微生物谷氨酰胺转氨酶的来源与生物工程技术研究进展 被引量：2

1

作者 张秀江 权淑静 +4 位作者 向凌云 刘丽 解复红 冯菲 胡虹 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第4期6-10,共5页

微生物谷氨酰胺转氨酶(MTGase)是一种通过异肽键来催化蛋白质或多肽链之间的酰基发生转移反应的重要酶制剂,在食品、生物医药、化妆品、纺织等领域有着广泛的应用前景。该文综述了MTGase的国内外研究现状,MTGase基因、MTGase工程菌株的... 微生物谷氨酰胺转氨酶(MTGase)是一种通过异肽键来催化蛋白质或多肽链之间的酰基发生转移反应的重要酶制剂,在食品、生物医药、化妆品、纺织等领域有着广泛的应用前景。该文综述了MTGase的国内外研究现状,MTGase基因、MTGase工程菌株的构建和表达,以及MTGase的分子改造技术研究进展,并对生物工程技术应用于MTGase的产品生产进行了展望,为高效和低成本MTGase的产品开发及应用提供新的思路和方法。 展开更多

关键词 微生物谷氨酰胺转氨酶 克隆表达 工程菌株 分子改造

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复合微生物肥料在小麦生产上的应用效果研究 被引量：4

2

作者 李冠杰 徐文涛 +3 位作者 陈春先 王佰涛 杨金星 张永战 《现代农业科技》 2022年第23期1-4,8,共5页

为了验证复合微生物肥料在河南地区小麦生产上的应用效果,在南阳市社旗县开展了田间试验。结果表明,施用复合微生物肥料600 kg/hm^(2)处理小麦的分蘖数、株高、穗长、穗粒数和千粒重均提高,平均增产1166.66 kg/hm^(2),增产率达到12.80%... 为了验证复合微生物肥料在河南地区小麦生产上的应用效果,在南阳市社旗县开展了田间试验。结果表明,施用复合微生物肥料600 kg/hm^(2)处理小麦的分蘖数、株高、穗长、穗粒数和千粒重均提高,平均增产1166.66 kg/hm^(2),增产率达到12.80%。方差分析结果表明,施用复合微生物肥料处理与对照(仅施用小麦专用肥)之间小麦产量差异达到极显著水平。说明复合微生物肥料在小麦田的应用效果明显,能够显著提高小麦产量。 展开更多

关键词 小麦 复合微生物肥料 分蘖数 产量

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微生物发酵饲料替抗机理研究进展 被引量：20

3

作者 王佰涛 杨文玲 +2 位作者 李灵平 雷高 刘德海 《中国饲料》 北大核心 2022年第1期10-13,18,共5页

微生物发酵饲料充分利用益生菌的特性,在饲料业发展前景广阔,其具有改善动物免疫力,提高动物抗病能力等作用。目前面对饲料业全面禁止使用抗生素的趋势,微生物发酵饲料能够作为抗生素的替代品,为绿色饲料业的发展提供强力保障。本文从... 微生物发酵饲料充分利用益生菌的特性,在饲料业发展前景广阔,其具有改善动物免疫力,提高动物抗病能力等作用。目前面对饲料业全面禁止使用抗生素的趋势,微生物发酵饲料能够作为抗生素的替代品,为绿色饲料业的发展提供强力保障。本文从调节动物机体免疫系统、增加免疫活性物质、改善动物肠道微生态平衡等几个方面对微生物发酵饲料的替抗机理进行了介绍,以期能够为微生物发酵饲料的发展和应用提供帮助。 展开更多

关键词 发酵饲料 抗生素 免疫力 氧化应激

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裂解多糖单加氧酶的研究进展

4

作者 陈凌宇 李志建 +2 位作者 刁文涛 王佰涛 刘德海 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期393-400,共8页

多糖类化合物在自然界中广泛存在,但目前针对多糖类底物的酶解效果并不理想。裂解多糖单加氧酶(lytic polysaccharide monooxygenase,LPMO)是一种新型的多糖降解酶,其能够以氧化方式打开纤维素中的糖苷键使其出现更多的酶解位点,从而在... 多糖类化合物在自然界中广泛存在,但目前针对多糖类底物的酶解效果并不理想。裂解多糖单加氧酶(lytic polysaccharide monooxygenase,LPMO)是一种新型的多糖降解酶,其能够以氧化方式打开纤维素中的糖苷键使其出现更多的酶解位点,从而在降解纤维素等多糖类物质中发挥着巨大优势。该文从LPMO的分类、结构、活性测定方法、异源表达及其在食品、饲料等领域的应用等方面进行了介绍,以期为该酶的推广应用提供帮助。 展开更多

