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1601-1604,共4页

目的:考察两种酸液在加热条件下蚀刻处理对氧化锆陶瓷与树脂初期粘结强度的影响。方法:制作32个氧化锆陶瓷片,分为4组分别进行表面处理。A组:喷砂;B组:喷砂+H2SO4和(NH4)2SO4混合液煮沸下处理30 min+Clearfil CeramicPrimer涂底剂;C组:... 目的:考察两种酸液在加热条件下蚀刻处理对氧化锆陶瓷与树脂初期粘结强度的影响。方法:制作32个氧化锆陶瓷片,分为4组分别进行表面处理。A组:喷砂;B组:喷砂+H2SO4和(NH4)2SO4混合液煮沸下处理30 min+Clearfil CeramicPrimer涂底剂;C组:喷砂+HF和HNO3混合液煮沸下处理30 min+Clearfil Ceramic Primer涂底剂;D组:喷砂+ClearfilCeramic Primer涂底剂。制备复合树脂柱,以树脂水门汀将其粘固于处理过的氧化锆陶瓷表面。粘结试件水储24 h后,测试剪切粘结强度。扫描电镜观察各处理组的陶瓷表面。结果:A组的粘结强度值最低,D组其次,B、C组的粘结强度值较高且无显著性差异。扫描电镜观察发现两种酸蚀刻后形成了与喷砂不同的粗化表面形态。结论:两种酸液在加热条件下能够对氧化锆陶瓷进行蚀刻粗化,同时可对其初期粘结强度起到增强作用。 展开更多

关键词 氧化锆 粘结 酸蚀 表面处理

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pEGFP-N1/Arf6-T27N重组真核表达载体的构建及其在人乳腺癌细胞株中的表达

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作者 李卫星 杜军 胡圳圳 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1587-1592,共6页

目的:构建含有Arf6-T27N基因的重组真核表达载体,并检测Arf6-T27N蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中的表达情况,以期为深入研究Arf6在乳腺癌细胞迁移中的作用机制奠定基础。方法:从含Arf6-T27N基因的真核表达质粒pXS-Arf6-T27N中扩增出Arf... 目的:构建含有Arf6-T27N基因的重组真核表达载体,并检测Arf6-T27N蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中的表达情况,以期为深入研究Arf6在乳腺癌细胞迁移中的作用机制奠定基础。方法:从含Arf6-T27N基因的真核表达质粒pXS-Arf6-T27N中扩增出Arf6-T27N基因,插入pEGFP-N1载体中构建成pEGFP-N1/Arf6-T27N,利用脂质体将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞。用新霉素筛选稳定表达的细胞系,Western blot确定重组蛋白表达,并用Boyden chamber小室实验检测转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞迁移能力的改变。结果:限制性内切酶鉴定和核酸定列测定证实成功构建了含Arf6-T27N的重组真核表达载体pEGFP-N1/Arf6-T27N。以重组质粒稳定转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,能检测到Arf6-T27N蛋白的表达,且Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移。结论:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/Arf6-T27N,稳定转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞可检测到其蛋白水平的稳定表达,重组质粒介导的Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移。 展开更多

关键词 Arf6-T27N MDA-MB-231人乳腺癌细胞 基因转染 稳定表达 细胞迁移

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