QuEChERS提取-高效液相色谱法测定泰山虫草中4种黄曲霉毒素的含量 被引量：8

1

作者 叶雪玲 陈小燕 +3 位作者 姜小涵 赵凤春 李艳玲 田园 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期442-446,共5页

取泰山虫草样品2.50g,加入7.5mL水和含0.1%(体积分数)乙酸的乙腈混合溶液10mL,涡旋振荡1min,再加入无水硫酸镁4.0g和氯化钠1.0g,离心,取上清液1.0 mL于含150mg无水硫酸镁、50mg N-丙基乙二胺、50mg C18填料、12mg石墨化碳黑的2mL分散固... 取泰山虫草样品2.50g,加入7.5mL水和含0.1%(体积分数)乙酸的乙腈混合溶液10mL,涡旋振荡1min,再加入无水硫酸镁4.0g和氯化钠1.0g,离心,取上清液1.0 mL于含150mg无水硫酸镁、50mg N-丙基乙二胺、50mg C18填料、12mg石墨化碳黑的2mL分散固相萃取管中,涡旋振荡30s,取上清液经过0.22μm有机滤膜进行过滤,采用高效液相色谱法测定其中4种黄曲霉毒素的含量。结果表明:4种黄曲霉毒素的质量浓度在一定范围内与其峰面积之间呈线性关系,检出限(3S/N)在0.06～0.20μg·kg-1之间。按照标准加入法进行加标回收试验,测得回收率在92.4%～102%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.7%～3.5%之间。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 QUECHERS 黄曲霉毒素 泰山虫草

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Perifosine通过抑制PI3K/Akt途径调节人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡与自噬 被引量：12

2

作者 李若彤 王丽 +3 位作者 曹亭 陈圣文 费洪荣 王凤泽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期644-650,共7页

目的:探讨Akt激酶抑制剂perifosine对人胶质瘤U251细胞凋亡、细胞周期和自噬的影响,确定perifosine诱导的细胞自噬与其促进胶质瘤细胞凋亡的相关性。方法:Perifosine处理U251细胞后,采用MTT法检测细胞活力;流式细胞术分析perifosine对U... 目的:探讨Akt激酶抑制剂perifosine对人胶质瘤U251细胞凋亡、细胞周期和自噬的影响,确定perifosine诱导的细胞自噬与其促进胶质瘤细胞凋亡的相关性。方法:Perifosine处理U251细胞后,采用MTT法检测细胞活力;流式细胞术分析perifosine对U251细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI双标法检测perifosine对胶质瘤细胞凋亡的作用;免疫印迹法检测细胞内P21、P27和cyclin B1等细胞周期调控相关蛋白以及caspase-9、PARP等细胞凋亡相关蛋白的表达水平;通过观察细胞内自噬标志分子LC3-II的分布与表达来确定perifosine对自噬的诱导作用。结果:Perifosine剂量依赖性地抑制U251细胞活力,能够通过抑制cyclin B1的表达而阻滞胶质瘤细胞周期于G_2期。Perifosine促进了U251细胞内caspase-9和PARP的剪切,抑制survivin表达,从而诱导胶质瘤细胞发生凋亡。同时,perifosine与自噬抑制剂氯喹联用后,U251细胞凋亡数量明显增加。结论:Perifosine能够抑制U251细胞的增殖,同时诱导细胞发生凋亡与自噬,抑制自噬促进了perifosine诱导的胶质瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 PERIFOSINE AKT 胶质瘤 细胞凋亡 自噬

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番木瓜果酒发酵及其抗氧化能力分析 被引量：6

3

作者 刘兆玺 徐康 +2 位作者 李艳玲 张俊丽 郭萌萌 《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第8期45-48,共4页