关键词 裂解多糖单加氧酶 生物能源 纤维素酶促进剂 多糖降解

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一株产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及酶学性质研究 被引量：18

5

作者 刘德海 郝益民 +4 位作者 岳丹丹 马焕 权淑静 丁冉冉 陈国参 《中国酿造》 CAS 2013年第6期47-51,60,共6页

研究以降解纤维二糖菌株为主要筛选对象,从酿造大曲样品中分离筛选获得产β-葡萄糖苷酶的真菌菌株D8,并对其进行了生物学鉴定,将其鉴定为梨头霉属(Absidia)的伞枝梨头霉菌(Lichtheimia corymbifera),并对其发酵所产β-葡萄糖苷酶酶学性... 研究以降解纤维二糖菌株为主要筛选对象,从酿造大曲样品中分离筛选获得产β-葡萄糖苷酶的真菌菌株D8,并对其进行了生物学鉴定,将其鉴定为梨头霉属(Absidia)的伞枝梨头霉菌(Lichtheimia corymbifera),并对其发酵所产β-葡萄糖苷酶酶学性质进行了研究,为其开发研究提供参考。 展开更多

关键词 Β-葡萄糖苷酶 伞枝梨头霉 18S RDNA 筛选 酶学性质

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石灰与黑麦草对Cu污染土壤的修复及对微生物群落的影响 被引量：10

6

作者 杜志敏 郭雪白 +7 位作者 王继雯 岳丹丹 周静 巩涛 杨文玲 甄静 慕琦 陈国参 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期515-521,共7页

通过盆栽试验研究了Cu污染土壤中添加不同剂量石灰(质量分数分别为0.1%、0.2%和0.4%,编号SH1、SH2和SH3)对黑麦草(Secale cereale)生长及Cu吸收、土壤Cu形态转化、土壤微生物群落变化等的影响,以此评价石灰对Cu污染土壤的修复效果。试... 通过盆栽试验研究了Cu污染土壤中添加不同剂量石灰(质量分数分别为0.1%、0.2%和0.4%,编号SH1、SH2和SH3)对黑麦草(Secale cereale)生长及Cu吸收、土壤Cu形态转化、土壤微生物群落变化等的影响,以此评价石灰对Cu污染土壤的修复效果。试验结果表明,石灰处理后黑麦草生物量及Cu吸收量均显著增加,黑麦草地上部及根系Cu含量均显著降低;SH1、SH2和SH3处理与对照相比,土壤pH显著升高,土壤可交换态Cu含量分别显著降低了58.47%、87.51%和74.54%,而碳酸盐结合态Cu含量显著增加,分别达到对照处理的1.36、1.93、1.56倍。Biolog测试结果表明,培养72 h时,石灰处理后土壤微生物AWCD值、基质丰富度S、Shannon、Simpson和Mc Intosh指数均有不同程度增加,表现为SH2>SH3>SH1>CK;石灰处理后土壤微生物群落的碳源利用模式发生明显变化,SH2处理可利用的碳源种类最多,碳源利用程度最高。研究表明,施用质量分数0.2%石灰并种植黑麦草对该Cu污染土壤具有较好修复效果。 展开更多

关键词 石灰 黑麦草 修复 CU 污染 BIOLOG

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磷灰石、石灰对Cd胁迫下黑麦草根形态及Cd吸收影响研究 被引量：10

7

作者 杜志敏 向凌云 +9 位作者 杜凯敏 杨文玲 王继雯 雷高 郭雪白 郭亮 周静 巩涛 陈国参 甄静 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期92-101,共10页

