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共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价被引量：7: 1; 作者丁轲余祖华 +8 位作者李旺闫文朝王臣赵战勤程相朝张春杰王天奇程安春汪铭书《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期262-269,共8页; 笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳... 展开更多; 关键词鹅细小病毒(GPV) VP3 鹅白细胞介素-2(IL-2) 乳酸杆菌共表达口服免疫融合蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株土壤源高产植酸酶芽孢杆菌的分离与鉴定被引量：3: 2; 作者孔志园丁轲 +3 位作者余祖华王天奇闫文朝刘一尘《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2012年第4期65-68,73,共5页; 对河南省不同地点采集的45份土样,利用分离培养基对产植酸酶芽孢杆菌进行分离和纯化,采用钒钼酸铵法测定其酶活,结合菌落和显微形态、生理生化试验和16S rDNA序列鉴定其种属。鉴定结果表明:从分离的80余株菌中筛选获得一株有较大植酸酶... 展开更多; 关键词植酸酶芽孢杆菌分离鉴定 16S RDNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

产纤维素酶芽孢杆菌的诱变和酶学性质研究被引量：4: 3; 作者丁轲余祖华 +5 位作者恒子钤李三栋赵振升赵战勤闫文朝程相朝《饲料研究》 CAS 北大核心 2012年第9期38-41,共4页; 为提高芽孢杆菌产纤维素酶的活性，以实验室保存的产纤维素酶枯草芽孢杆菌作为出发菌株，利用紫外线对其进行诱变处理，采用刚果红染色法初筛和3，5-二硝基水杨酸法进行复筛，并对其酶学性质进行初步研究。结果表明：诱变后突变株的纤... 展开更多; 关键词纤维素酶枯草芽孢杆菌诱变选育酶学性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

鹅细小病毒CHv强毒株VP3基因克隆及遗传进化被引量：3: 4; 作者丁轲程安春 +3 位作者张智信汪铭书余祖华程相朝《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2011年第6期59-63,8,共5页; 根据Genbank中的鹅细小病毒（GPV）B株全基因序列,设计合成一对引物,应用PCR技术扩增了GPV强毒株CHv的VP3基因片段,将扩增后的VP3基因重组到pMD18-T质粒载体上,并对插入片段进行序列测定,将测序结果及由该结果推导的氨基酸序列与国内外... 展开更多; 关键词鹅细小病毒 VP3基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价被引量：7: 1; 作者丁轲余祖华李旺闫文朝王臣赵战勤程相朝张春杰王天奇程安春汪铭书; 机构河南科技大学动物疫病与公共安全院士工作站河南科技大学功能微生物与免疫重点实验室四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期262-269,共8页; 基金国家自然科学基金项目(31101744) 洛阳市科技特派员项目(0903042A); 文摘笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳酸杆菌整合表达载体pMJ67,电转化入干酪乳杆菌L.CECT5276,SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组菌GPVVP3-gIL2融合蛋白的表达活性。将重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅后检测血清GPV抗体、小肠黏液sIgA和脾淋巴细胞增殖情况,评价其免疫效果。结果表明,酶切和测序结果表明成功构建重组表达载体pMJ-SP-GPVVP3-gIL2,PCR证实质粒pMJ-SP-GPVVP3-gIL2成功整合到乳酸杆菌基因组;Western blot表明重组乳酸杆菌分泌表达的融合蛋白GPVVP3-gIL2能与GPV阳性血清特异性结合;淋巴细胞增殖试验表明口服重组菌后能特异地刺激脾淋巴细胞增殖,且在第4、5、6周明显高于GPV VP3组和gIL2组;重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅可以产生抗VP3蛋白抗体,且具有中和活性的抗体显著高于GPV VP3组;小肠黏液sIgA细胞生成的数量自第2周较GPV VP3组和疫苗组显著上升。动物攻毒试验结果显示GPV VP3-gIL2融合蛋白免疫组能够获得85%的保护率,表明所构建的重组乳酸杆菌口服后对GPV的攻击具有较好的免疫保护作用。本试验成功构建能稳定表达GPV VP3-IL2融合蛋白的口服乳酸杆菌工程菌,为研究其作为口服疫苗奠定了基础。