检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

溶血性曼氏杆菌OmpA的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立: 1; 作者尚珂高远集 +9 位作者刘畅代静蕾丁梦豪聂孟川王怡轩陈松彪贾艳艳郭荣显丁轲余祖华《中国预防兽医学报》北大核心 2025年第4期376-383,共8页; 为建立一种快速、高效、准确的溶血性曼氏杆菌(MH)抗体的检测方法,本研究采用生物信息学软件对MH外膜蛋白A(OmpA)的理化性质和亲/疏水性、跨膜结构和信号肽进行分析后,利用PCR扩增MH OmpA基因,构建重组表达质粒pET-32a-OmpA,经生物公司... 展开更多; 关键词溶血性曼氏杆菌5型外膜蛋白A 原核表达小鼠间接ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

mRNA疫苗-分子设计、递呈及免疫活化的分子机制: 2; 作者陈慧敏刘飞飞 +2 位作者尚珂张春杰陈松彪《中国人兽共患病学报》北大核心 2025年第2期186-192,共7页; 疫苗免疫是防控传染病最有效且性价比最优的途径。2019年末新型冠状病毒肺炎(COVID-19,简称新冠)爆发以来,第三代颠覆性创新-mRNA核酸疫苗在阻击新冠道路上大放异彩。mRNA疫苗突破了传统疫苗的免疫激活模式,创新性地利用人体自身细胞生... 展开更多; 关键词 mRNA疫苗分子设计递呈免疫活化动物传染病; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛病毒性腹泻病毒1型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立与应用: 3; 作者刘飞飞杨澳飞 +7 位作者贾东鹭韩新雨陈慧敏陈建魏颖丁轲张春杰陈松彪《中国预防兽医学报》北大核心 2025年第4期363-369,共7页; 为建立牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,本研究参考GenBank中的不同BVDV-1序列,设计并合成Npro基因保守区域特异性引物,以重组质粒标准品作为模板对反应体系进行优化,初步建立一种BVDV-1特异性SYBR GreenⅠ... 展开更多; 关键词牛病毒性腹泻病毒1型 Npro基因荧光定量RT-PCR 应用; 在线阅读下载PDF 职称材料

mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响被引量：1: 4; 作者余祖华高梦茹 +4 位作者何雷魏颖陈建陈松彪丁轲《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3678-3687,共10页; 旨在研究马立克病病毒(Marek′s disease virus,MDV)编码的mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响,将mdv1-miR-M4-5p模拟物、抑制物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞后48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中mdv1-miR-M4-5... 展开更多; 关键词 mdv1-miR-M4-5p MDV 增殖凋亡 TGF-β1/Smad2; 在线阅读下载PDF 职称材料

细菌外膜囊泡结构、分泌特性及致病机制被引量：1: 5; 作者高远集刘畅 +9 位作者陈淼陈松彪张俊峰李静贾艳艳廖成水郭荣显丁轲余祖华尚珂《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期971-983,共13页; 外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)是革兰阴性菌在生长过程中释放到胞外的囊泡状结构,被认为是细菌的“远程武器”,其功能主要是攻击宿主组织并帮助细菌定植、损害宿主细胞功能、调节宿主的防御,因此OMVs在细菌致病过程中发挥着... 展开更多; 关键词细菌外膜囊泡结构分泌特性致病机制; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名溶血性曼氏杆菌OmpA的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立: 1; 作者尚珂高远集刘畅代静蕾丁梦豪聂孟川王怡轩陈松彪贾艳艳郭荣显丁轲余祖华; 机构河南科技大学动物科技学院/功能微生物与畜禽健康实验室洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》北大核心 2025年第4期376-383,共8页; 基金国家自然科学基金项目(32402897) 河南省科技攻关项目(232102110102) 河南省自然科学基金(242300420469)。; 文摘为建立一种快速、高效、准确的溶血性曼氏杆菌(MH)抗体的检测方法,本研究采用生物信息学软件对MH外膜蛋白A(OmpA)的理化性质和亲/疏水性、跨膜结构和信号肽进行分析后,利用PCR扩增MH OmpA基因,构建重组表达质粒pET-32a-OmpA,经生物公司测序及酶切鉴定正确后转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,经IPTG诱导重组OmpA蛋白(r OmpA)的表达,SDS-PAGE检测结果显示,在约57 ku处出现目的条带,且rOmpA主要以为包涵体形式表达。rOmpA表达产物经镍柱亲和层析法纯化后利用western blot鉴定,结果显示,在57.03 ku处出现特异性条带,表明r OmpA可与MH阳性血清产生良好的反应原性。以rOmpA作为包被抗原,采用方阵法通过对各反应条件的优化,初步建立MH抗体的间接ELISA检测方法。利用该方法检测多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、MH-1、MH CVCC4091(A5型)以及MH-2(A1型)阳性血清,结果显示,除MH-1、CVCC4091以及MH-2检测为阳性外,其他细菌阳性血清均为阴性结果,特异性较强。