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幽门螺杆菌抗原基因ureB在乳酸菌中的克隆表达与免疫反应性研究
被引量：
3
1
作者
张小娟
张荣光
+1 位作者
段广才
范青堂
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期925-928,932,共5页
目的为了开发幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)口服疫苗,将Hp尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中进行表达,并研究其免疫反应性。方法 PCR扩增Hp MEL-HP27菌株ureB基因(基因号:FJ436980),将其克隆入大肠杆菌-乳酸乳球菌穿...
目的为了开发幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)口服疫苗,将Hp尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中进行表达,并研究其免疫反应性。方法 PCR扩增Hp MEL-HP27菌株ureB基因(基因号:FJ436980),将其克隆入大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭质粒pNZ8110中并转化乳酸乳球菌NZ3900;采用正交试验确定目的蛋白表达的适宜条件;应用western-blot鉴定其免疫反应性。结果成功扩增了Hp MEL-HP27菌株ureB基因,构建了ureB基因的乳酸菌NICE(Nisin-controlled expression)原核表达系统;UreB蛋白适宜的表达条件为:在ureB重组菌生长至对数生长前期(OD600≈0.3～0.4)加入终浓度为40ng/mL的nisin,诱导表达5h,可溶性UreB蛋白表达量最高,可达27.26μg/mL培养基。可溶性UreB蛋白的表达占上清蛋白的比例最高可达20.19%;Western-blot结果显示乳酸乳球菌表达的UreB抗原蛋白具有良好的免疫反应性。结论结果提示应用乳酸乳球菌构建幽门螺杆菌食品级疫苗可能具有较好前景。
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关键词
幽门螺杆菌
乳酸乳球菌
NICE
UREB
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题名
幽门螺杆菌抗原基因ureB在乳酸菌中的克隆表达与免疫反应性研究
被引量：
3
1
作者
张小娟
张荣光
段广才
范青堂
机构
河南科技大学病原生物学教研室
郑州
大学
河南
省分子医学重点学科开放实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期925-928,932,共5页
文摘
目的为了开发幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)口服疫苗,将Hp尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中进行表达,并研究其免疫反应性。方法 PCR扩增Hp MEL-HP27菌株ureB基因(基因号:FJ436980),将其克隆入大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭质粒pNZ8110中并转化乳酸乳球菌NZ3900;采用正交试验确定目的蛋白表达的适宜条件;应用western-blot鉴定其免疫反应性。结果成功扩增了Hp MEL-HP27菌株ureB基因,构建了ureB基因的乳酸菌NICE(Nisin-controlled expression)原核表达系统;UreB蛋白适宜的表达条件为:在ureB重组菌生长至对数生长前期(OD600≈0.3～0.4)加入终浓度为40ng/mL的nisin,诱导表达5h,可溶性UreB蛋白表达量最高,可达27.26μg/mL培养基。可溶性UreB蛋白的表达占上清蛋白的比例最高可达20.19%;Western-blot结果显示乳酸乳球菌表达的UreB抗原蛋白具有良好的免疫反应性。结论结果提示应用乳酸乳球菌构建幽门螺杆菌食品级疫苗可能具有较好前景。
关键词
幽门螺杆菌
乳酸乳球菌
NICE
UREB
Keywords
Helicobacter pylori
Lactococcus lactis
NICE
UreB
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
幽门螺杆菌抗原基因ureB在乳酸菌中的克隆表达与免疫反应性研究
张小娟
张荣光
段广才
范青堂
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
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