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上尿路结石术后感染的病原菌及相关因素分析 被引量:12
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作者 王文俊 郝宗耀 +6 位作者 曾国华 张艳斌 席俊华 樊松 赵磊 王建忠 梁朝朝 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第10期1663-1666,共4页
分析上尿路结石(UUC)术后感染的病原菌及相关因素。回顾2 500例行内镜碎石治疗的UUC术后感染发生率,分析所有对象临床特征与术后感染症状发生的关联性,并探讨存在感染症状的患者病原菌分布占比情况,结果显示UUC患者内镜碎石术治疗后感... 分析上尿路结石(UUC)术后感染的病原菌及相关因素。回顾2 500例行内镜碎石治疗的UUC术后感染发生率,分析所有对象临床特征与术后感染症状发生的关联性,并探讨存在感染症状的患者病原菌分布占比情况,结果显示UUC患者内镜碎石术治疗后感染症状发生率较高,年龄≥60岁、女性、合并糖尿病、结石>5 cm、急性梗阻、手术类型、手术时间延长等项目均对感染的发生有显著影响,UUC合并感染患者主要致病菌为革兰阴性菌,大肠埃希菌是导致感染发生的主要革兰阴性致病菌,粪肠球菌是主要革兰阳性菌致病菌,临床治疗需根据药敏试验结果结合患者自身情况综合制定用药方案,在保证安全性的同时提高治疗效果,改善预后。 展开更多
关键词 上尿路结石 感染 临床特征 病原菌 药敏试验
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低温环境复灌对兔肾缺血-再灌注损伤保护作用的实验研究 被引量:2
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作者 丁汉东 廖贵益 +1 位作者 钟金彪 赵飞 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期372-378,共7页
目的探讨建立兔肾缺血低温环境、常温环境及高温环境再灌注损伤模型的新方法,并评价低温环境复灌对兔肾缺血-再灌注损伤(IRI)的影响。方法将60只健康新西兰兔随机分为5组:对照组(A组)、假手术组(B组)、低温环境复灌组(C组)、常温环境复... 目的探讨建立兔肾缺血低温环境、常温环境及高温环境再灌注损伤模型的新方法,并评价低温环境复灌对兔肾缺血-再灌注损伤(IRI)的影响。方法将60只健康新西兰兔随机分为5组:对照组(A组)、假手术组(B组)、低温环境复灌组(C组)、常温环境复灌组(D组)、高温环境复灌组(E组),每组12只。术后7 d内每日检测各组兔的血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平;术后1 d检测各组兔肾组织内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;术后1 d采用苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化;术后1 d采用d UTP缺口末端标记(TUNEL)染色评价细胞凋亡。结果术后1 d,与A组和B组比较,C、D和E组兔的Scr和BUN水平均升高(均为P<0.01);与C组比较,D组和E组兔的Scr和BUN水平升高更明显(均为P<0.05)。术后7 d内,C、D和E组兔的Scr和BUN水平呈下降趋势。与D组和E组比较,C组兔的Scr和BUN水平较低(均为P<0.05)。与A组和B组比较,C、D和E组的MDA含量均升高,SOD活性均降低(均为P<0.01);与C组比较,D组和E组的MDA含量升高更明显,SOD活性更低(均为P<0.01)。术后1 d肾组织病理学检查示A组和B组肾组织形态结构正常,D组和E组损伤表现明显,与D、E组比较,C组损伤较轻。TUNEL染色结果显示,D组和E组肾小管上皮细胞阳性细胞明显增多,管腔内也可见到阳性细胞,C组阳性细胞数量较D组和E组明显减少。结论冰泥覆盖肾脏、37℃生理盐水及40℃生理盐水连续滴加肾脏可建立不同温度环境复灌模型。低温环境复灌对肾IRI具有保护作用。 展开更多
关键词 肾脏 缺血-再灌注损伤 冷缺血 低温环境复灌 常温环境复灌 高温环境复灌 凋亡
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DHEA与褪黑素在继发性早泄疾病中的表达及意义 被引量:2
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作者 李虎 张耀 +1 位作者 高晶晶 张贤生 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第8期1277-1280,共4页