; 关键词鹅细小病毒(GPV) VP3 鹅白细胞介素-2(IL-2) 乳酸杆菌共表达口服免疫融合蛋白; Keywords goose parvovirus VP3 interleukin-2（IL-2） Lactobacillus co-expression oral administration fusion protein; 分类号 S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株土壤源高产植酸酶芽孢杆菌的分离与鉴定被引量：3: 2; 作者孔志园丁轲余祖华王天奇闫文朝刘一尘; 机构河南科技大学功能微生物与免疫重点实验室; 出处《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2012年第4期65-68,73,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31101744) 洛阳市科技攻关基金项目(0903042A); 文摘对河南省不同地点采集的45份土样,利用分离培养基对产植酸酶芽孢杆菌进行分离和纯化,采用钒钼酸铵法测定其酶活,结合菌落和显微形态、生理生化试验和16S rDNA序列鉴定其种属。鉴定结果表明:从分离的80余株菌中筛选获得一株有较大植酸酶酶活的菌株B.Ld2-C,植酸酶酶活为552 U/mL。经鉴定为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(B.sphaericus),能形成芽孢,而且该菌株能够耐受较强的酸、胆盐和高温,为研究其作为饲料添加剂菌种奠定了良好基础。; 关键词植酸酶芽孢杆菌分离鉴定 16S RDNA; Keywords Phytase Bacillus Isolation Identification 16S rDNA; 分类号 S816.7 [农业科学—饲料科学] Q93-331 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名产纤维素酶芽孢杆菌的诱变和酶学性质研究被引量：4: 3; 作者丁轲余祖华恒子钤李三栋赵振升赵战勤闫文朝程相朝; 机构河南科技大学功能微生物与免疫重点实验室; 出处《饲料研究》 CAS 北大核心 2012年第9期38-41,共4页; 基金洛阳市科技攻关项目(0903042A); 文摘为提高芽孢杆菌产纤维素酶的活性，以实验室保存的产纤维素酶枯草芽孢杆菌作为出发菌株，利用紫外线对其进行诱变处理，采用刚果红染色法初筛和3，5-二硝基水杨酸法进行复筛，并对其酶学性质进行初步研究。结果表明：诱变后突变株的纤维素酶活力较出发菌株提高4．476倍。该纤维素酶的最适pH为6．0，且在pH5．0-7．0酶活力较稳定；该酶的最适酶促反应温度为60℃，在无底物保护且水浴30min的条件下，酶活力在30-65℃保持稳定；此外，金属离子科和Ba^2＋对酶活力有激活作用，相对酶活分别为108．11％和105．43％，而金属离子Ca^2＋和Cu^2＋对酶活性有抑制作用，二者的相对酶活分别为93．80％和89．08％．; 关键词纤维素酶枯草芽孢杆菌诱变选育酶学性质; 分类号 S816.3 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鹅细小病毒CHv强毒株VP3基因克隆及遗传进化被引量：3: 4; 作者丁轲程安春张智信汪铭书余祖华程相朝; 机构河南科技大学功能微生物与免疫重点实验室动物疫病与人类健康四川省重点实验室河南省宜阳县种子管理站; 出处《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2011年第6期59-63,8,共5页; 基金教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET20420906) 教育部高等学校科技创新工程重大项目(706050); 文摘根据Genbank中的鹅细小病毒（GPV）B株全基因序列,设计合成一对引物,应用PCR技术扩增了GPV强毒株CHv的VP3基因片段,将扩增后的VP3基因重组到pMD18-T质粒载体上,并对插入片段进行序列测定,将测序结果及由该结果推导的氨基酸序列与国内外分离的GPV、MDPV、PPV和CPV等不同宿主的细小病毒的VP3进行比对分析。结果表明：中国四川分离的GPV CHv株VP3基因长1 605 bp,编码534个氨基酸,与国内外10株GPV的VP3基因进行比较,核苷酸同源性为93.4%~99.8%,氨基酸同源性为96.5%~99.3%,其变异较小,是GPV保持一个血清型的分子基础。与番鸭细小病毒的核苷酸和氨基酸同源性分别为79.6%和89.9%,而与其他种属的细小病毒同源性均在30%以下,表明它们与GPV CHv株亲缘关系较远。; 关键词鹅细小病毒 VP3基因序列分析; Keywords Goose parvovirus VP3 gene Sequence analysis; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价	丁轲余祖华李旺闫文朝王臣赵战勤程相朝张春杰王天奇程安春汪铭书	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	一株土壤源高产植酸酶芽孢杆菌的分离与鉴定	孔志园丁轲余祖华王天奇闫文朝刘一尘	《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	产纤维素酶芽孢杆菌的诱变和酶学性质研究	丁轲余祖华恒子钤李三栋赵振升赵战勤闫文朝程相朝	《饲料研究》 CAS 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鹅细小病毒CHv强毒株VP3基因克隆及遗传进化	丁轲程安春张智信汪铭书余祖华程相朝	《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料