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诱导性多能干细胞与肝样细胞分化被引量：2: 1; 作者丁一秦志华徐存拴《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期41-48,共8页; 肝脏疾病正逐渐成为全球棘手的医疗问题。肝细胞是肝脏生理活动的主要承担者,在肝脏疾病的研究以及药物的研发和测试方面有着举足轻重的作用。然而,体外分离培养的原代肝细胞面临在体外不能无限增殖和稳定表达肝脏特异基因等问题。有强... 展开更多; 关键词诱导性多能肝细胞肝细胞诱导分化; 在线阅读下载PDF 职称材料

Toll样受体信号通路的3条途径在大鼠肝再生中抑制库普弗细胞免疫反应被引量：1: 2; 作者何玉贵常翠芳 +6 位作者耿直许果果和婷婷梅金鑫周晓春杨亚娟徐存拴《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期100-105,共6页; 为从基因转录水平了解大鼠肝再生中Toll样受体信号通路调节库普弗细胞免疫反应的途径和方式,首先建立大鼠2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,从中分离库普弗细胞进行基因微阵列分析.发现Toll样受体信号通路的23个基因及其调节免疫... 展开更多; 关键词大鼠肝再生 TOLL样受体信号通路库普弗细胞免疫反应基因表达谱关键基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人白细胞介素-1α在毕赤酵母中的表达、纯化及生物学活性检测: 3; 作者李斌许晓亚 +3 位作者杨刚刚崔晴晴杨亚娟徐存拴《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期244-250,共7页; 在毕赤酵母中分泌表达重组人白细胞介素-1α(rh IL-1α),优化rh IL-1α的发酵工艺及纯化方法,以获得高表达、高纯度具有生物学活性的rh IL-1α。通过PCR扩增获得h IL-1α基因,构建其真核表达载体p PICZαA/h IL-1α,电转化至毕赤酵母X-... 展开更多; 关键词重组人白细胞介素-1α 毕赤酵母表达纯化人肝癌细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

PI3K等5条信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调节作用研究: 4; 作者王一雯王改平 +4 位作者耿小芳秦丹张继红和婷婷徐存拴《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期106-115,共10页; 为从基因转录水平解析信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调控作用,用小鼠基因表达谱芯片Mouse Genome 4 302.0检测信号通路相关基因表达丰度发现,PI3K,STAT3,钙蛋白酶,Rho家族鸟苷酸激酶和VEGF等5条信号通路的105个基因在该细胞的细胞周... 展开更多; 关键词 NIH3T3细胞信号通路基因转录细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

豹蛙抗瘤酶与人血清白蛋白融合蛋白的毕赤酵母高效表达与活性测定被引量：4: 5; 作者杨刚刚马诚凯 +9 位作者史世会张全义王泽吕中原王绪洋许晓亚崔晴晴张继红丁一徐存拴《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期222-229,共8页; 豹蛙抗瘤酶(Onconase,ONC),又称豹蛙酶,对多种肿瘤细胞和实体瘤具有显著杀伤作用,为得到高表达的ONC,利用HSA在毕赤酵母系统中的表达优势,将HSA和ONC融合进行毕赤酵母表达并分离纯化。设计融合基因HSA-(Gly4Ser1)3-ONC,简称HSA-ONC,构建... 展开更多; 关键词豹蛙抗瘤酶人血清蛋白毕赤酵母高效表达双水相萃取癌细胞活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同载体-宿主菌组合对重组蛋白表达量的影响被引量：4: 6; 作者杨刚刚王泽 +2 位作者白海静杨亚娟徐存拴《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第2期78-81,87,共5页; 研究了不同载体-宿主菌组合对毕赤酵母重组蛋白表达量的影响。以豹蛙抗瘤酶(onconase,ONC)、IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)与ONC的融合蛋白即HSA-(Gly_4Ser_1)_3-ONC(简称HSA-ONC)等5种重组蛋白为报... 展开更多; 关键词载体宿主菌载体-宿主菌组合重组蛋白表达量; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名诱导性多能干细胞与肝样细胞分化被引量：2: 1; 作者丁一秦志华徐存拴; 机构河南师范大学生命科学学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期41-48,共8页; 基金国家重点基础研究发展计划(973计划)前期研究专项(No.2012CB722304) 国家自然科学基金项目(No.31201093) +2 种基金 No.112300413204 No.132300410135); 文摘肝脏疾病正逐渐成为全球棘手的医疗问题。肝细胞是肝脏生理活动的主要承担者,在肝脏疾病的研究以及药物的研发和测试方面有着举足轻重的作用。然而,体外分离培养的原代肝细胞面临在体外不能无限增殖和稳定表达肝脏特异基因等问题。有强大的自我更新能力和三胚层分化潜能的诱导性多能肝细胞(i PSCs)能被诱导因子、外源基因和小分子化合物等定向诱导分化为功能性肝细胞。同时,还避免了伦理、宗教以及免疫排斥等诸多问题。本文简要综述了从不同策略诱导i PSCs成为功能性肝细胞的研究方法和成果,并对该领域进行小结和展望。