目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)及褪黑素在继发性早泄(APE)患者外周血的表达情况及临床意义。方法采用qPCR及ELISA检测27例APE患者和30例对照组外周血DHEA基因及褪黑素受体1基因的表达以及DHEA和褪黑素在血清中的分泌浓度,并分析两者之间的... 目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)及褪黑素在继发性早泄(APE)患者外周血的表达情况及临床意义。方法采用qPCR及ELISA检测27例APE患者和30例对照组外周血DHEA基因及褪黑素受体1基因的表达以及DHEA和褪黑素在血清中的分泌浓度,并分析两者之间的差异及其与疾病的相关性。两组间比较采用t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson或Spearman相关分析。结果早泄组的外周血中DHEA的基因表达低于对照组(P<0.01),褪黑素受体1的基因表达低于对照组(P<0.01),差异均有统计学意义。早泄组血清中DHEA分泌的浓度低于对照组(P<0.05),血清中褪黑素的分泌浓度也低于对照组(P<0.001),差异均有统计学意义。APE患者血清中褪黑素浓度的变化与中国早泄患者性功能评价表-5(CIPE-5)评分相关,差异有统计学意义(r=0.7738,P<0.05)。结论DHEA及褪黑素在APE患者外周血的表达明显降低,褪黑素与疾病的严重程度具有相关性。 展开更多
关键词 脱氢表雄酮 褪黑素 继发性早泄 5-羟色胺
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TPD52L1(D53)蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达和预后 被引量:6
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作者 戴维 梁朝朝 +5 位作者 张力 陈先国 邰胜 尹玉 徐雨辰 汪赛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期635-639,共5页
目的探讨肿瘤蛋白家族D52(TPD52)的成员TPD52L1(D53)蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达和对预后的影响。方法采用免疫组化(二步法)检测TPD52L1在72例膀胱尿路上皮癌中的表达,分析TPD52L1表达水平与膀胱尿路上皮癌预后的相关性。结果膀胱尿... 目的探讨肿瘤蛋白家族D52(TPD52)的成员TPD52L1(D53)蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达和对预后的影响。方法采用免疫组化(二步法)检测TPD52L1在72例膀胱尿路上皮癌中的表达,分析TPD52L1表达水平与膀胱尿路上皮癌预后的相关性。结果膀胱尿路上皮癌组织中TPD52L1蛋白表达水平显着高于正常膀胱尿路上皮组织。Kaplan-Meier法单因素生存分析表明,膀胱尿路上皮癌疾病特异性生存期与TPD52L1表达强度有明显相关性(P<0.001,Log Rank检验),Cox回归多因素生存分析表明TPD52L1的高表达是膀胱尿路上皮癌疾病特异性死亡的独立危险因素(HR=3.073,P=0.034)。结论膀胱尿路上皮癌组织中TPD52L1表达明显高于正常膀胱尿路上皮组织。并且随着其表达水平的增高,其疾病特异性死亡率上升,TPD52L1的高表达是膀胱尿路上皮癌预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 膀胱尿路上皮癌 TPD52L1 预后
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氧化锌纳米颗粒诱导促死亡自噬杀伤肾癌细胞的实验研究 被引量:2
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作者 张鹏飞 张力 +2 位作者 王辉 杨荷宇 梁朝朝 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第3期321-326,共6页
