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共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价
被引量：
7
1
作者
丁轲
余祖华
+8 位作者
李旺
闫文朝
王臣
赵战勤
程相朝
张春杰
王天奇
程安春
汪铭书
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期262-269,共8页
笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳...
笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳酸杆菌整合表达载体pMJ67,电转化入干酪乳杆菌L.CECT5276,SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组菌GPVVP3-gIL2融合蛋白的表达活性。将重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅后检测血清GPV抗体、小肠黏液sIgA和脾淋巴细胞增殖情况,评价其免疫效果。结果表明,酶切和测序结果表明成功构建重组表达载体pMJ-SP-GPVVP3-gIL2,PCR证实质粒pMJ-SP-GPVVP3-gIL2成功整合到乳酸杆菌基因组;Western blot表明重组乳酸杆菌分泌表达的融合蛋白GPVVP3-gIL2能与GPV阳性血清特异性结合;淋巴细胞增殖试验表明口服重组菌后能特异地刺激脾淋巴细胞增殖,且在第4、5、6周明显高于GPV VP3组和gIL2组;重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅可以产生抗VP3蛋白抗体,且具有中和活性的抗体显著高于GPV VP3组;小肠黏液sIgA细胞生成的数量自第2周较GPV VP3组和疫苗组显著上升。动物攻毒试验结果显示GPV VP3-gIL2融合蛋白免疫组能够获得85%的保护率,表明所构建的重组乳酸杆菌口服后对GPV的攻击具有较好的免疫保护作用。本试验成功构建能稳定表达GPV VP3-IL2融合蛋白的口服乳酸杆菌工程菌,为研究其作为口服疫苗奠定了基础。
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关键词
鹅细小病毒(GPV)
VP3
鹅白细胞介素-2(IL-2)
乳酸杆菌
共表达
口服免疫
融合蛋白
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职称材料
豫北地区屠宰生猪肉孢子虫感染情况调查与分析
被引量：
7
2
作者
李小军
闫文朝
+4 位作者
钱伟锋
王天奇
韩利方
袁林
黄腾飞
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期74-78,共5页
目的掌握肉孢子虫病在河南屠宰生猪中的感染情况。方法利用压片镜检法和组织切片技术对豫北某大型屠宰场2011年112月份屠宰生猪进行肉孢子虫感染情况进行调查研究。结果豫北地区屠宰生猪肉孢子虫包囊平均检出率为2．38‰，低于国内其他...
目的掌握肉孢子虫病在河南屠宰生猪中的感染情况。方法利用压片镜检法和组织切片技术对豫北某大型屠宰场2011年112月份屠宰生猪进行肉孢子虫感染情况进行调查研究。结果豫北地区屠宰生猪肉孢子虫包囊平均检出率为2．38‰，低于国内其他地区，并且大多数生猪为轻度感染。寄生于膈肌、颈背侧肌、腰肌、肋间肌和股内侧肌等部位肌纤维内的包囊呈梭形、柳叶状和棒状，大小为（499-2259）μm×（163-260）μm，包囊壁有呈栅栏状的厚壁型和光滑的薄壁型两类，其中厚壁型包囊特征与米氏肉孢子虫相似。寄生于肌纤维内的包囊引起肌纤维变性、坏死、横纹消失和萎缩等病变。结论在豫北地区屠宰生猪肉孢子虫感染普遍，包囊阶段对猪有明显的致病性。说明兽医界和生猪屠宰检疫中应重视该病对人和猪的危害性，并加强检疫和控制。
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关键词
屠宰生猪
豫北地区
肉孢子虫
检出率
肌肉萎缩
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职称材料
题名
共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价
被引量：
7
1
作者
丁轲
余祖华
李旺
闫文朝
王臣
赵战勤
程相朝
张春杰
王天奇
程安春
汪铭书
机构
河南科技大学动物疫病与公共安全院士工作站
河南科技大学
功能微生物与免疫重点实验室
四川农业
大学
动物