以番木瓜为原料,经破碎、酶解、成分调整后接种葡萄酒活性干酵母,于(22±1)℃发酵制备番木瓜果酒。研究发酵过程中总糖、还原糖、滴定酸含量与抗氧化能力的变化,明确番木瓜果酒的理化指标与感官品质。结果表明,番木瓜果酒发酵过程... 以番木瓜为原料,经破碎、酶解、成分调整后接种葡萄酒活性干酵母,于(22±1)℃发酵制备番木瓜果酒。研究发酵过程中总糖、还原糖、滴定酸含量与抗氧化能力的变化,明确番木瓜果酒的理化指标与感官品质。结果表明,番木瓜果酒发酵过程中总糖、还原糖含量逐渐降低,滴定酸含量增加,总酚含量、DPPH自由基清除率和亚铁还原能力(FRAP值)降低,pH值变化无规律性。番木瓜果酒酒精度10.7%vol,残糖量4.4 g/L,滴定酸4.5 g/L,总酚含量3.0 g/L,DPPH自由基清除率63.0%,FRAP值2.33 mmol/L,属半干型果酒,抗氧化能力较强,理化与感官品质均符合相关果酒标准要求。 展开更多

关键词 番木瓜 发酵 抗氧化能力 果酒品质

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黄伞多糖的研究进展 被引量：5

4

作者 洒荣波 孙继政 +1 位作者 高艳霞 唐瑜菁 《中国酿造》 CAS 北大核心 2015年第10期9-12,共4页

黄伞多糖具有调节机体免疫力、抗肿瘤、降血脂、抗菌、抗氧化、抗衰老等多方面的生物活性,是目前最具开发潜力的食药用真菌多糖。该文对黄伞多糖的来源、菌丝体发酵工艺优化、多糖提取工艺优化、分离提取方法、纯化和组成鉴定、生物学... 黄伞多糖具有调节机体免疫力、抗肿瘤、降血脂、抗菌、抗氧化、抗衰老等多方面的生物活性,是目前最具开发潜力的食药用真菌多糖。该文对黄伞多糖的来源、菌丝体发酵工艺优化、多糖提取工艺优化、分离提取方法、纯化和组成鉴定、生物学活性进行了综述,以期对黄伞多糖未来的研究提供理论基础。 展开更多

关键词 黄伞多糖 提取工艺优化 分离提取 组成鉴定 生物学活性

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氢分子通过激活自噬抑制C/EBP同源蛋白介导的巨噬细胞凋亡 被引量：5

5

作者 田华 高聪聪 +6 位作者 郑冠琳 姚来彬 焦鹏 杨娜娜 孔雅茹 姚树桐 秦树存 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1368-1375,共8页

目的:研究氢分子对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导巨噬细胞凋亡的影响,并探讨可能的分子机制。方法:体外培养鼠源RAW264.7巨噬细胞,处理前更换为饱和含氢培养基,分别给予3-甲基腺嘌呤(3-methyladenin... 目的:研究氢分子对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导巨噬细胞凋亡的影响,并探讨可能的分子机制。方法:体外培养鼠源RAW264.7巨噬细胞,处理前更换为饱和含氢培养基,分别给予3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA;5 mmol/L)和雷帕霉素(rapamycin,Rap;3μmol/L)预处理1 h,再加入ox-LDL(100 mg/L)继续培养24 h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况,试剂盒测定培养基中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,Western blot法检测自噬标志分子beclin-1和内质网应激相关促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)表达的变化,激光共聚焦显微镜观测细胞内微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达变化。结果:氢分子显著抑制ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞活力降低、LDH漏出增加、细胞凋亡及CHOP表达上调;ox-LDL诱导巨噬细胞自噬反应,表现为beclin-1表达上调,LC3颗粒化聚集,而氢分子可进一步促进ox-LDL对细胞自噬的诱导作用,且氢分子的这种促进作用可被自噬抑制剂3-MA拮抗,而被自噬诱导剂Rap增强(P<0.01)。另外,氢分子对ox-LDL所致的巨噬细胞凋亡、细胞活力降低及CHOP上调的抑制作用也可被3-MA拮抗,而被Rap促进。在体外培养的人源THP-1巨噬细胞中也观察到类似的结果,即氢分子不仅可抑制ox-LDL诱导的细胞凋亡和CHOP上调,也可使beclin-1表达进一步上调(P<0.01)。结论:氢分子可通过下调CHOP表达抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡,其上游机制可能是通过激活自噬实现的。 展开更多

关键词 氢分子 C/EBP同源蛋白 细胞自噬 氧化型低密度脂蛋白 巨噬细胞 细胞凋亡

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地昔帕明逆转人脑胶质瘤耐药细胞U251/TR对替莫唑胺的耐药作用（英文） 被引量：3

