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骨松汤含药血清对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞铁死亡的影响及机制
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作者 王莉莎 郭中华 +7 位作者 王上增 史栋梁 张仲博 任博文 王云飞 周晓宁 王俊杰 杨少祥 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第10期1405-1412,共8页
目的探究骨松汤含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)筛选骨松汤含药血清和铁抑制素-1(Fer-1)处理浓度。选择合适剂量的骨松汤含药血清和Fe... 目的探究骨松汤含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)筛选骨松汤含药血清和铁抑制素-1(Fer-1)处理浓度。选择合适剂量的骨松汤含药血清和Fer-1干预,荧光探针检测亚铁离子(Fe^(2+))和活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平及碱性磷酸酶(ALP)活性;比色法检测谷胱甘肽(GSH)水平;茜素红S染色检测钙结节吸光度(OD)值;免疫印迹检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰-Co A合成酶4(ACSL4)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)蛋白表达。细胞过表达NOX4,检测铁死亡相关指标(GPX4和ACSL4蛋白表达、GSH水平、MDA含量)和细胞成骨功能(ALP活性和钙结节OD值)。结果H_(2)O_(2)诱导MC3T3-E1细胞铁死亡。与H_(2)O_(2)组相比,骨松汤含药血清和Fer-1干预显著提高了细胞存活率、SOD和CAT活性、GSH水平以及GPX4蛋白表达(P<0.05),降低细胞MDA含量、Fe^(2+)和ROS水平以及NOX4与ACSL4蛋白表达(P<0.05)。NOX4过表达抑制了骨松汤含药血清对H_(2)O_(2)处理MC3T3-E1细胞铁死亡和成骨功能的保护作用。结论骨松汤含药血清能够抑制H_(2)O_(2)诱导的MC3T3-E1细胞铁死亡,这可能与其抑制NOX4/ROS信号通路活化有关。 展开更多
关键词 骨松汤含药血清 过氧化氢 MC3T3-E1细胞 铁死亡 NOX4 成骨细胞
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