目的探讨氧化锌纳米颗粒(ZnO NPs)对肾透明细胞癌细胞Caki-1的杀伤效应及其与自噬的相关性。方法于96孔板内制备Caki-1单层细胞(2×10^3/孔),用不同浓度(1、5、10、15、20、25μg/ml)的ZnO NPs处理后或用15μg/ml ZnO NPs处理不同时... 目的探讨氧化锌纳米颗粒(ZnO NPs)对肾透明细胞癌细胞Caki-1的杀伤效应及其与自噬的相关性。方法于96孔板内制备Caki-1单层细胞(2×10^3/孔),用不同浓度(1、5、10、15、20、25μg/ml)的ZnO NPs处理后或用15μg/ml ZnO NPs处理不同时间(6、12、24 h)后,噻唑兰(MTT)法检测ZnO NPs对Caki-1细胞的生长抑制作用。随后,用Western blot法检测不同处理组细胞自噬效应的变化,最后再次利用MTT法及Hoechst33342/PI染色法测定ZnO NPs与自噬抑制剂或增强剂共处理后细胞活力的改变。结果ZnO NPs对Caki-1细胞具有剂量及时间依赖性的杀伤效应。且ZnO NPs亦可诱导剂量及时间依赖性的自噬效应。将ZnO NPs与自噬抑制剂渥曼青霉素(Wort)共处理后,微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ型(LC3-Ⅱ)蛋白的积累减少。ZnO NPs与自噬诱导剂海藻糖(Trehalose)共处理后,LC3-Ⅱ蛋白的积累增多。同时,将ZnO NPs与Wort或氯喹共处理后,细胞活力相较于ZnO NPs单独处理组有所回升;而将ZnO NPs与Trehalose联合处理细胞后,细胞活力进一步降低。结论ZnO NPs对Caki-1细胞具有剂量及时间依赖性的杀伤效应;在Caki-1细胞中可诱导促死亡自噬效应,抑制自噬可降低ZnO NPs对细胞的杀伤作用,增强自噬可促进ZnO NPs对细胞的杀伤作用;ZnO NPs可促进自噬体的形成,而非抑制自噬底物的降解。 展开更多
关键词 肾癌 Caki-1细胞株 氧化锌纳米颗粒 自噬
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双极等离子经尿道前列腺剜切日间手术临床实践 被引量:2
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作者 邹志辉 张礼刚 +7 位作者 蔡可可 胡永涛 刘书琛 陈佳 葛秦涛 赵晓虎 郝宗耀 梁朝朝 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期148-155,共8页
目的:探讨双极等离子经尿道前列腺剜切术(B-TUERP)日间手术模式治疗良性前列腺增生(BPH)患者的安全性和可行性。方法:分析2021年1月至2022年8月在安徽医科大学第一附属医院日间手术病房接受B-TUERP的34例BPH患者的临床资料。患者在预住... 目的:探讨双极等离子经尿道前列腺剜切术(B-TUERP)日间手术模式治疗良性前列腺增生(BPH)患者的安全性和可行性。方法:分析2021年1月至2022年8月在安徽医科大学第一附属医院日间手术病房接受B-TUERP的34例BPH患者的临床资料。患者在预住院期间完成术前筛查及麻醉评估,入院当天即安排手术,手术由同一医生完成,手术遵循解剖性前列腺剜除及“绝对控血”标准。术后第1天停膀胱冲洗、拔除导尿管并进行出院评估。记录患者的一般资料、围手术期结果、随访结果及住院费用等。结果:所有手术均成功,患者平均年龄(62.2±7.8)岁,前列腺体积(50.2±29.3)mL,手术时间(36.5±19.1)min,血红蛋白下降(16.2±7.1)g/L,血钠下降(2.2±2.0)mmol/L,术后住院时间(17.7±2.2)h,总住院时间(20.8±2.1)h,住院费用(13558±2320)元。除中转普通病房1例外,其余33例均术后首日出院,其中3例带导尿管出院。患者术后3个月国际前列腺症状评分、生活质量评分、最大尿流率等均较术前明显改善(均P<0.01)。34例患者中,发生暂时性尿失禁3例、尿路感染1例、尿道狭窄4例、膀胱颈挛缩2例,无其他Clavien 2级以上并发症发生。结论:在手术技术熟练及选择合适BPH患者条件下,B-TUERP日间手术是一种安全、可行、经济、高效的治疗模式,可以在有条件的医院推广。 展开更多
关键词 良性前列腺增生 经尿道手术 前列腺剜除术 双极等离子 日间手术
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可降解输尿管支架及其涂层的研究进展 被引量:1
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作者 夏开国 沈旭东 +2 位作者 侯冰冰 陈阳(综述) 郝宗耀(审校) 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期166-169,共4页
可降解输尿管支架通常由天然或人工高分子材料或可降解金属材料制成,其表面可伴有涂层药物,具有体内降解优势,无需二次手术拔出,但其降解碎片可能引起再次梗阻和降解碎片的生物毒性仍不确切,尚处于基础研究阶段。设计一种力学性能良好,... 可降解输尿管支架通常由天然或人工高分子材料或可降解金属材料制成,其表面可伴有涂层药物,具有体内降解优势,无需二次手术拔出,但其降解碎片可能引起再次梗阻和降解碎片的生物毒性仍不确切,尚处于基础研究阶段。设计一种力学性能良好,且具有抗炎、防结垢或抗瘤等优良特性的可降解输尿管支架及其涂层是未来的发展方向,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 可降解 输尿管支架 涂层 研究进展