医学院禽病防治研究中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期262-269,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31101744)
洛阳市科技特派员项目(0903042A)
文摘
笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳酸杆菌整合表达载体pMJ67,电转化入干酪乳杆菌L.CECT5276,SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组菌GPVVP3-gIL2融合蛋白的表达活性。将重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅后检测血清GPV抗体、小肠黏液sIgA和脾淋巴细胞增殖情况,评价其免疫效果。结果表明,酶切和测序结果表明成功构建重组表达载体pMJ-SP-GPVVP3-gIL2,PCR证实质粒pMJ-SP-GPVVP3-gIL2成功整合到乳酸杆菌基因组;Western blot表明重组乳酸杆菌分泌表达的融合蛋白GPVVP3-gIL2能与GPV阳性血清特异性结合;淋巴细胞增殖试验表明口服重组菌后能特异地刺激脾淋巴细胞增殖,且在第4、5、6周明显高于GPV VP3组和gIL2组;重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅可以产生抗VP3蛋白抗体,且具有中和活性的抗体显著高于GPV VP3组;小肠黏液sIgA细胞生成的数量自第2周较GPV VP3组和疫苗组显著上升。动物攻毒试验结果显示GPV VP3-gIL2融合蛋白免疫组能够获得85%的保护率,表明所构建的重组乳酸杆菌口服后对GPV的攻击具有较好的免疫保护作用。本试验成功构建能稳定表达GPV VP3-IL2融合蛋白的口服乳酸杆菌工程菌,为研究其作为口服疫苗奠定了基础。
关键词
鹅细小病毒(GPV)
VP3
鹅白细胞介素-2(IL-2)
乳酸杆菌
共表达
口服免疫
融合蛋白
Keywords
goose parvovirus
VP3
interleukin-2（IL-2）
Lactobacillus
co-expression
oral administration
fusion protein
分类号
S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
豫北地区屠宰生猪肉孢子虫感染情况调查与分析
被引量：
7
2
作者
李小军
闫文朝
钱伟锋
王天奇
韩利方
袁林
黄腾飞
机构
河南科技大学
动物
科技
学院
动物
检疫实验室
济源市
动物
卫生监督所
河南科技大学
动物
疫病
防控
与公共安全
院士工作站
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期74-78,共5页
基金
国家自然科学基金(31001058)
河南省高校青年骨干教师资助计划资助(2011GGJS-076)~~
文摘
目的掌握肉孢子虫病在河南屠宰生猪中的感染情况。方法利用压片镜检法和组织切片技术对豫北某大型屠宰场2011年112月份屠宰生猪进行肉孢子虫感染情况进行调查研究。结果豫北地区屠宰生猪肉孢子虫包囊平均检出率为2．38‰，低于国内其他地区，并且大多数生猪为轻度感染。寄生于膈肌、颈背侧肌、腰肌、肋间肌和股内侧肌等部位肌纤维内的包囊呈梭形、柳叶状和棒状，大小为（499-2259）μm×（163-260）μm，包囊壁有呈栅栏状的厚壁型和光滑的薄壁型两类，其中厚壁型包囊特征与米氏肉孢子虫相似。寄生于肌纤维内的包囊引起肌纤维变性、坏死、横纹消失和萎缩等病变。结论在豫北地区屠宰生猪肉孢子虫感染普遍，包囊阶段对猪有明显的致病性。说明兽医界和生猪屠宰检疫中应重视该病对人和猪的危害性，并加强检疫和控制。
关键词
屠宰生猪
豫北地区
肉孢子虫
检出率
肌肉萎缩
Keywords
slaughtered pigs
the north of Henan Province
Sarcocystis
positive rate
atrophy of muscle fibers
分类号
S855.9 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价
丁轲
余祖华
李旺
闫文朝
王臣
赵战勤
程相朝
张春杰
王天奇
程安春
汪铭书
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
豫北地区屠宰生猪肉孢子虫感染情况调查与分析
李小军
闫文朝
钱伟锋
王天奇
韩利方
袁林
黄腾飞
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
7
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职称材料
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