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堆型艾美耳球虫子孢子和鸡十二指肠上皮细胞的共同抗原的研究被引量：1: 1; 作者王承民魏刚才 +4 位作者秦建华何宏轩刘丽艳齐永华吴艳云《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期877-880,共4页; 以抗堆型艾美耳球虫子孢子的单抗EASP-3G3作为工具,对鸡各段消化道上皮细胞切片和子孢子进行免疫组化染色,并利用蛋白质印迹技术来检测单抗所识别子孢子可溶性抗原的分子量,来确定子孢子和十二指肠上皮细胞之间是否存在共同抗原.结果表... 展开更多; 关键词鸡堆型艾美耳球虫子孢子十二指肠上皮细胞共同表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗堆型艾美耳球虫子孢子单链抗体的构建及表达被引量：2: 2; 作者王承民初冬 +7 位作者秦建华刘丽艳魏刚才谢红兵齐永华王三虎吴艳云何宏轩《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期207-211,共5页; 应用RT-PCR技术,从稳定分泌抗堆型艾美耳球虫子孢子抗原的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞Easp-3G3中扩增出抗体VH和VL基因,通过在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser)3,体外构建抗堆型艾美耳球虫的单链抗体基因,并将其克隆至表达载... 展开更多; 关键词堆型艾美耳球虫子孢子单链抗体基因克隆表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

生物技术在鸡球虫免疫研究中的应用被引量：2: 3; 作者王承民何宏轩 +4 位作者秦建华齐永华陈桂香杭柏林郑素玲《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第9期1758-1761,共4页; 就近几年开发的球虫疫苗和球虫免疫中所涉及的分子细胞生物学、分子免疫学和功能基因组学的相关技术进行了阐述。; 关键词鸡史美耳球虫球虫病疫苗生物学技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

乳汁中RNA提取方法的建立被引量：2: 4; 作者乔新安朱彦彩 +4 位作者范沛都军霞贾海丽韩立强杨国宇《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第1期77-79,共3页; 用牛初乳作为试验材料,进行乳汁体细胞的提取及RNA的提取与扩增。结果显示:牛初乳中含有大量的体细胞(SCC约为20万/ml,活力约为60%),从体细胞中提取RNA,所提取的RNA完整性和纯度可以用来合成cDNA,管家基因GAPDH扩增条带正确,表明可以用... 展开更多; 关键词牛初乳乳汁体细胞 RNA提取; 在线阅读下载PDF 职称材料

绵羊黏膜趋化因子CCL28基因的克隆、序列分析与原核表达: 5; 作者乔新安李宏基 +4 位作者王月影朱彦彩韩立强杨国宇王艳玲《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期842-847,共6页; 利用同源序列克隆原理设计1对克隆引物,从绵羊结肠黏膜组织提取mRNA,通过RT-PCR获得CCL28基因,将PCR产物克隆、测序,并进行序列分析;再根据克隆的序列设计1对表达引物,用PCR法从重组克隆载体中扩增出含BamHⅠ/XhoⅠ酶切位点的CCL28片段... 展开更多; 关键词绵羊黏膜相关上皮趋化因子分子克隆序列分析原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

绵羊Granulysin在大肠杆菌中的表达与鉴定: 6; 作者杨国宇乔新安 +4 位作者朱彦彩贾海丽王月影韩立强王艳玲《江西农业学报》 CAS 2007年第11期61-63,共3页; 根据GenBank中公布的绵羊Granulysin基因序列设计引物,用PCR法从重组质粒中扩增出含BamHI/XhoI酶切位点的Granulysin片段,双酶切后克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX-Granulysin,转化宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导进... 展开更多; 关键词绵羊颗粒溶解素原核表达鉴定大肠杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