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铁酸锌磁性纳米颗粒诱导活性氧及促死亡自噬杀伤肾癌细胞的实验研究 被引量:1
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作者 杨荷宇 张力 +3 位作者 闻慧琴 温诚浩 王辉 梁朝朝 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第8期1190-1196,共7页
目的探讨铁酸锌磁性纳米颗粒(ZF NPs)对肾癌细胞(Caki-1)的杀伤效应及其与活性氧(ROS)和自噬的相关性。方法采用水相法合成ZF NPs,使用透射电子显微镜(TEM)等方法对ZF NPs进行表征测试;噻唑兰(MTT)法检测ZF NPs对Caki-1细胞的生长抑制作... 目的探讨铁酸锌磁性纳米颗粒(ZF NPs)对肾癌细胞(Caki-1)的杀伤效应及其与活性氧(ROS)和自噬的相关性。方法采用水相法合成ZF NPs,使用透射电子显微镜(TEM)等方法对ZF NPs进行表征测试;噻唑兰(MTT)法检测ZF NPs对Caki-1细胞的生长抑制作用;DCFH-DA染色检测不同处理组细胞内ROS水平;TEM观察ZF NPs能否诱导Caki-1细胞产生自噬泡;Western blot检测不同处理组细胞自噬强度的变化;DCFH-DA染色、MTT及Western blot探究ZF NPs杀伤Caki-1细胞过程中诱导ROS与自噬的调控机制。结果尺寸、形貌均一的ZF NPs具备可用于MRI的顺磁性。ZF NPs对Caki-1细胞具有剂量及时间依赖性杀伤效应,在此过程中,ZF NPs以剂量及时间依赖的方式诱导Caki-1细胞产生ROS,而N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)可减少ROS的积累,并减弱ZF NPs的杀伤效应。ZF NPs亦可诱导Caki-1细胞产生自噬,渥曼青霉素可抑制ZF NPs引起的微管相关蛋白1轻链3-二型(LC3-Ⅱ)蛋白积累,并减弱ZF NPs的杀伤效果。ZF NPs与海藻糖联用则会诱导更强的肿瘤杀伤效应,机制为海藻糖可增加ZF NPs杀伤Caki-1细胞过程中ROS的积累及促死亡自噬的强度。在此过程中,NAC抑制ROS可减弱ZF NPs诱导的自噬强度,渥曼青霉素抑制自噬亦可减少ROS的积累。结论ZF NPs具备成为MRI造影剂的潜力,并可诱导ROS及促死亡自噬交互调控杀伤Caki-1细胞。 展开更多
关键词 肾癌 铁酸锌磁性纳米颗粒 活性氧 自噬
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结石评分系统的应用进展 被引量:1
9
作者 何秋时(综述) 郝宗耀(审校) 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第7期1239-1243,共5页
近年来,有关经皮肾镜碎石术和输尿管软镜碎石术的结石评分系统被不断开发,在预测临床进程、指导医师决策等方面发挥出色。但各结石评分系统仍然存在着不足之处,目前也缺乏对结石评分系统使用的指导。现对各结石评分系统的研究进展、不... 近年来,有关经皮肾镜碎石术和输尿管软镜碎石术的结石评分系统被不断开发,在预测临床进程、指导医师决策等方面发挥出色。但各结石评分系统仍然存在着不足之处,目前也缺乏对结石评分系统使用的指导。现对各结石评分系统的研究进展、不足之处和前景等进行综述。 展开更多
关键词 泌尿系结石 结石评分系统 经皮肾镜碎石术 输尿管软镜碎石术
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慢性前列腺炎的神经因素研究进展 被引量:2
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作者 张一凡(综述) 张礼刚 梁朝朝(审校) 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第6期1102-1106,共5页
慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)是男性常见的泌尿系疾病,其特征是各种类型和严重程度的疼痛和炎症症状,累及骨盆、会阴、阴囊、直肠、睾丸、阴茎和下背部。大多数慢性前列腺炎患者即使在没有侵袭性感染源的情况下,也会出现... 慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)是男性常见的泌尿系疾病,其特征是各种类型和严重程度的疼痛和炎症症状,累及骨盆、会阴、阴囊、直肠、睾丸、阴茎和下背部。大多数慢性前列腺炎患者即使在没有侵袭性感染源的情况下,也会出现慢性、持续性、难治性及部位的多变性疼痛。但CP/CPPS的病因仍未完全确定,神经系统与CP/CPPS的发生发展密切相关,包括中枢神经系统、感觉神经系统、部分神经学相关物质。同时,神经源性炎症和中枢敏化也可能是CP/CPPS产生持续性炎症和疼痛的原因之一,并可降低CP/CPPS患者的疼痛阈值,增加盆腔痛觉。因此,该文就神经因素在CP/CPPS中作用的过程和机制进行综述。 展开更多