为考察磷灰石、石灰和黑麦草对Cd污染土壤的修复效果,通过盆栽试验研究了不同剂量磷灰石(0、6、12、24 g·kg^-1风干土,编号为CK、L1、L2、L3)和石灰(1、2、4 g·kg^-1风干土,编号为S1、S2、S3)对Cd胁迫下黑麦草生物量、根形态... 为考察磷灰石、石灰和黑麦草对Cd污染土壤的修复效果,通过盆栽试验研究了不同剂量磷灰石(0、6、12、24 g·kg^-1风干土,编号为CK、L1、L2、L3)和石灰(1、2、4 g·kg^-1风干土,编号为S1、S2、S3)对Cd胁迫下黑麦草生物量、根形态、黑麦草Cd含量、Cd富集量、富集系数、土壤pH、土壤有效态Cd含量等的影响。结果表明,磷灰石、石灰处理(L1,S1除外)显著增加了黑麦草生物量、根长、根表面积、根体积、根尖数、Cd富集量和土壤pH,显著降低了黑麦草Cd含量、Cd富集系数、根平均直径和土壤有效态Cd含量。相关性分析结果表明:除根平均直径为正相关关系外,黑麦草根长、根表面积、根体积、根尖数与土壤有效态Cd含量、黑麦草地上部分及根系Cd含量、Cd富集系数呈显著或极显著负相关关系;除根平均直径为负相关关系外,其他根指标与黑麦草地上部分及根系生物量、Cd富集量呈极显著正相关关系。其中,L3处理黑麦草地上部分及根系生物量达到CK处理(不添加改良剂)的176.0倍和174.4倍;根平均直径相比CK降低了29.4%,根长、根表面积、根体积和根尖数分别为CK处理的20.2、21.0、21.3倍和24.5倍;黑麦草地上部分及根系Cd富集量达到CK处理的89.6倍和100.9倍。研究表明,根形态受土壤有效态Cd含量的影响显著,并可通过影响黑麦草生物量及Cd吸收决定其Cd富集量,施用24 g·kg^-1的磷灰石并种植黑麦草能很好地修复Cd污染土壤。 展开更多

关键词 Cd 黑麦草 根形态 CD吸收 磷灰石 石灰

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一株产复合酶真菌菌株的筛选、鉴定及发酵产酶研究 被引量：9

8

作者 陈国参 刘德海 +4 位作者 解复红 贾彬 权淑静 马焕 张玉龙 《中国酿造》 CAS 2012年第9期70-74,共5页

从土壤样品中分离获得一株产复合酶的真菌菌株,将其命名为HKS11,进行了菌株形态特征观察,并在此基础上进行了分子生物学鉴定,经PCR扩增后测定菌株的18S rDNA基因测序,由18S rDNA基因序列比较分析,得知菌株HKS11与黑曲霉菌(Aspergillusni... 从土壤样品中分离获得一株产复合酶的真菌菌株,将其命名为HKS11,进行了菌株形态特征观察,并在此基础上进行了分子生物学鉴定,经PCR扩增后测定菌株的18S rDNA基因测序,由18S rDNA基因序列比较分析,得知菌株HKS11与黑曲霉菌(Aspergillusniger)和泡盛曲霉(Aspergillus awamori)亲缘关系最为接近,18S rDNA基因相似性达到99%以上,可初步判断为曲霉属(Aspergillus)。结合形态特征观察综合比较分析后,将其鉴定为曲霉属(Aspergillus)的黑曲霉菌(Aspergillus niger)。其18S rDNA GenBank中登录序列号为GenBankJX112703。并对其发酵产酶进行了研究。 展开更多

关键词 复合酶 真菌 18SrDNA 鉴定

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高产蛋白酶菌株的分离、鉴定及酶学性质研究 被引量：7

9

作者 冯菲 权淑静 +3 位作者 刘丽 王秋菊 胡虹 解复红 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第7期148-152,共5页

该研究旨在从非传统环境(磷矿)中分离、筛选高产胞外蛋白酶菌株,对菌株进行形态学观察、生理生化和分子生物学鉴定,并研究其蛋白酶的酶学性质。结果表明,分离筛选到一株蛋白酶高产菌株,编号为PB5,该菌株被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus... 该研究旨在从非传统环境(磷矿)中分离、筛选高产胞外蛋白酶菌株,对菌株进行形态学观察、生理生化和分子生物学鉴定,并研究其蛋白酶的酶学性质。结果表明,分离筛选到一株蛋白酶高产菌株,编号为PB5,该菌株被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),该菌株产胞外蛋白酶活力为562.3 U/mL,胞外蛋白酶的最适pH值为10,在pH 7~10有较好的pH稳定性;最适温度为60℃,20~50℃时有较好的稳定性;Na^(+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)、K^(+)对蛋白酶活力有明显的促进作用;Fe^(2+)、Ag^(+)、乙二胺四乙酸(EDTA)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、十二烷基硫酸钠(SDS)对蛋白酶活力有明显抑制效果。 展开更多

关键词 高产蛋白酶菌株 鉴定 酶学性质

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高产β-甘露聚糖酶菌株的分离鉴定及酶学性质研究 被引量：9

10

作者 陈晓飞 李珊珊 +2 位作者 刁文涛 徐紫瑜 刘德海 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第9期92-97,共6页