6

作者 马健 杨艳茹 +8 位作者 刘景景 李芳芳 陈美华 王浩 王蕾 孙立立 王凤泽 王德才 张汉霆 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期620-626,607,共7页

目的探讨抗抑郁药地昔帕明(DMI)对人脑胶质瘤耐药细胞(U251/TR)对替莫唑胺(TMZ)耐药作用的影响及其机制。方法 DMI 20~80μmol·L^(-1)或TMZ 0.5~10 mmol·L^(-1)处理U251/TR细胞24 h,用CCK-8法测定DMI和TMZ对U251/TR细胞增殖... 目的探讨抗抑郁药地昔帕明(DMI)对人脑胶质瘤耐药细胞(U251/TR)对替莫唑胺(TMZ)耐药作用的影响及其机制。方法 DMI 20~80μmol·L^(-1)或TMZ 0.5~10 mmol·L^(-1)处理U251/TR细胞24 h,用CCK-8法测定DMI和TMZ对U251/TR细胞增殖抑制的半数有效量(IC50)。CCK-8检测TMZ(1和2 mmol·L^(-1))和DMI(20,30和40μmol·L^(-1))联合或单独处理U251/TR细胞24 h对细胞增殖抑制的影响,用金正均法计算Q值来评价两种药物的协同效应。TMZ(1 mmol·L^(-1))和DMI(30μmol·L^(-1))联合或单独处理U251/TR细胞24 h,以Hoechst33258染色观察细胞核形态,发光法检测胱天蛋白酶3活性;实时定量PCR和Western蛋白印迹法检测C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达;小干扰RNA(si RNA)沉默CHOP的表达后,观察TMZ(1 mmol·L^(-1))和DMI(30μmol·L^(-1))联合给药对U251/TR增殖抑制的影响。结果 DMI或TMZ单用对U251/TR细胞增殖均有明显的抑制作用,并且呈浓度依赖性(r2=0.983,0.982,P<0.05),IC50分别为(33.6±0.5)μmol·L^(-1)和(2.5±0.6)mmol·L^(-1)。TMZ(1和2 mmol·L^(-1))和DMI(20,30和40μmol·L^(-1))联合给药能24 h对U251/TR细胞的增殖抑制率明显强于单独给药,以金正均法计算联合给药的Q值均>1.15,证实TMZ和DMI联合给药具有协同效应。同时,DMI 30μmol·L^(-1)和TMZ 1 mmol·L^(-1)联和应用可诱导U251/TR细胞凋亡,主要表现为细胞核固缩、染色质沉积和胱天蛋白酶3的激活。这种凋亡诱导作用明显好于单独给药的效果(P<0.05)。DMI和TMZ联合应用能显著激活细胞内质网应激标志蛋白CHOP的表达(P<0.05)。以si RNA沉默CHOP表达后,DMI逆转TMZ耐药的作用明显减弱,联合给药组细胞生存率由51.8%升至62.2%(P<0.05)。结论 DMI能逆转人脑胶质瘤细胞U251/TR对TMZ的耐药性,其机制可能与激活CHOP表达有关。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 地昔帕明 替莫唑胺 逆转耐药 C/EBP同源蛋白

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丹参内生真菌产生淀粉酶菌株的筛选鉴定及酶学性质分析 被引量：3

7

作者 李艳玲 樊鲁玉 +7 位作者 侯衍英 刘超 王玉婷 史仁玖 常正尧 田园 张显忠 郝岗平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期108-112,118,共6页

目的:从丹参内生真菌中筛选耐热性强的酸性生淀粉酶菌株,并对其酶学性质进行初步研究。方法:以50株丹参内生真菌作为筛选对象,通过淀粉固体培养基初筛、液体发酵复筛,筛选产生淀粉酶活力较高的菌株;通过形态学观察和ITS序列分析对产酶... 目的:从丹参内生真菌中筛选耐热性强的酸性生淀粉酶菌株,并对其酶学性质进行初步研究。方法:以50株丹参内生真菌作为筛选对象,通过淀粉固体培养基初筛、液体发酵复筛,筛选产生淀粉酶活力较高的菌株;通过形态学观察和ITS序列分析对产酶菌株进行鉴定。结果:从50株丹参内生真菌中,筛选出5株产生淀粉酶活力较高的菌株,其中菌株ZDH2-2-1-1为产淀粉酶活性最强的菌株,酶活力达到117.63 U/m L,经鉴定为互隔链格孢(Alternaria alternata)。该淀粉酶最适p H为4.0,最适反应温度为55℃,具有较好的热稳定性和p H稳定性,对生淀粉具有广谱的降解能力。通过薄层层析发现,ZDH2-2-1-1所产淀粉酶的酶解产物为葡萄糖。结论:丹参内生真菌能产生高活性的耐热性酸性生淀粉酶,在生淀粉深加工中具有极大的开发潜力。 展开更多

