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某铬酸盐生产工作场所主要职业病危害因素检测
1
作者
程广超
王思华
孟成名
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2009年第5期1115-1116,共2页
关键词
铬酸盐
超限倍数
职业病危害因素
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职称材料
人谷胱甘肽硫转移酶Pi基因的克隆、原核表达和蛋白纯化
2
作者
王智慧
吴逸明
吴拥军
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2006年第6期1114-1117,共4页
目的克隆人谷胱甘肽硫转移酶Pi(GSTPi)基因并在大肠杆菌中实现高效表达及蛋白纯化。方法用RT-PCR技术从人胎盘组织获取人GSTPi基因的cDNA序列,将其扩增产物GSTPi基因插入到原核克隆载体pMD18-T中,用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法...
目的克隆人谷胱甘肽硫转移酶Pi(GSTPi)基因并在大肠杆菌中实现高效表达及蛋白纯化。方法用RT-PCR技术从人胎盘组织获取人GSTPi基因的cDNA序列,将其扩增产物GSTPi基因插入到原核克隆载体pMD18-T中,用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒pMD18-T-GSTPi进行鉴定,将测序正确的GSTPi基因连接到表达载体pMAL-c2x多克隆位点中,构建重组表达质粒pMAL-c2x-GSTPi,鉴定后,用异丙基-b-d-硫代半乳糖苷进行诱导表达,表达产物用麦芽糖亲和层析法纯化。结果人GSTPi克隆到原核表达载体pMAL-c2x中,测序结果同GenBank序列比较,同源性为100%。通过诱导,在85000的表达量约达到35%,麦芽糖亲和层析法纯化蛋白,纯度达到85%。结论实现了解毒酶基因GSTPi的克隆和高效表达菌株的构建,并获取了高纯度的GSTPi蛋白。
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关键词
人谷胱甘肽硫转移酶Pi
RT-PCR
基因克隆
序列测定
表达
纯化
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职称材料
题名
某铬酸盐生产工作场所主要职业病危害因素检测
1
作者
程广超
王思华
孟成名
机构
河南省职业病防治研究所劳动卫生科
出处
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2009年第5期1115-1116,共2页
关键词
铬酸盐
超限倍数
职业病危害因素
分类号
R13 [医药卫生—劳动卫生]
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职称材料
题名
人谷胱甘肽硫转移酶Pi基因的克隆、原核表达和蛋白纯化
2
作者
王智慧
吴逸明
吴拥军
机构
郑州大学公共
卫生
学院
劳动卫生
学教研室
河南省职业病防治研究所劳动卫生科
郑州
出处
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2006年第6期1114-1117,共4页
文摘
目的克隆人谷胱甘肽硫转移酶Pi(GSTPi)基因并在大肠杆菌中实现高效表达及蛋白纯化。方法用RT-PCR技术从人胎盘组织获取人GSTPi基因的cDNA序列,将其扩增产物GSTPi基因插入到原核克隆载体pMD18-T中,用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒pMD18-T-GSTPi进行鉴定,将测序正确的GSTPi基因连接到表达载体pMAL-c2x多克隆位点中,构建重组表达质粒pMAL-c2x-GSTPi,鉴定后,用异丙基-b-d-硫代半乳糖苷进行诱导表达,表达产物用麦芽糖亲和层析法纯化。结果人GSTPi克隆到原核表达载体pMAL-c2x中,测序结果同GenBank序列比较,同源性为100%。通过诱导,在85000的表达量约达到35%,麦芽糖亲和层析法纯化蛋白,纯度达到85%。结论实现了解毒酶基因GSTPi的克隆和高效表达菌株的构建,并获取了高纯度的GSTPi蛋白。
关键词
人谷胱甘肽硫转移酶Pi
RT-PCR
基因克隆
序列测定
表达
纯化
Keywords
human glutathione S-transferase Pi
RT-PCR
gene chine
sequence analysis
expression
purification
分类号
R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
某铬酸盐生产工作场所主要职业病危害因素检测
程广超
王思华
孟成名
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2009
0
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职称材料
2
人谷胱甘肽硫转移酶Pi基因的克隆、原核表达和蛋白纯化
王智慧
吴逸明
吴拥军
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2006
0
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职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
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