绵羊鸟苷素基因的克隆与序列分析: 7; 作者乔新安王艳玲 +3 位作者杨国宇朱彦彩范沛都军霞《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第4期23-26,共4页; 基于电子延伸序列．本试验克隆并分析了绵羊鸟苷素基因．从绵羊十二指肠黏膜组织中提取总RNA·利用设计的引物进行RT-PCR扩增，PCR产物与pMD19-T载体连接后转化到E．coli JM109感受态细胞，检测阳性克隆并测序．结果表明：克隆的绵... 展开更多; 关键词绵羊鸟苷素克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名堆型艾美耳球虫子孢子和鸡十二指肠上皮细胞的共同抗原的研究被引量：1: 1; 作者王承民魏刚才秦建华何宏轩刘丽艳齐永华吴艳云; 机构河南科技学院细胞工程重点实验室河北农业大学动物科技学院中国科学院动物研究所; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期877-880,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30571394); 文摘以抗堆型艾美耳球虫子孢子的单抗EASP-3G3作为工具,对鸡各段消化道上皮细胞切片和子孢子进行免疫组化染色,并利用蛋白质印迹技术来检测单抗所识别子孢子可溶性抗原的分子量,来确定子孢子和十二指肠上皮细胞之间是否存在共同抗原.结果表明单抗只与十二指肠上皮细胞发生反应,而与其他肠段无染色反应.而且单抗所识别的可溶性抗原分子量为35～48 ku.抗子孢子的单抗同时与十二指肠上皮细胞和子孢子反应,而不与其他肠段反应,证明堆型艾美耳球虫寄生的位点特异性与十二指肠上皮细胞表面的某种抗原分子有内在的关系.; 关键词鸡堆型艾美耳球虫子孢子十二指肠上皮细胞共同表位; Keywords chicken Eirneria acervulina sporozoites duodenum epithelium common epitopes; 分类号 S852.723 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗堆型艾美耳球虫子孢子单链抗体的构建及表达被引量：2: 2; 作者王承民初冬秦建华刘丽艳魏刚才谢红兵齐永华王三虎吴艳云何宏轩; 机构河南科技学院细胞工程重点实验室国家林业局野生动物疫源疫病监测总站河北农业大学动物科技学院中国科学院动物研究所国家野生动物疫病研究中心; 出处《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期207-211,共5页; 基金河南科技学院重点基金资助项目(200313); 文摘应用RT-PCR技术,从稳定分泌抗堆型艾美耳球虫子孢子抗原的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞Easp-3G3中扩增出抗体VH和VL基因,通过在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser)3,体外构建抗堆型艾美耳球虫的单链抗体基因,并将其克隆至表达载体pET28a(+)载体中进行表达,用Ni-NTA的金属亲和层析法进行纯化,通过SDS-PAGE和ELISA测定其纯度和生物学活性.电泳结果分析表明重组蛋白的相对分子量为32kDa,纯度为94%;ELISA反应结果证明该单链抗体保持了单克隆抗体的生物学特性,并能与堆型艾美耳球虫子孢子抗原发生特异性反应.; 关键词堆型艾美耳球虫子孢子单链抗体基因克隆表达; Keywords Eimeria acervulina sporozoite ScFv gene cloning expression; 分类号 S852.7 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名生物技术在鸡球虫免疫研究中的应用被引量：2: 3; 作者王承民何宏轩秦建华齐永华陈桂香杭柏林郑素玲; 机构河南科技学院细胞工程重点实验室中国科学院动物研究所国家野生动物疫病研究中心河北农业大学动物科技学院; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第9期1758-1761,共4页; 基金河南科技学院重点资助项目(0313); 文摘就近几年开发的球虫疫苗和球虫免疫中所涉及的分子细胞生物学、分子免疫学和功能基因组学的相关技术进行了阐述。; 关键词鸡史美耳球虫球虫病疫苗生物学技术; Keywords Chicken Eimeria Coccidia Vaccine Biotechnology; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乳汁中RNA提取方法的建立被引量：2: 4; 作者乔新安朱彦彩范沛都军霞贾海丽韩立强杨国宇; 机构河南农业大学动物生理生化实验室河南科技学院细胞工程重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第1期77-79,共3页; 基金河南省重点科技攻关项目(0523010500); 文摘用牛初乳作为试验材料,进行乳汁体细胞的提取及RNA的提取与扩增。结果显示:牛初乳中含有大量的体细胞(SCC约为20万/ml,活力约为60%),从体细胞中提取RNA,所提取的RNA完整性和纯度可以用来合成cDNA,管家基因GAPDH扩增条带正确,表明可以用合成的cDNA作为模板进行其它基因的扩增,为奶牛在基因工程方面的研究提供分子生物学技术平台。