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口腔牙龈卟啉单胞菌通过TLR4/NF-κB信号通路对小鼠PND发生的影响
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作者 谢小娟 张爽 +3 位作者 柏效治 郝雪琴 吴瑶瑶 郑鹏 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期483-490,共8页
目的 探讨口腔牙龈卟啉单胞菌(Pg)能否通过调控TLR4/NF-κB信号通路影响围手术期认知功能障碍(PND)的发生。方法 细胞实验取对数生长期的BV-2细胞随机分为两组:对照组(C组)、LPS-Pg处理组(P组),采用Western blot实验检测细胞中信号蛋白(... 目的 探讨口腔牙龈卟啉单胞菌(Pg)能否通过调控TLR4/NF-κB信号通路影响围手术期认知功能障碍(PND)的发生。方法 细胞实验取对数生长期的BV-2细胞随机分为两组:对照组(C组)、LPS-Pg处理组(P组),采用Western blot实验检测细胞中信号蛋白(TLR4、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α)的表达,通过免疫荧光实验检测NF-κB p65在细胞核内外的表达变化。动物实验将C57BL/6小鼠随机分为6组:对照组(C组)、手术组(S组)、Pg感染组(P组)、Pg感染+手术组(PS组)、TLR4抑制剂组(T组)、Pg感染+手术+TLR4抑制剂组(PST组),对各组进行相应的处理后,应用水迷宫测试观察Pg感染对小鼠术后认知行为的影响,应用组织免疫化学实验观察Pg感染对小鼠海马组织中小胶质细胞活化的影响。结果 细胞实验结果显示,与C组比较,Western blot检测发现P组的TLR4、NLRP3、TNF-α表达量明显增高(均P<0.05),NF-κB在核内的表达量增加(P<0.05)、核外表达量减少(P<0.05),免疫荧光实验显示P组NF-κB表达量增多且向核内转移。动物实验结果显示,水迷宫实验结果显示,各组小鼠在术前训练阶段的表现并无显著差异,其逃避潜伏期与平均游泳速度均处于相近水平(均P>0.05)。术后测试阶段的结果显示,相较于C组,S组和PS组小鼠在目标象限的停留时间更短,穿越平台的次数也较少(均P<0.05)。与PS组比较,PST组小鼠在目标象限的停留时间较长,且穿越平台的次数也较多(均P<0.05)。对海马组织进行免疫组化分析提示PS组中的阳性细胞数量显著多于C组和PST组,这些阳性细胞的胞体增大,突起变短,且小胶质细胞呈现激活状态。结论 Pg感染诱发小鼠围手术期中枢神经系统炎症反应增强,引起小鼠PND的发生,可能与激活TLR4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 围手术期认知功能障碍 牙龈卟啉单胞菌 神经炎症 TLR4 NF-ΚB
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盐酸戊乙奎醚预处理对小鼠反复缺血-再灌注脑损伤时细胞外信号调节激酶1/2的影响 被引量：5
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作者 杨良民 谢小娟 +1 位作者 马立刚 张永杰 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期585-589,共5页
目的探讨盐酸戊乙奎醚预处理对小鼠反复缺血-再灌注(ischemia-reperfusion, IR)脑损伤时细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的影响。方法SPF级成年C57BL/6J小鼠96只,6~8周龄,体重16~25 g,按照随机数字表法分为三组:盐酸戊乙奎醚组(PHC组)、I... 目的探讨盐酸戊乙奎醚预处理对小鼠反复缺血-再灌注(ischemia-reperfusion, IR)脑损伤时细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的影响。方法SPF级成年C57BL/6J小鼠96只,6~8周龄,体重16~25 g,按照随机数字表法分为三组:盐酸戊乙奎醚组(PHC组)、IR组和假手术组(Sham组),每组32只。Sham组腹腔注射等容量生理盐水,30 min后分离双侧颈总动脉但不夹闭;IR组腹腔注射等容量生理盐水,30 min后分离并夹闭双侧颈总动脉,建立反复IR脑损伤模型;PHC组腹腔注射盐酸戊乙奎醚1.0 mg/kg,30 min后采用双侧颈总动脉夹闭术建立反复IR脑损伤模型。采用Morris水迷宫实验评估术前及术后学习记忆能力,随后处死小鼠,留取海马组织并测定其湿/干重比(W/D)。采用伊文斯蓝(EB)法检测血脑屏障的通透性。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定海马组织ERK1/2 mRNA表达量,Western blot法测定海马组织磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白含量。