利用该间接ELISA方法检测2倍倍比稀释的待检阳性血清(1:8000~1:512000),结果显示,阳性血清稀释至1:512000时仍为阳性,敏感性较高。将同一批次和不同批次纯化的r OmpA包被ELISA板,按照该ELISA方法检测5份MH阳性血清,分析该方法的重复性。结果显示,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明该方法重复性好。采用建立的间接ELISA方法和间接血凝试验(IHA),对82份临床动物(羊、兔、鼠)血清样品检测,结果显示,间接ELISA检测方法的阳性率为47.6%,阴性率为52.4%;IHA检测方法的阳性率为45.1%,阴性率为54.9%。二者的阳性符合率为94.9%,阴性符合率为95.6%,总符合率为99.3%。另外,从鼠体内检出MH阳性率最高为75.0%,表明本研究建立的间接ELISA方法可以用于临床样品的检测。该检测方法的建立为临床MH抗体的检测提供可靠的技术手段,为MH的流行病学调查等奠定了基础。; 关键词溶血性曼氏杆菌5型外膜蛋白A 原核表达小鼠间接ELISA; Keywords Mannheimia haemolytica A5 OmpA prokaryotic expression mouse indirect ELISA; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名mRNA疫苗-分子设计、递呈及免疫活化的分子机制: 2; 作者陈慧敏刘飞飞尚珂张春杰陈松彪; 机构河南科技大学动物科技学院/功能微生物与畜禽健康实验室洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室; 出处《中国人兽共患病学报》北大核心 2025年第2期186-192,共7页; 基金河南省科技攻关项目(No.252102111004) 河南省自然科学基金(No.232300421263)联合资助。; 文摘疫苗免疫是防控传染病最有效且性价比最优的途径。2019年末新型冠状病毒肺炎(COVID-19,简称新冠)爆发以来,第三代颠覆性创新-mRNA核酸疫苗在阻击新冠道路上大放异彩。mRNA疫苗突破了传统疫苗的免疫激活模式,创新性地利用人体自身细胞生产抗原,以此激活双重特异性免疫,形成免疫记忆,提供更持久的特异性免疫。相较于传统第一代(灭活疫苗)和第二代疫苗(基因工程疫苗),mRNA疫苗借助其平台化优势,在重大突发性传染病防控中发挥重要作用,成为全球首个进入临床的新冠疫苗,是疫苗研发领域风向标。本文主要针对mRNA疫苗分子设计、递呈以及其激活机体免疫应答的分子机制进行综述,旨在为后续新型mRNA疫苗在动物传染病防控中的应用提供理论依据。; 关键词 mRNA疫苗分子设计递呈免疫活化动物传染病; Keywords mRNA vaccine molecular design delivery immune activation animal infectious diseases; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛病毒性腹泻病毒1型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立与应用: 3; 作者刘飞飞杨澳飞贾东鹭韩新雨陈慧敏陈建魏颖丁轲张春杰陈松彪; 机构河南科技大学动物科技学院/功能微生物与畜禽健康实验室洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》北大核心 2025年第4期363-369,共7页; 基金河南省科技攻关(252102111004) 河南省省级科技研发计划联合基金(232103810029) +1 种基金河南科技大学研究生创新基金资助项目(CXJJ-2023-KJ05)。; 文摘为建立牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,本研究参考GenBank中的不同BVDV-1序列,设计并合成Npro基因保守区域特异性引物,以重组质粒标准品作为模板对反应体系进行优化,初步建立一种BVDV-1特异性SYBR GreenⅠRT-qPCR方法,结果显示,RT-qPCR方法的最适退火温度为55℃,最佳引物终浓度为0.4μmol/L;质粒标准品浓度在5.46×10^(1)拷贝/μL~5.46×10^(7)拷贝/μL之间与各自的Ct值具有良好的线性关系,线性方程为:y=-3.2011x+33.6,R^(2)=0.9975,熔解曲线为单一峰值;以BVDV-1、牛病毒性腹泻病毒2型、牛病毒性腹泻病毒3型、边界病毒、猪瘟病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒等的RNA反转录所得cDNA以及大肠杆菌和鼠伤寒沙门菌总DNA为模板,采用本研究建立的RT-qPCR方法检测,评估该方法的特异性;分别以10倍倍比稀释(10^(1)~10^(9))的pMD19-T-Npro重组质粒标准品作为模板,利用本研究建立的方法与普通RT-PCR方法检测,比较所建方法的敏感性;以5个不同浓度的重组质粒标准品pMD19-T-Npro作为模板,利用RT-qPCR方法分别于同一时间和不同时间分别进行批内和批间重复性试验,评估该方法的重复性。特异性试验结果显示,该方法仅对BVDV-1有特异性扩增曲线,牛病毒性腹泻病毒2型、牛病毒性腹泻病毒3型、边界病毒、猪瘟病毒、牛轮状病毒、牛冠状病毒、大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对质粒标准品的检测限为5.46×10^(1)拷贝/μL,敏感性高;对重组质粒标准品的批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%,具有良好的重复性和稳定性。采用本研究建立的RT-qPCR方法和文献中的BVDV-1 RT-qPCR方法分别对50份腹泻牛粪便样品检测,结果显示,两种方法的阳性检出率均为16%(8/50),总符合率达100%。本研究建立的RT-qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的优点,为BVDV临床快速检测、流行病学调查及疫病防控工作提供了新的技术支撑和思路。