关键词 丹参 内生真菌 生淀粉酶 降解能力

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黄伞胞外多糖发酵培养条件的响应面法优化 被引量：2

8

作者 洒荣波 王辉 +3 位作者 鹿慧 魏梅 许盈盈 卜睿智 《中国酿造》 CAS 北大核心 2015年第12期69-72,共4页

采用Plackett-Burman试验设计筛选显著影响多糖产量的培养条件,然后用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,最后通过Box-Behnken设计及响应面分析确定主要影响因素的最佳值。结果表明,多糖发酵培养条件为:初始p H值6.5、摇床转速209 r/min、... 采用Plackett-Burman试验设计筛选显著影响多糖产量的培养条件,然后用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,最后通过Box-Behnken设计及响应面分析确定主要影响因素的最佳值。结果表明,多糖发酵培养条件为:初始p H值6.5、摇床转速209 r/min、装液量48 m L/250 m L、温度31℃、接种量10%、种龄90 h、培养时间180 h。在此最佳条件下,黄伞发酵胞外多糖产量可达7.44 g/L,比优化前提高了近2倍。利用响应面分析法优化黄伞胞外多糖发酵培养条件是可靠的,具有实际的应用价值。 展开更多

关键词 黄伞 胞外多糖 培养条件优化 响应面分析

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双效毒蝇绳对家蝇的控制效果 被引量：3

9

作者 杜迎刚 赖钟雄 张忠 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期915-920,共6页

为评价利用球孢白僵菌F08菌株的分生孢子粉和奋斗呐5%可湿性粉剂制成的双效毒蝇绳对家蝇的控制效果,本研究对其在室内笼中、室外猪舍和垃圾处理场环境条件下对家蝇的控制效果进行了测试。结果表明:1室内和室外试验条件下,双效毒蝇绳对... 为评价利用球孢白僵菌F08菌株的分生孢子粉和奋斗呐5%可湿性粉剂制成的双效毒蝇绳对家蝇的控制效果,本研究对其在室内笼中、室外猪舍和垃圾处理场环境条件下对家蝇的控制效果进行了测试。结果表明:1室内和室外试验条件下,双效毒蝇绳对家蝇的控制效果都优于奋斗呐毒蝇绳和球孢白僵菌毒蝇绳。3种试验条件下,双效毒蝇绳对家蝇的校正防治效果与球孢白僵菌毒蝇绳间有极显著差异(P<0.01);且在猪舍试验条件下,其校正防治效果与奋斗呐毒蝇绳组1周时有显著差异(P<0.05),2周时有极显著差异(P<0.01)。2球孢白僵菌对家蝇的感病率仅在室内笼中狭小空间时在球孢白僵菌毒蝇绳组和双效毒蝇绳组有显著差异(P<0.01),而在猪舍或垃圾处理场试验条件下无显著差异(P<0.05)。说明双效毒蝇绳中的球孢白僵菌F08菌株与奋斗呐具有较好的兼容性,一起对家蝇发挥很好的控制作用。 展开更多

关键词 球孢白僵菌 奋斗呐 双效毒蝇绳 家蝇 防治效果 感病率

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生物技术专业绿色实验教学模式的探索与实践 被引量：6

10

作者 郭东会 张显忠 +1 位作者 史仁玖 范明杰 《安徽农业科学》 CAS 2016年第7期308-309,312,共3页

笔者针对生物技术专业实验教学中存在的环保问题,从树立师生的绿色理念,探索绿色实验教学模式和改革实验室管理制度3个方面,进行了实验教学绿色化的探索和实践,从而达到实现绿色实验教学的目标,以期为高校实验教学绿色化改革提供研究范例。