; 关键词牛初乳乳汁体细胞 RNA提取; Keywords cow colostrums somatic cell from milk the extraction of RNA; 分类号 S879.1 [农业科学—畜牧兽医]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绵羊黏膜趋化因子CCL28基因的克隆、序列分析与原核表达: 5; 作者乔新安李宏基王月影朱彦彩韩立强杨国宇王艳玲; 机构河南农业大学动物生理生化实验室河南科技学院细胞工程重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期842-847,共6页; 基金河南省重点科技攻关项目(0523010500); 文摘利用同源序列克隆原理设计1对克隆引物,从绵羊结肠黏膜组织提取mRNA,通过RT-PCR获得CCL28基因,将PCR产物克隆、测序,并进行序列分析;再根据克隆的序列设计1对表达引物,用PCR法从重组克隆载体中扩增出含BamHⅠ/XhoⅠ酶切位点的CCL28片段,双酶切后亚克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达载体pGEX-CCL28,转化宿主菌E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导进行表达,SDS-PAGE鉴定。克隆的绵羊CCL28基因包含完整的开放阅读框,克隆片段长444 bp,ORF为387 bp,编码129个氨基酸,与人、小鼠、猪、牛该基因的同源性分别为76.4%、61.4%、84.3%和92.9%,推测的氨基酸序列与人、小鼠、猪、牛的同源性分别为76%、63%、84%和93%,表达的融合蛋白分子量约为39 ku,并以包涵体形式存在。为下一步研究绵羊CCL28的生物学功能奠定基础。; 关键词绵羊黏膜相关上皮趋化因子分子克隆序列分析原核表达; Keywords sheep CCL28 molecular cloning sequence analysis prokaryotic expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绵羊Granulysin在大肠杆菌中的表达与鉴定: 6; 作者杨国宇乔新安朱彦彩贾海丽王月影韩立强王艳玲; 机构河南农业大学动物生理生化实验室河南科技学院细胞工程重点实验室; 出处《江西农业学报》 CAS 2007年第11期61-63,共3页; 基金河南省重点科技攻关项目(编号:0523010500); 文摘根据GenBank中公布的绵羊Granulysin基因序列设计引物,用PCR法从重组质粒中扩增出含BamHI/XhoI酶切位点的Granulysin片段,双酶切后克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX-Granulysin,转化宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导进行表达,SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白分子量约为41 kDa,并以包含体形式存在。; 关键词绵羊颗粒溶解素原核表达鉴定大肠杆菌; Keywords Sheep Granulysin Prokaryotic expression Identification E. coli; 分类号 S826 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绵羊鸟苷素基因的克隆与序列分析: 7; 作者乔新安王艳玲杨国宇朱彦彩范沛都军霞; 机构河南农业大学动物生理生化实验室河南科技学院细胞工程重点实验室; 出处《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第4期23-26,共4页; 基金河南省重点科技攻关项目(编号:0523010500)资助; 文摘基于电子延伸序列．本试验克隆并分析了绵羊鸟苷素基因．从绵羊十二指肠黏膜组织中提取总RNA·利用设计的引物进行RT-PCR扩增，PCR产物与pMD19-T载体连接后转化到E．coli JM109感受态细胞，检测阳性克隆并测序．结果表明：克隆的绵羊鸟苷素基因长341bp，编码109个氨基酸．与人、豚鼠、小鼠和牛的同源性分别为77％、75％、47％和94％．推测的氨基酸序列信号肽为l～16aa．整个氨基酸构成一个模域．编码鸟苷素前体蛋白．; 关键词绵羊鸟苷素克隆序列分析; Keywords sheep guanylin molecular cloning sequence analysis; 分类号 S826.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	堆型艾美耳球虫子孢子和鸡十二指肠上皮细胞的共同抗原的研究	王承民魏刚才秦建华何宏轩刘丽艳齐永华吴艳云	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗堆型艾美耳球虫子孢子单链抗体的构建及表达	王承民初冬秦建华刘丽艳魏刚才谢红兵齐永华王三虎吴艳云何宏轩	《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	生物技术在鸡球虫免疫研究中的应用	王承民何宏轩秦建华齐永华陈桂香杭柏林郑素玲	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	乳汁中RNA提取方法的建立	乔新安朱彦彩范沛都军霞贾海丽韩立强杨国宇	《中国畜牧兽医》 CAS	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	绵羊黏膜趋化因子CCL28基因的克隆、序列分析与原核表达	乔新安李宏基王月影朱彦彩韩立强杨国宇王艳玲	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	绵羊Granulysin在大肠杆菌中的表达与鉴定	杨国宇乔新安朱彦彩贾海丽王月影韩立强王艳玲	《江西农业学报》 CAS	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	绵羊鸟苷素基因的克隆与序列分析	乔新安王艳玲杨国宇朱彦彩范沛都军霞	《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料