; 关键词诱导性多能肝细胞肝细胞诱导分化; Keywords induced pluripotent stem cells(iPSCs) hepatocytes induced differentiation; 分类号 Q28 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Toll样受体信号通路的3条途径在大鼠肝再生中抑制库普弗细胞免疫反应被引量：1: 2; 作者何玉贵常翠芳耿直许果果和婷婷梅金鑫周晓春杨亚娟徐存拴; 机构河南省科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地河南师范大学生命科学学院; 出处《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期100-105,共6页; 基金国家自然科学基金(31201093) 河南省基础与前沿技术研究资助项目(122300413207); 文摘为从基因转录水平了解大鼠肝再生中Toll样受体信号通路调节库普弗细胞免疫反应的途径和方式,首先建立大鼠2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,从中分离库普弗细胞进行基因微阵列分析.发现Toll样受体信号通路的23个基因及其调节免疫反应的62个基因与大鼠肝再生相关.基因协同作用(Ep(t)值)和同类提取法分析表明,大鼠肝再生进展阶段,Toll样受体信号通路通过TLR/NF-κB,TLR/MAPK,TLR/IRF等3条途径和TLR4,MAL,UNC93B1,AP1S2,IRF1等5个关键基因抑制库普弗细胞免疫反应.; 关键词大鼠肝再生 TOLL样受体信号通路库普弗细胞免疫反应基因表达谱关键基因; Keywords rat liver regeneration Toll-like receptor signaling pathway Kupffer cells immune response gene expres- sion profiles key genes; 分类号 Q257 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人白细胞介素-1α在毕赤酵母中的表达、纯化及生物学活性检测: 3; 作者李斌许晓亚杨刚刚崔晴晴杨亚娟徐存拴; 机构河南师范大学生命科学学院河南省一科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地和河南省生物工程重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期244-250,共7页; 基金国家"973"前期研究专项(2012CB722304) 河南省自然科学基金项目(142300413212 +1 种基金 132300413208) 河南省重大科技攻关项目(111100910600); 文摘在毕赤酵母中分泌表达重组人白细胞介素-1α(rh IL-1α),优化rh IL-1α的发酵工艺及纯化方法,以获得高表达、高纯度具有生物学活性的rh IL-1α。通过PCR扩增获得h IL-1α基因,构建其真核表达载体p PICZαA/h IL-1α,电转化至毕赤酵母X-33,用PCR和SDS-PAGE方法筛选高效表达rh IL-1α的工程菌株并进行Western blot鉴定,DEAE弱阴离子离子交换层析一步纯化表达产物,并用MTT法初步检测其对人肝癌细胞7402的生物学作用。rh IL-1α在摇瓶规模下,经甲醇诱导4 d后表达量约为30 mg/L。Western blot检测rh IL-1α的特异性结合,获得纯度约95%,收率40%左右的rh IL-1α,并证明rh IL-1α能够抑制人肝癌细胞7402的增殖。构建了重组h IL-1α的基因工程菌,并在毕赤酵母中实现了高效表达,为进一步研究其生物学活性和功能奠定了基础。; 关键词重组人白细胞介素-1α 毕赤酵母表达纯化人肝癌细胞; Keywords recombinant human interleukin-1α Pichia pastoris expression purification Bel-7402 cell; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PI3K等5条信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调节作用研究: 4; 作者王一雯王改平耿小芳秦丹张继红和婷婷徐存拴; 机构河南师范大学生命科学学院河南省一科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地河南省生物工程重点实验室; 出处《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期106-115,共10页; 基金国家973前期研究专项(2012CB722304) 河南省重大科技攻关项目(111100910600) 河南省基础与前沿技术研究项目(142300413212); 文摘为从基因转录水平解析信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调控作用,用小鼠基因表达谱芯片Mouse Genome 4 302.0检测信号通路相关基因表达丰度发现,PI3K,STAT3,钙蛋白酶,Rho家族鸟苷酸激酶和VEGF等5条信号通路的105个基因在该细胞的细胞周期中发生有意义的表达变化.分析基因表达变化预示的信号通路作用表明,上述5条信号通路依次促进G1期、G1/S转换期、S期、G2/M转换期和M期进程.