关键词 生物技术专业 绿色实验教学模式 探索

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猪繁殖与呼吸综合征病毒糖基化囊膜蛋白5原核表达载体的构建及免疫原性分析 被引量：1

11

作者 李欣贤 张晓丹 +3 位作者 刘晶晶 苗增民 张涛涛 柴同杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期89-94,共6页

为分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白5(GP5)的免疫原性,本研究通过提取PRRSV分离株(GenBank登录号:HQ701732.1)RNA和RT-PCR扩增得到开放阅读框5(ORF5)基因。根据ORF5的基因序列,设计2对引物,经PCR扩增分别获得不含信号... 为分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白5(GP5)的免疫原性,本研究通过提取PRRSV分离株(GenBank登录号:HQ701732.1)RNA和RT-PCR扩增得到开放阅读框5(ORF5)基因。根据ORF5的基因序列,设计2对引物,经PCR扩增分别获得不含信号肽和跨膜功能区的2段基因片段。利用酶切位点,将2段基因连接到原核表达载体pET-28a(+)上,获得重组表达质粒pET28a-GP5。将重组质粒导入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得表达。经Western blotting鉴定,重组蛋白可被PRRSV阳性血清识别。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA方法检测,小鼠能产生针对蛋白的血清抗体。因此,该重组PRRSV GP5蛋白具有良好的生物学活性,为进一步研究GP5蛋白的结构和功能奠定基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 糖基化囊膜蛋白5 重组蛋白 ELISA WESTERN BLOTTING

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CUDC-907诱导胶质瘤细胞DNA损伤与自噬的实验研究 被引量：5

12

作者 焦鹏 黄振州 +3 位作者 张晓静 龙妍君 李召君 王凤泽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期260-266,共7页

目的:探讨新型组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl-inositol 3-kinase,PI3K)双靶点抑制剂CUDC-907对人胶质瘤U251细胞DNA损伤、细胞周期及自噬的影响。方法:采用不同浓度的CUDC-907处理U251细胞... 目的:探讨新型组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl-inositol 3-kinase,PI3K)双靶点抑制剂CUDC-907对人胶质瘤U251细胞DNA损伤、细胞周期及自噬的影响。方法:采用不同浓度的CUDC-907处理U251细胞24 h,MTT法检测细胞活力的变化;激光共聚焦显微镜观察DNA损伤标志物γ-H2AX在细胞内的分布;流式细胞术分析CUDC-907对细胞周期的影响;Western blot实验检测细胞内相关蛋白表达水平的变化。结果:CUDC-907能够抑制U251细胞活力。在CUDC-907处理的细胞中,蛋白激酶B(PKB)/Akt和p70核糖体蛋白S6激酶(p70s6K)的磷酸化水平降低,γ-H2AX的焦点数量与蛋白表达显著升高(P <0.05);U251细胞经CUDC-907作用后,G2/M期细胞数量增多;Western blot实验结果表明,CUDC-907促进p21的表达,同时抑制细胞周期素B1(cyclin B1)的蛋白表达和细胞分裂周期蛋白2(Cdc2)的磷酸化水平(P <0.05);另外,CUDC-907能够诱导细胞自噬,抑制自噬可促进CUDC-907诱导的DNA损伤。结论:CUDC-907能够显著抑制PI3K/Akt信号通路,诱导胶质瘤细胞发生DNA损伤,并阻滞细胞于G_2/M期,同时可诱导胶质瘤细胞发生保护性自噬。 展开更多

关键词 CUDC-907 胶质瘤 DNA损伤 PI3K/AKT信号通路 自噬

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一种高选择性的硫化氢比率探针

13

作者 丁静 葛海燕 +2 位作者 葛燕青 王玉民 李艳玲 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期342-345,共4页