关键词 慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征 神经因素 炎症
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miR-101和RanBP9在隐睾睾丸组织中的表达及其意义 被引量:4
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作者 程鹏 黄振宇 +3 位作者 窦贤明 毛军 徐雨辰 张贤生 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第9期1343-1348,共6页
目的探讨miR-101和RanBP9在隐睾睾丸组织中的表达情况及其可能作用。方法取60只雄性6周龄ICR小鼠,随机选取30只进行左侧隐睾造模手术,视为隐睾组(Cry组),右侧睾丸位于阴囊内,视为自身对照组(SC组);另外30只进行假手术后睾丸仍位于阴囊内... 目的探讨miR-101和RanBP9在隐睾睾丸组织中的表达情况及其可能作用。方法取60只雄性6周龄ICR小鼠,随机选取30只进行左侧隐睾造模手术,视为隐睾组(Cry组),右侧睾丸位于阴囊内,视为自身对照组(SC组);另外30只进行假手术后睾丸仍位于阴囊内,视为假手术组(Con组)。小鼠根据手术后时间随机分为5组,每组包含6只隐睾组小鼠和6只假手术组小鼠,分别于术后3、7、14、21、28 d处死小鼠。称量小鼠体质量、睾丸重量,睾丸进行HE染色观察组织形态学改变,qRT-PCR检测miR-101表达水平,Western blot、qRT-PCR和免疫荧光用于检测RanBP9的表达变化情况。结果与假手术组及自身右侧睾丸对照相比,隐睾组小鼠左侧睾丸在术后7 d出现结构损坏,且睾丸体质量比出现明显下降( P <0.05);miR-101在隐睾中表达增加而RanBP9的表达减少( P <0.05)。结论隐睾中miR-101表达增加而RanBP9表达量减少,这可能是隐睾中精子发生障碍的原因之一。 展开更多
关键词 miRNA-101 RanBP9 隐睾 男性不育
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前列腺盆腔综合征的理论进展和实践运用 被引量:4
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作者 梁朝朝 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第4期523-527,共5页
慢性前列腺炎是泌尿男科常见病之一。美国国立卫生研究院(NIH)前列腺炎分型中的Ⅲ型前列腺炎即慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的概念不能反映疾病本质,如病因与发病机制不明确、临床表现多样、诊断依据不足等;Ⅲ型前列腺炎的概念未将... 慢性前列腺炎是泌尿男科常见病之一。美国国立卫生研究院(NIH)前列腺炎分型中的Ⅲ型前列腺炎即慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的概念不能反映疾病本质,如病因与发病机制不明确、临床表现多样、诊断依据不足等;Ⅲ型前列腺炎的概念未将盆底和下尿路视为功能性整体。因此,中国慢性前列腺炎诊断标准与疗效评判协作组建议将Ⅲ型前列腺炎更名为前列腺盆腔综合征,探索建立以症状为核心的诊断及疗效评价标准,以能反映疾病本质、符合Ⅲ型前列腺炎患者以改善症状和提高生活质量为主的治疗目标。新理论的提出及多中心临床试验的开展将有助于泌尿外科医师加深对前列腺盆腔综合征的认识及理解,更有助于对该综合征的正确诊断和治疗。 展开更多
关键词 Ⅲ型前列腺炎 前列腺盆腔综合征 诊断
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中性-淋巴细胞比和预后营养指数在膀胱癌根治术患者预后评估中的价值 被引量:17
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作者 汪赛 梁朝朝 +3 位作者 周骏 施浩强 杨诚 王建忠 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期640-646,共7页