结论:上述5条信号通路促进NIH3T3细胞的细胞周期进程.; 关键词 NIH3T3细胞信号通路基因转录细胞周期; Keywords NIH3T3 cell signalling pathway gene transcription cell cycle; 分类号 Q257 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名豹蛙抗瘤酶与人血清白蛋白融合蛋白的毕赤酵母高效表达与活性测定被引量：4: 5; 作者杨刚刚马诚凯史世会张全义王泽吕中原王绪洋许晓亚崔晴晴张继红丁一徐存拴; 机构河南师范大学生命科学学院河南省一科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地和河南省生物工程重点实验室河南新乡华星药厂; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期222-229,共8页; 基金国家"973"前期研究专项(2012CB722304) 河南省自然科学基金项目(142300413212 +1 种基金 132300413208) 河南省重大科技攻关项目(111100910600); 文摘豹蛙抗瘤酶(Onconase,ONC),又称豹蛙酶,对多种肿瘤细胞和实体瘤具有显著杀伤作用,为得到高表达的ONC,利用HSA在毕赤酵母系统中的表达优势,将HSA和ONC融合进行毕赤酵母表达并分离纯化。设计融合基因HSA-(Gly4Ser1)3-ONC,简称HSA-ONC,构建至3种表达载体p PIC9、p PIC9K、p PICZα-A并分别转染X-33、GS115和SMD1168 3种宿主菌,在摇瓶和10L规模优化表达条件和双水相偶联柱层析分离纯化目的蛋白并测定其生物学活性。结果显示,在1 L摇瓶规模下,p PICZα-A/X-33/HSA-ONC组合的表达量优于其他组合,且在p H7,温度23℃条件下诱导10 d,表达量达到最高(235 mg/L)。在10 L规模进行不同培养基条件的发酵,r HSA-ONC于p H 7的低盐基础盐培养基(Low salt basic salt mediu m,LS-BSM),甲醇浓度0.25%条件下诱导10 d,表达量达到最高(2.02 g/L)。经双水相萃取偶联DEAE离子交换层析可得到纯度≥95%、收率高于70%的r HSA-ONC。生物活性检测发现,r HSA-ONC在体外能抑制多种癌细胞增殖。r HSA-ONC的表达量较r ONC提高1倍(同等摩尔量情况下),同时在体外抑制多种癌细胞增殖。; 关键词豹蛙抗瘤酶人血清蛋白毕赤酵母高效表达双水相萃取癌细胞活性; Keywords onconase human serum albumin Pichia pastoris efficient expression aqueous two-phase extraction activity of tumor cells; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同载体-宿主菌组合对重组蛋白表达量的影响被引量：4: 6; 作者杨刚刚王泽白海静杨亚娟徐存拴; 机构河南师范大学生命科学学院河南省-科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地和河南省生物工程重点实验室河南新乡华星药厂; 出处《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第2期78-81,87,共5页; 基金国家"973"前期研究专项基金项目(2012CB722304) 河南省自然科学基金项目(142300413212 +1 种基金 132300413208) 河南省重大科技攻关基金项目(111100910600); 文摘研究了不同载体-宿主菌组合对毕赤酵母重组蛋白表达量的影响。以豹蛙抗瘤酶(onconase,ONC)、IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)与ONC的融合蛋白即HSA-(Gly_4Ser_1)_3-ONC(简称HSA-ONC)等5种重组蛋白为报告蛋白,设计并合成了5种基因。分别插入3种酵母表达载体p PIC9、p PIC9K和p PICZα-A中,转化3种毕赤酵母受体菌X-33、GS115和SMD1168。筛选得到7种载体-宿主菌组合,在摇瓶规模进行诱导并定量。研究结果表明:5种外源蛋白在p PICZα-A/X-33组合中表达量最高,在p PIC9/SMD1168组合中最低。从重组蛋白表达量来说,p PICZα-A/X-33组合优于其他6种载体-宿主菌组合。; 关键词载体宿主菌载体-宿主菌组合重组蛋白表达量; Keywords vector host strain vector and host strain combination recombinant protein level of expression; 分类号 Q815 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	诱导性多能干细胞与肝样细胞分化	丁一秦志华徐存拴	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Toll样受体信号通路的3条途径在大鼠肝再生中抑制库普弗细胞免疫反应	何玉贵常翠芳耿直许果果和婷婷梅金鑫周晓春杨亚娟徐存拴	《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重组人白细胞介素-1α在毕赤酵母中的表达、纯化及生物学活性检测	李斌许晓亚杨刚刚崔晴晴杨亚娟徐存拴	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	PI3K等5条信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调节作用研究	王一雯王改平耿小芳秦丹张继红和婷婷徐存拴	《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	豹蛙抗瘤酶与人血清白蛋白融合蛋白的毕赤酵母高效表达与活性测定	杨刚刚马诚凯史世会张全义王泽吕中原王绪洋许晓亚崔晴晴张继红丁一徐存拴	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2015	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	不同载体-宿主菌组合对重组蛋白表达量的影响	杨刚刚王泽白海静杨亚娟徐存拴	《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2016	4	在线阅读下载PDF 职称材料