近些年来的研究表明，硫化氢（H2S）作为继一氧化氮（No）和一氧化碳（CO）之后的第三种气体信使分子，在生物体的各种生理、病理过程中都起着重要的作用，比如调控炎症、控制血压、调节神经递质等。此外，细胞内H。S含量的变化还会引... 近些年来的研究表明，硫化氢（H2S）作为继一氧化氮（No）和一氧化碳（CO）之后的第三种气体信使分子，在生物体的各种生理、病理过程中都起着重要的作用，比如调控炎症、控制血压、调节神经递质等。此外，细胞内H。S含量的变化还会引起一些疾病，如阿尔茨海默症、唐氏综合症、糖尿病和肝硬化。因此，发展具有高选择性和高灵敏度检测H2S的方法具有重要意义，并能为学术研究和临床应用提供有用的信息。 展开更多

关键词 高选择性 硫化氢 探针 比率 阿尔茨海默症 信使分子 一氧化碳 一氧化氮

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CP466722抑制HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡 被引量：4

14

作者 孙珂 褚翠英 +3 位作者 郑梦琦 高远 齐由坤 王凤泽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期655-660,共6页

目的:研究共济失调毛细血管扩张症突变蛋白(ATM)抑制剂CP466722对人肝细胞癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:MTT法检测CP466722对HepG2细胞活力的抑制作用,细胞集落形成实验观察CP466722对细胞增殖的影响,流式细胞... 目的:研究共济失调毛细血管扩张症突变蛋白(ATM)抑制剂CP466722对人肝细胞癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:MTT法检测CP466722对HepG2细胞活力的抑制作用,细胞集落形成实验观察CP466722对细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞周期的变化,TUNEL染色观察CP466722对细胞凋亡诱导作用,Western blotting检测细胞内蛋白的表达水平。结果:CP466722能够剂量依赖性地抑制HepG2细胞活力与细胞增殖;HepG2细胞经CP466722作用24 h后,细胞周期明显阻滞于G_2/M期,同时磷酸化细胞分裂周期蛋白2(p-Cdc2)、细胞分裂周期蛋白25 C(Cdc25C)和磷酸化Cdc25C(p-Cdc25C)的蛋白水平下降,而p27的蛋白表达则上调。较高浓度的CP466722诱导HepG2细胞发生凋亡,促进胱天蛋白酶3(caspase-3)和多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切。此外,CP466722抑制β-联蛋白(β-catenin)及其下游因子生存素(survivin)的表达,上调p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的磷酸化水平。结论:CP466722抑制HepG2细胞增殖并诱导细胞发生凋亡,其机制可能与其抑制β-catenin信号途径和激活p38 MAPK相关。 展开更多

关键词 CP466722 肝细胞癌 细胞增殖 细胞凋亡 P38丝裂原活化蛋白激酶 β-联蛋白

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大蒜素通过抑制caspase-12减轻巨噬源性泡沫细胞凋亡 被引量：6

15

作者 康攀攀 刘映雪 +6 位作者 郭甜甜 张公安 李东轩 田华 周健 秦树存 姚树桐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1951-1957,共7页

目的:研究大蒜素对巨噬源性泡沫细胞凋亡和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)凋亡通路关键分子半胱天冬酶-12(caspase-12)的影响,并探讨可能的分子机制。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,分别给予大蒜素(12.5、25和50 mg/L)... 目的:研究大蒜素对巨噬源性泡沫细胞凋亡和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)凋亡通路关键分子半胱天冬酶-12(caspase-12)的影响,并探讨可能的分子机制。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,分别给予大蒜素(12.5、25和50 mg/L)和4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid,PBA;4 mmol/L)预处理1 h后,加入氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL;100 mg/L)或衣霉素(tunicamycin,TM;4 mg/L)处理24 h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞活力和凋亡情况;采用相应的试剂盒测定细胞内caspase-3和培养液中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的活性;采用Western blot技术检测caspase-12的表达变化;油红O染色检测细胞内脂质蓄积;酶比色法测定细胞内总胆固醇含量。结果:与ERS抑制剂PBA相似,大蒜素可减轻oxLDL所致的巨噬细胞损伤,表现为细胞活力增加、LDH漏出减少、细胞凋亡率和caspase-3活性降低(P<0.05);ERS诱导剂TM可导致巨噬细胞活力下降,LDH漏出增多及细胞凋亡率升高(P<0.05),大蒜素可明显阻断TM的上述作用;大蒜素明显抑制ox-LDL所致的caspase-12活化(P<0.05);与TM组相比,大蒜素也可显著抑制TM所诱导的caspase-12活化(P<0.05)。另外,大蒜素还可显著抑制ox-LDL所诱导的巨噬细胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成(P<0.05)。结论:大蒜素可减少ox-LDL所致的巨噬源性泡沫细胞凋亡,其机制可能与抑制caspase-12活化有关。 展开更多

