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肠道病毒71型河南分离株2株全基因组序列分析 被引量:1
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作者 冷弘 卢欣 +6 位作者 刘慧涛 马云云 王媛媛 马晶 郭茂峰 李敏 赵国强 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第2期170-174,共5页
目的:了解2011年河南洛阳和南阳地区流行的肠道病毒71型(EV71)基因特征。方法:分离洛阳和南阳地区EV71病毒各一株,分别进行全基因测序和基因进化分析。结果:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011的VP1区序列在进化树上均属于C4亚型,与国... 目的:了解2011年河南洛阳和南阳地区流行的肠道病毒71型(EV71)基因特征。方法:分离洛阳和南阳地区EV71病毒各一株,分别进行全基因测序和基因进化分析。结果:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011的VP1区序列在进化树上均属于C4亚型,与国内流行株都具有较高同源性,与2008年广东流行株亲缘关系最近。这2株全基因核苷酸序列同源性为99.3%,氨基酸序列同源性为97.6%,并且氨基酸均没有发生明显改变。结论:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011属于C4亚型,与我省及我国既往流行株相比,未发生大的变异。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 手足口病 同源性分析 河南
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小儿细菌感染性腹泻主要菌群变迁分析 被引量:6
2
作者 靳静 桂林艳 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第3期590-592,共3页
关键词 小儿 腹泻 细菌感染 菌群变迁
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郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19感染情况测定 被引量:2
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作者 靳静 冷弘 +2 位作者 徐慧丹 刘全离 赵国强 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第3期383-384,共2页
目的:了解郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19的感染情况。方法:采用ELISA和PCR方法分别检测郑州市237例正常孕妇及29例不明原因流产或死胎孕妇血清中B19IgG、B19IgM和B19DNA表达情况。结果:29例流产或死胎孕妇B19IgG、B19IgM和B19DNA... 目的:了解郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19的感染情况。方法:采用ELISA和PCR方法分别检测郑州市237例正常孕妇及29例不明原因流产或死胎孕妇血清中B19IgG、B19IgM和B19DNA表达情况。结果:29例流产或死胎孕妇B19IgG、B19IgM和B19DNA阳性率分别为51.7%(15/29)、6.9%(2/29)和13.8%(4/29),237例正常孕妇B19IgG、B19IgM和B19DNA阳性率分别30.4%(72/237)、1.3%(3/237)和2.5%(6/237),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:郑州市孕妇中存在人微小病毒B19的感染,可能导致不明原因流产或死胎。 展开更多
关键词 人微小病毒B19 孕妇 流产 死胎 郑州市
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靶向HIV-1启动子的药物筛选系统的建立 被引量:1
4
作者 郭文涛 马云云 +4 位作者 刘慧涛 李敏 靳静 马晶 赵国强 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第1期94-97,共4页
目的:建立靶向HIV-1启动子的药物筛选系统。方法:将HIV-1启动子核心序列克隆入荧光素酶报告基因载体pGL4.17中,构建重组质粒pGL4.17-HIV-1P并转染H9细胞;分别用杜仲、黄芩、苦参及双黄连灌胃大鼠后采血,将含药血清分别作用于转染的H9细... 目的:建立靶向HIV-1启动子的药物筛选系统。方法:将HIV-1启动子核心序列克隆入荧光素酶报告基因载体pGL4.17中,构建重组质粒pGL4.17-HIV-1P并转染H9细胞;分别用杜仲、黄芩、苦参及双黄连灌胃大鼠后采血,将含药血清分别作用于转染的H9细胞,检测H9细胞荧光素酶活性。以灌胃生理盐水的大鼠血清处理的转染细胞为对照,以转染空质粒pGL4.17的H9细胞为空白对照。结果:6组荧光素酶活性差异有统计学意义(F=1820.333,P<0.001)。双黄连组转染细胞荧光素酶活性降低(P<0.05),杜仲、黄芩及苦参组转染细胞荧光素酶活性增高(P<0.05)。结论:初步构建了靶向HIV-1启动子的药物筛选系统,并推测双黄连具有抗HIV-1作用。 展开更多
关键词 HIV-1启动子 药物筛选 中药 报告基因载体
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含绿色荧光蛋白报告基因pUC18筛选载体的构建
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作者 王进 李付广 +1 位作者 李倩如 杜英 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2002年第5期621-624,共4页
目的 :以绿色荧光蛋白 (GFP)基因为报告基因 ,将GFP基因克隆入pUC1 8建立大通量的筛选载体。方法 :用PCR方法扩增目的DNA片段 ,碱裂解法小量制备质粒DNA ,用限制性内切酶消化质粒DNA ,用低熔点琼脂糖凝胶分离和纯化大片段DNA ,GFP基因与... 目的 :以绿色荧光蛋白 (GFP)基因为报告基因 ,将GFP基因克隆入pUC1 8建立大通量的筛选载体。方法 :用PCR方法扩增目的DNA片段 ,碱裂解法小量制备质粒DNA ,用限制性内切酶消化质粒DNA ,用低熔点琼脂糖凝胶分离和纯化大片段DNA ,GFP基因与 pUC1 8连接 ,用氯化钙法转化感受态细胞 ,DNA序列测定 ,琼脂糖凝胶电泳 ,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果 :pUC1 8 atg GFP载体意外表达GFP蛋白 ,新合成的上游引物与原下游引物扩增GFP基因 ,克隆入 pUC1 8构建 pUC1 8 GFP载体 ,通过PCR、酶切鉴定和DNA序列分析 ,GFP基因的读码框架与原设计方案完全一致 ,该载体自身无GFP表达。结论 :筛选载体内的GFP基因与克隆基因的融合基因可表达一种融合蛋白 ,在琼脂平板上含有该融合基因的克隆在紫外线激发下可发绿色荧光 ,因此 ,可表达基因能被挑选出来。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 载体 PUC18 GFP
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复方大青叶注射液对体外培养HT-H9细胞CXCR4启动子活性的影响 被引量:1
6
作者 冷弘 刘慧涛 +4 位作者 臧玉翠 马云云 李敏 靳静 赵国强 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第5期681-684,共4页
目的:探讨复方大青叶注射液对体外培养HT-H9细胞中CXCR4启动子活性的作用。方法:克隆人CX-CR4启动子序列,构建报告载体pGL4.17-CXCR4;转染HT-H9细胞株,G418筛选后分组,高、低剂量实验组分别用200、100mg/L大青液注射液处理,设注射水对... 目的:探讨复方大青叶注射液对体外培养HT-H9细胞中CXCR4启动子活性的作用。方法:克隆人CX-CR4启动子序列,构建报告载体pGL4.17-CXCR4;转染HT-H9细胞株,G418筛选后分组,高、低剂量实验组分别用200、100mg/L大青液注射液处理,设注射水对照组、空白对照组和未转染对照组;各组处理24h后,进行荧光素酶活性检测。结果:成功构建含人CXCR4启动子序列的报告载体PGL4.17-CXCR4;5组荧光素酶活性比较差异有统计学意义(F=135.510,P<0.001)。复方大青叶注射液高剂量组与低剂量组荧光素酶活性均明显低于对照组(P<0.01)。结论:复方大青叶注射液能够有效抑制体外培养HT-H9细胞中CXCR4启动子活性。 展开更多
关键词 复方大青叶注射液 CXCR4启动子 艾滋病 HT-H9细胞
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