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铜绿假单胞菌二价组合DNA疫苗pOPRL+pOPRF最佳免疫剂量研究
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作者 宫强 阮梦蝶 +1 位作者 郭洁真 杜珍奇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期539-543,共5页
目的探讨铜绿假单胞菌二价组合DNA疫苗pOPRL+pOPRF在小鼠体内的最佳免疫剂量。方法分别以25μg,50μg,100μg和200μg的pOPRL+pOPRF免疫BALB/c小鼠。对各剂量免疫后诱导的血清抗体水平、脾淋巴细胞增殖水平以及IFN-γ和Il-2分泌水平进... 目的探讨铜绿假单胞菌二价组合DNA疫苗pOPRL+pOPRF在小鼠体内的最佳免疫剂量。方法分别以25μg,50μg,100μg和200μg的pOPRL+pOPRF免疫BALB/c小鼠。对各剂量免疫后诱导的血清抗体水平、脾淋巴细胞增殖水平以及IFN-γ和Il-2分泌水平进行检测,强毒攻击后测定各组小鼠的存活时间及保护率。结果 100μg和200μg组小鼠的血清特异性抗体水平、SI值及IFN-γ和Il-2的分泌水平明显高于25μg和50μg组(F=8.414,P<0.05)。且三免后100μg组小鼠脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和Il-2的量高于200μg组(F=6.375,P<0.05)。攻毒后25μg、50μg、100μg和200μg组的保护率分别为35%、45%、85%和70%。结论 pOPRL+pOPRF二价组合DNA的免疫效果与免疫剂量有一定的相关性,在小鼠中的最佳免疫剂量为100μg。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 pOPRL+pOPRF DNA疫苗 免疫效果 免疫剂量
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铜绿假单胞菌flgE基因PCR检测方法的初步建立
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作者 宫强 杜珍奇 +4 位作者 冯礼尚 樊泽军 冯洋洋 孙鹏飞 程梦琦 《现代畜牧兽医》 2020年第3期1-6,共6页
为建立一种基于铜绿假单胞菌flgE基因的PCR检测方法,本试验根据GenBank中已发表的铜绿假单胞菌flgE基因序列,设计合成了1对特异性引物,由铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增获得了目的基因。从退火温度、循环次数、Mg2+浓度、dNTPs浓度和引物... 为建立一种基于铜绿假单胞菌flgE基因的PCR检测方法,本试验根据GenBank中已发表的铜绿假单胞菌flgE基因序列,设计合成了1对特异性引物,由铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增获得了目的基因。从退火温度、循环次数、Mg2+浓度、dNTPs浓度和引物浓度5个方面优化了反应条件,并检测了该方法的特异性和敏感性。结果成功扩增出了铜绿假单胞菌1 400 bp的flgE特异性基因片段,最佳退火温度、循环次数、Mg2+浓度、dNTPs浓度和引物浓度分别为56℃、30个循环、1.6 mmol/L、0.2 mmol/L和0.3μmol/L。特异性试验表明,仅铜绿假单胞菌中可扩增出目的片段,而多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌中均未扩增出相应片段。敏感性试验结果表明,本方法可检测到最低10 pg/μL的铜绿假单胞菌基因组DNA以及100 CFU/mL的病原菌。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 flgE基因 PCR 检测方法
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