关键词 大蒜素 半胱天冬酶-12 氧化低密度脂蛋白 巨噬细胞 细胞凋亡

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抑制自噬促进MK-2206诱导SGC-7901胃癌细胞发生DNA损伤 被引量：3

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作者 张翠 姜文艳 +3 位作者 吴玉梅 庄梦玮 王西双 焦鹏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1545-1549,共5页

目的:探讨蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)抑制剂MK-2206对胃癌细胞SGC-7901DNA损伤的影响。方法:不同浓度的MK-2206作用于SGC-7901细胞后,免疫荧光检测细胞内DNA损伤标记分子磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)焦点的生成,Western blot检测DN... 目的:探讨蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)抑制剂MK-2206对胃癌细胞SGC-7901DNA损伤的影响。方法:不同浓度的MK-2206作用于SGC-7901细胞后,免疫荧光检测细胞内DNA损伤标记分子磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)焦点的生成,Western blot检测DNA损伤相关蛋白的表达水平,同时观察MK-2206对自噬标志蛋白LC3-II表达量的影响,用以确定MK-2206是否促进细胞发生自噬。结果:MK-2206能够诱导SGC-7901细胞发生DNA损伤,促进细胞内γ-H2AX焦点生成,并且激活DNA损伤相关蛋白的表达;MK-2206作用细胞后,LC3-II的生成增加;抑制细胞的自噬显著增强了MK-2206诱导的H2AX磷酸化水平。结论:Akt抑制剂MK-2206能够诱导细胞发生DNA损伤和自噬,抑制自噬促进了MK-2206诱导的DNA损伤。 展开更多

关键词 MK-2206 Akt抑制剂 DNA损伤 Γ-H2AX 细胞自噬

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杨树枯萎病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：4

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作者 洒荣波 晁强 +2 位作者 王晓辉 隋君康 刘训理 《山东农业科学》 2019年第2期131-135,共5页

为建立荧光定量PCR检测杨树枯萎病的方法和明确前期分离的拮抗菌N6-34对杨树枯萎病致病菌尖孢镰刀菌的作用,本试验采用常规PCR法扩增尖孢镰刀菌的特异性片段,将此片段与载体连接构建质粒,提取质粒DNA在实时荧光定量PCR仪上采用两步法进... 为建立荧光定量PCR检测杨树枯萎病的方法和明确前期分离的拮抗菌N6-34对杨树枯萎病致病菌尖孢镰刀菌的作用,本试验采用常规PCR法扩增尖孢镰刀菌的特异性片段,将此片段与载体连接构建质粒,提取质粒DNA在实时荧光定量PCR仪上采用两步法进行扩增并绘制实时荧光定量PCR标准曲线,同时对杨树进行不同灌根处理(T1:1×10~6 cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和未接N6-34菌株的发酵培养液各20 mL;T2:1×10~6 cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和灭活的N6-34菌株发酵培养液各20 mL;T3:1×10~6 cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和N6-34菌株的发酵培养液各20 mL),并于10、20、30 d取样检测杨树根际尖孢镰刀菌数量。结果表明:本研究建立的方法能应用于土传尖孢镰刀菌导致的杨树枯萎病的检测;T1处理的尖孢镰刀菌的数量随处理时间的延长呈先下降后上升的趋势,T2和T3中的尖孢镰刀菌数量则呈下降趋势,表明N6-34能够抑制尖孢镰刀菌。本研究对指导杨树种植和病害预报具有极为重要的应用价值,能够为杨树病害管理提供科学依据。 展开更多

关键词 荧光定量PCR 杨树枯萎病 尖孢镰刀菌 定量检测

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CHK1抑制剂SCH900776抑制胶质瘤细胞U251的增殖及迁移 被引量：2

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作者 李召君 李荣耀 +2 位作者 王茹 费洪荣 王凤泽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期200-205,共6页