; 关键词牛病毒性腹泻病毒1型 Npro基因荧光定量RT-PCR 应用; Keywords bovine viral diarrhea virus type 1 Npro gene fluorescent quantitative RT-PCR application; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响被引量：1: 4; 作者余祖华高梦茹何雷魏颖陈建陈松彪丁轲; 机构河南科技大学动物科技学院/功能微生物与畜禽健康实验室/动物疫病与公共卫生重点实验室洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室河南科技学院动物科技学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3678-3687,共10页; 基金国家自然科学基金(U1504308,31702207); 文摘旨在研究马立克病病毒(Marek′s disease virus,MDV)编码的mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响,将mdv1-miR-M4-5p模拟物、抑制物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞后48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中mdv1-miR-M4-5p、TGF-β1、Smad2以及caspase-9、caspase-3、cyt-c、cyclinD1、Bcl-2等增殖和凋亡相关分子的转录;CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果显示:与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p模拟物转染显著上调MDCC-MSB1细胞中mdv1-miR-M4-5p、cyclinD1、Bcl-2的转录水平,下调TGF-β1、Smad2、cyt-c、caspase-9和caspase-3的表达转录,促进细胞的增殖,减少G1期细胞,增加S和G2细胞,降低细胞凋亡率。与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p抑制物转染后MDCC-MSB1细胞的增殖、凋亡及其相关分子转录的结果与mdv1-miR-M4-5p模拟物转染后的结果相反。综上,Mdv1-miR-M4-5p可促进MDCC-MSB1细胞增殖,抑制其凋亡,这可能是通过抑制TGF-β1/Smad2信号通路来实现的。; 关键词 mdv1-miR-M4-5p MDV 增殖凋亡 TGF-β1/Smad2; Keywords mdv1-miR-M4-5p MDV proliferation apoptosis TGF-β1/Smad2; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学] Q255 [生物学—细胞生物学] Q279 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细菌外膜囊泡结构、分泌特性及致病机制被引量：1: 5; 作者高远集刘畅陈淼陈松彪张俊峰李静贾艳艳廖成水郭荣显丁轲余祖华尚珂; 机构河南科技大学动物科技学院/功能微生物与畜禽健康实验室洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室河南科技大学医学技术与工程学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期971-983,共13页; 基金河南科技大学博士研究启动专项基金(13480102) 河南省自然科学基金资助项目(232300421263) 河南省科技研发计划联合基金(232103810029)。; 文摘外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)是革兰阴性菌在生长过程中释放到胞外的囊泡状结构,被认为是细菌的“远程武器”,其功能主要是攻击宿主组织并帮助细菌定植、损害宿主细胞功能、调节宿主的防御,因此OMVs在细菌致病过程中发挥着重要作用。囊泡中的物质通过与细菌释放出的自诱导物化学信号分子结合,可以驱使细菌或者囊泡在内环境中发挥特殊功能,如群体感应、生物膜形成、获取营养、抗生素抗性、应激反应、对抗其它微生物的竞争或防御、微生物群落状态、核酸转移、水平基因转移、毒素和毒力因子的递送等,且在细菌生长周期发挥着不可或缺的作用。本文主要综述OMVs结构、分泌特性及其致病机制的最新研究进展,为深入研究细菌的致病机制以及开发新的抗菌策略提供理论指导。; 关键词细菌外膜囊泡结构分泌特性致病机制; Keywords bacteria outer membrane vesicles structure secretion characteristics pathogenesis; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	溶血性曼氏杆菌OmpA的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立	尚珂高远集刘畅代静蕾丁梦豪聂孟川王怡轩陈松彪贾艳艳郭荣显丁轲余祖华	《中国预防兽医学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	mRNA疫苗-分子设计、递呈及免疫活化的分子机制	陈慧敏刘飞飞尚珂张春杰陈松彪	《中国人兽共患病学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛病毒性腹泻病毒1型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立与应用	刘飞飞杨澳飞贾东鹭韩新雨陈慧敏陈建魏颖丁轲张春杰陈松彪	《中国预防兽医学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响	余祖华高梦茹何雷魏颖陈建陈松彪丁轲	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	细菌外膜囊泡结构、分泌特性及致病机制	高远集刘畅陈淼陈松彪张俊峰李静贾艳艳廖成水郭荣显丁轲余祖华尚珂	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料