结果与Sham组比较,术后3、7 d IR组逃避潜伏期和游泳距离明显延长(P<0.05)。与IR组比较,术后3、7 d PHC组逃避潜伏期和游泳距离明显缩短(P<0.05)。与Sham组比较,IR组海马组织W/D和脑组织EB含量明显升高(P<0.05)。与IR组比较,PHC组海马组织W/D和脑组织EB含量明显降低(P<0.05)。与Sham组比较,IR组海马组织ERK1/2 mRNA表达量和p-ERK1/2蛋白含量明显升高(P<0.05)。与IR组比较,PHC组海马组织ERK1/2 mRNA表达量和p-ERK1/2蛋白含量明显降低(P<0.05)。结论盐酸戊乙奎醚预处理可通过抑制海马组织ERK 1/2激活而减轻小鼠反复缺血-再灌注脑损伤并改善其学习记忆能力。 展开更多
关键词 盐酸戊乙奎醚 细胞外信号调节激酶1/2 脑损伤 缺血-再灌注 学习记忆
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单肺通气时非通气侧肺持续中低流量给氧在老年患者肺癌根治术中的应用 被引量：7
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作者 张洪军 苗亚飞 +2 位作者 刘相乐 麻黎斯 司建洛 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期906-912,共7页
目的探讨单肺通气(OLV)时非通气侧肺持续中低流量给氧对老年患者肺癌根治术中肺泡巨噬细胞(AM)铁死亡的影响。方法选择2019年12月至2020年8月择期行胸腔镜下肺癌根治术的老年患者60例,男31例,女29例,年龄65~80岁,BMI 18~25 kg/m^(2),AS... 目的探讨单肺通气(OLV)时非通气侧肺持续中低流量给氧对老年患者肺癌根治术中肺泡巨噬细胞(AM)铁死亡的影响。方法选择2019年12月至2020年8月择期行胸腔镜下肺癌根治术的老年患者60例,男31例,女29例,年龄65~80岁,BMI 18~25 kg/m^(2),ASAⅡ或Ⅲ级。采用随机数字表法将患者分为两组:观察组和对照组,每组30例。OLV时观察组非通气侧肺给予1~4 L/min持续性中低流量给氧,对照组非通气侧肺不给予持续性中低流量给氧。于术前(T_(0),基础值)、麻醉诱导后即刻(T_(1))、OLV后30 min(T_(2))、1 h(T_(3))、2 h(T_(4))采集桡动脉血并测定SpO_(2)、PaO(2)和PaCO_(2),计算氧合指数(OI=PaO_(2)/FiO_(2))。记录术前一秒用力呼气容积(FEV_(1))/用力肺活量(FVC)比值。T_(3)时采集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用流式细胞术分选AM,比色法测定AM内Fe^(2+)、丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot法检测AM内长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白含量。T_(3)时切取肺癌周边正常肺组织,采用HE染色,光镜下观察肺组织病理学并进行肺组织损伤评分。记录PACU停留时间和住院时间,记录肺部并发症以及呼吸抑制、窦性心动过缓、窦性心动过速、高血压、低血压、恶心呕吐等不良事件发生情况。结果与T_(0)时比较,两组T_(1)—T_(4)时SpO_(2)明显升高(P<0.05),T_(1)时PaCO_(2)明显降低(P<0.05);对照组T_(1)和T_(3)时PaO(2)明显升高(P<0.05),T_(2)—T_(4)时PaCO_(2)明显升高(P<0.05),T_(1)时OI明显升高(P<0.05),T_(2)—T_(3)时OI明显降低(P<0.05);观察组T_(1)—T_(4)时PaO_(2)明显升高(P<0.05),T_(3)时PaCO_(2)明显降低(P<0.05),T_(1)、T_(3)、T_(4)时OI明显升高(P<0.05)。与对照组比较,观察组T_(2)—T_(4)时SpO_(2)、PaO_(2)和OI明显升高(P<0.05),PaCO_(2)明显降低(P<0.05);T_(3)时肺损伤评分明显降低(P<0.05),AM内Fe^(2+)、MDA浓度明显降低(P<0.05),SOD活性明显升高(P<0.05),ACSL4蛋白含量明显降低(P<0.05),GPX4蛋白含量明显升高(P<0.05);术后住院时间明显缩短(P<0.05),肺部并发症发生率明显降低(P<0.05)。两组PACU停留时间以及不良事件发生率差异无统计学意义。对照组肺泡壁增厚、水肿,可见大量中性粒细胞和单核细胞,肺泡腔内可见较多炎性渗出,肺间质明显增生可见大量炎性细胞浸润。观察组肺泡间隔增宽,毛细血管未见明显充血,小部分肺泡腔可见红细胞及炎性渗出液,肺间质炎性细胞浸润明显减少。结论老年患者胸腔镜下肺癌根治术中非通气侧肺持续中低流量给氧可减轻非通气侧肺损伤,其机制可能与抑制AM铁死亡有关。 展开更多
关键词 肺通气 肺泡巨噬细胞 肺损伤 铁死亡 老年
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