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反相高效液相色谱法测定烤烟叶片发育过程中的类胡萝卜素类物质 被引量:27
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作者 刘国顺 韦凤杰 +3 位作者 王芳 李亚娟 郭桥燕 黄晓书 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期161-163,共3页
建立了采用反相高效液相色谱测定烤烟叶片中类胡萝卜素的方法。烤烟叶片先用含0.1%丁基羟基甲苯(BHT)的90%丙酮水溶液萃取,然后加入0.1g醋酸铅,于4℃下以10000r/min离心5min以去除蛋白质。色谱柱为C18反相柱(3.9mmi.d.... 建立了采用反相高效液相色谱测定烤烟叶片中类胡萝卜素的方法。烤烟叶片先用含0.1%丁基羟基甲苯(BHT)的90%丙酮水溶液萃取,然后加入0.1g醋酸铅,于4℃下以10000r/min离心5min以去除蛋白质。色谱柱为C18反相柱(3.9mmi.d.×150mm,5μm)。流动相:A,甲醇-异丙醇(体积比为1:1);B,超纯水。洗脱程序:0~10min,70%A+30%B;10~17min,100%A;17~30min(90%A+10%B)。流速:0.5mL/min。进样量:10μL。检测波长:450nm。该方法简化了样品的前处理过程,4种类胡萝卜素物质的加标回收率为91.77%~97.42%,相对标准偏差为3.46%~0.98%。用该方法研究了烤烟发育过程中类胡萝卜素含量的变化规律,获得了与文献较为一致的结果。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 类胡萝卜素 烤烟叶片
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烤烟烟叶胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶分离条件的优化 被引量:3
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作者 贾峰 魏庆华 +3 位作者 杜铮 王彩霞 黄晓书 刘卫群 《山东农业科学》 2010年第6期94-97,共4页
通过不同流动相、测定温度、流速的对比,优化了分离烟叶总DNA中胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的高效液相色谱法。烤烟烟叶DNA采用CTAB法提取,高氯酸水解,用KOH调节pH到3—5,取上清液测定。色谱柱为NucleosilC18(250mm×4.6mm,5um)... 通过不同流动相、测定温度、流速的对比,优化了分离烟叶总DNA中胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的高效液相色谱法。烤烟烟叶DNA采用CTAB法提取,高氯酸水解,用KOH调节pH到3—5,取上清液测定。色谱柱为NucleosilC18(250mm×4.6mm,5um)。优化后测定条件为:流动相采用甲醇:5mmol/L戊烷磺酸钠(10:90,V/V),流速0.7ml/min,柱温30℃,检测波长273nm,进样量20山。该方法简化了流动相的配制,缩短了分离时间,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的加标回收率分别为103.50%和96.67%,相对标准偏差为2.35%和2.80%。用该方法研究烤烟烟叶发育过程中总DNA胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的含量,效果良好,符合烟叶生长发育规律。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱 烤烟烟叶 5-甲基胞嘧啶 胞嘧啶
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