目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和预后营养指数(PNI)在膀胱癌根治术患者预后中的相关性。方法回顾性分析膀胱癌根治术患者213例,根据术前NLR和PNI,将其分为低NLR组(NLR<2.89)和高NLR组(NLR≥2.89),低PNI组(PNI<46.08)和高... 目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和预后营养指数(PNI)在膀胱癌根治术患者预后中的相关性。方法回顾性分析膀胱癌根治术患者213例,根据术前NLR和PNI,将其分为低NLR组(NLR<2.89)和高NLR组(NLR≥2.89),低PNI组(PNI<46.08)和高PNI组(PNI≥46.08)。分析预后相关因素:NLR、PNI、年龄、性别、组织学分级、病理T分期、肿瘤大小、肿瘤数目等。结果多因素分析结果显示:NLR(P=0.023)、PNI(P=0.038)、肾积水(P=0.014)、组织学分级(P=0.043)、病理T分期(P<0.001)是影响患者无进展生存期(PFS)的独立危险因素。NLR(P=0.008)、PNI(P=0.012)、年龄(P=0.029)、肾积水(P=0.002)、组织学分级(P=0.009)、病理T分期(P<0.001)是影响患者总生存期(OS)的独立危险因素;NLR≥2.89及PNI<46.08预示膀胱癌根治术患者的PFS和OS较短。结论 NLR和PNI是膀胱癌根治术患者预后的独立危险因素,高NLR和低PNI与患者预后不良相关。 展开更多
关键词 膀胱癌 膀胱根治性切除术 中性-淋巴细胞比值 预后营养指数 预后
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miR-146b-5p靶向E3泛素蛋白连接酶促进高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化
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作者 吴锦 李嘉嘉 +1 位作者 王笑薇 王娟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第7期1087-1093,共7页
目的探讨miR-146b-5p与E3泛素蛋白连接酶(ZNRF3)对高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化(EMT)进程的影响及作用机制。方法正常培养的小鼠为对照组,采用4.25%葡萄糖透析液和0.1 mg/kg的脂多糖诱导腹膜纤维化小鼠模型,收集小鼠腹膜组织... 目的探讨miR-146b-5p与E3泛素蛋白连接酶(ZNRF3)对高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化(EMT)进程的影响及作用机制。方法正常培养的小鼠为对照组,采用4.25%葡萄糖透析液和0.1 mg/kg的脂多糖诱导腹膜纤维化小鼠模型,收集小鼠腹膜组织,Masson染色观察腹膜组织胶原纤维变化,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(COL I)表达。Western blot检测腹膜组织上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、α-SMA和COL I表达。qRT-PCR检测腹膜组织中miR-146b-5p和ZNRF3表达。双荧光素酶报告基因检测验证miR-146b-5p和ZNRF3靶向关系。分离对照组小鼠腹膜间皮细胞,高糖诱导构建小鼠腹膜间皮细胞纤维化模型,将细胞分为对照组、模型组、mimic-NC组、miR-146b-5p-mimic组和miR-146b-5p-inhibitor组。Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测EMT相关蛋白表达。结果与对照组小鼠比较,模型组小鼠腹膜组织增厚,胶原纤维增多,α-SMA和COL I表达增加(P<0.05),miR-146b-5p表达升高(P<0.05),E-cadherin和ZNRF3表达降低(P<0.05)。miR-146b-5p靶向负调控ZNRF3表达。细胞水平检测结果显示,与对照组比较,模型组和mimic-NC组小鼠腹膜间皮细胞迁移和侵袭细胞数增多(P<0.05),E-cadherin表达降低(P<0.05),波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达升高(P<0.05)。与模型组比较,miR-146b-5p-mimic组小鼠腹膜间皮细胞变化趋势更为显著,miR-146b-5p-inhibitor组细胞EMT进程受到抑制。结论miR-146b-5p可靶向ZNRF3基因促进高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞EMT进程。 展开更多
关键词 miR-146b-5p E3泛素蛋白连接酶 腹膜透析 上皮间质转化 侵袭 迁移
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