目的:本研究以胶质瘤细胞U251为实验用细胞株,探讨细胞周期检测点激酶1(CHK1)抑制剂SCH900776对其增殖及迁移的影响。方法:MTT法和细胞集落形成实验观察SCH900776对细胞增殖的影响;流式细胞术分析SCH900776对细胞周期分布的影响;划痕实... 目的:本研究以胶质瘤细胞U251为实验用细胞株,探讨细胞周期检测点激酶1(CHK1)抑制剂SCH900776对其增殖及迁移的影响。方法:MTT法和细胞集落形成实验观察SCH900776对细胞增殖的影响;流式细胞术分析SCH900776对细胞周期分布的影响;划痕实验观察SCH900776对细胞迁移的影响;Western blot实验检测相关蛋白的表达水平。结果:SCH900776能够明显抑制U251细胞的增殖,诱导细胞发生S期或G2/M期阻滞,同时下调细胞分裂周期蛋白2(Cdc2)和p-Cdc2的水平;SCH900776对细胞迁移表现出明显的抑制作用;Western blot结果表明,SCH900776可升高p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化水平,同时抑制蛋白激酶B(Akt)的磷酸化激活。结论:CHK1抑制剂SCH900776能够抑制胶质瘤细胞U251的增殖与迁移,其机制可能与其激活p38MAPK和抑制Akt活性相关。 展开更多

关键词 细胞周期检测点激酶1 SCH900776 细胞增殖 细胞迁移 胶质瘤

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牦牛酸奶酪中高产乳糖酶菌株分离鉴定及其酶学性质 被引量：2

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作者 陆云彪 王盈桐 +3 位作者 李学威 刘晓东 赵凤春 田园 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第5期124-129,共6页

为获得藏区牦牛酸奶酪中的产乳糖酶活力高的菌株,采用含X-gal的培养基进行初筛,从购买的10份样品中筛选到10株产乳糖酶细菌;发酵复筛后,发现其中RTM-111菌株的产酶活力最高。综合形态学特征、生理生化实验及16S rDNA序列分析,确定该菌... 为获得藏区牦牛酸奶酪中的产乳糖酶活力高的菌株,采用含X-gal的培养基进行初筛,从购买的10份样品中筛选到10株产乳糖酶细菌;发酵复筛后,发现其中RTM-111菌株的产酶活力最高。综合形态学特征、生理生化实验及16S rDNA序列分析,确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。对该菌株所产乳糖酶的酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为50℃,最适pH为7.5。稳定性实验表明,该酶在温度40～50℃、pH6.5～8.0时具有较高稳定性。金属离子Na^+、Mg^(2+)和Mn^(2+)对酶活性具有较强的激活作用,而Cu^(2+)、Zn^(2+)和EDTA对酶活有显著的抑制作用。枯草芽孢杆菌RTM-111产乳糖酶活力高、酶的性质稳定,具有潜在应用价值。 展开更多

关键词 牦牛酸奶酪 乳糖酶 分离 鉴定 酶学性质

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蚯蚓体内外分泌液的抗菌活性研究 被引量：9

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作者 张显忠 张欣然 +2 位作者 武晓雯 袁燕涛 郭东会 《安徽农业科学》 CAS 2018年第13期95-97,共3页

[目的]探究蚯蚓体内外分泌液的抗菌活性。[方法]分别将蚯蚓体内外分泌液作用于不同的临床致病菌株,筛选对体内外分泌液的敏感菌种,并在此基础上分析温度、pH、蚯蚓体内外分泌液浓度等因素对蚯蚓分泌液抗菌效果的影响。[结果]蚯蚓体内外... [目的]探究蚯蚓体内外分泌液的抗菌活性。[方法]分别将蚯蚓体内外分泌液作用于不同的临床致病菌株,筛选对体内外分泌液的敏感菌种,并在此基础上分析温度、pH、蚯蚓体内外分泌液浓度等因素对蚯蚓分泌液抗菌效果的影响。[结果]蚯蚓体内外分泌液均对金黄色葡萄球菌有良好的抗菌效果;诱发最佳抗菌效果的环境条件为:内分泌液原液、30℃、pH 7~8;外分泌液原液、60℃、pH 7~8。[结论]研究结果为更好地开发与利用蚯蚓资源提供了理论基础和实践依据。 展开更多

关键词 蚯蚓 分泌液 抗菌效果 金黄色葡萄球菌

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