通过初筛和复筛从魔芋种植基地土壤样品中分离筛选高产β-甘露聚糖酶菌株。通过形态学观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,并对其产β-甘露聚糖酶酶学性质进行研究。结果表明,筛选出一株高产β-甘露聚糖酶的菌株,编号... 通过初筛和复筛从魔芋种植基地土壤样品中分离筛选高产β-甘露聚糖酶菌株。通过形态学观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,并对其产β-甘露聚糖酶酶学性质进行研究。结果表明,筛选出一株高产β-甘露聚糖酶的菌株,编号为HTGC-10,被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株HTGC-10在30℃、180 r/min条件下液体发酵24 h后,发酵液β-甘露聚糖酶活力为61.75 U/mL。酶学性质的研究结果表明,该菌株所产酶的最适反应pH值为6.0,在中性偏酸环境下稳定性较好,属于偏酸性酶;最适反应温度为55℃,热稳定性相对较差;乙二胺四乙酸(EDTA)和金属离子 Na^(+)、K^(+)、Mn^(2+)、NH_(4)^(+)、Mg^(2+)、Fe^(2+)、Cu^(2+)、Ca^(2+)对酶活力均有不同程度的抑制作用,其中Cu^(2+)对酶活力的抑制作用最显著。 展开更多

关键词 Β-甘露聚糖酶 分离 鉴定 酶学性质

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产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及其酶学性质研究 被引量：7

11

作者 马焕 权淑静 +3 位作者 刘德海 陈国参 陶尧堂 解复红 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第12期123-128,共6页

以木聚糖为唯一碳源,采用平板筛选和摇瓶发酵相结合的方法,从腐朽木头中分离、筛选到一株高产木聚糖酶菌株XE-13-1根据菌株的形态特征,并结合18S rDNA序列分析,初步鉴定菌株X E-13-1为桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)。经测定,菌株... 以木聚糖为唯一碳源,采用平板筛选和摇瓶发酵相结合的方法,从腐朽木头中分离、筛选到一株高产木聚糖酶菌株XE-13-1根据菌株的形态特征,并结合18S rDNA序列分析,初步鉴定菌株X E-13-1为桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)。经测定,菌株X E-13-1所产木聚糖酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值7,具有较好的pH稳定性。在30℃、pH 5~10的条件下保温2 h,该酶仍具有78%以上的酶活力。Mg^(2+)、Fe^(2+)、K^+、Zn^(2+)对该酶具有明显的促进作用,Cu^(2+)对该酶具有明显的抑制作用。酶学性质研究结果表明,该酶在工业应用上具有较好的前景。 展开更多

关键词 木聚糖酶 桔绿木霉 酶学性质

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α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质研究 被引量：4

12

作者 刁文涛 向凌云 +5 位作者 宁萌 王雪妍 马焕 冯菲 陈国参 周伏忠 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第8期60-66,共7页

利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,成功异源表达了一株链球菌(Streptococcus)S1的α-半乳糖苷酶基因,重组α-半乳糖苷酶经镍柱纯化后,测定其酶学性质。重组α-半乳糖苷酶最适pH值为6.5,最... 利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,成功异源表达了一株链球菌(Streptococcus)S1的α-半乳糖苷酶基因,重组α-半乳糖苷酶经镍柱纯化后,测定其酶学性质。重组α-半乳糖苷酶最适pH值为6.5,最适温度为50℃,在碱性环境中(pH 7.5~10.0)及在40℃以下温度条件下该酶较为稳定;酶催化动力学结果显示,该酶在最适条件下水解硝基苯-α-D-半乳糖苷(pNPG)的最大水解速率(Vmax)为508.38μmol/(min·mg),米氏常数(Km)值为1.2 mmol/L;通过薄层层析(TLC)法检测到该重组α-半乳糖苷酶可以高效地水解天然底物蜜二糖、棉籽糖和水苏糖中的α-半乳糖苷键。 展开更多

关键词 链球菌 大肠杆菌 异源表达 重组α-半乳糖苷酶 酶学性质

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构树饲料的发酵制作方法研究 被引量：15

13

作者 刘丽 高正龙 +5 位作者 张秀江 王品胜 向凌云 方玉梅 王洋 解复红 《中国饲料》 北大核心 2020年第13期6-14,共9页

营养成分丰富、具有多功能功效的构树资源,作为一种极具开发潜力的非常规蛋白饲料原料成为近年来的研究热点。随着抗生素饲料的禁止使用,发酵构树饲料作为一种可替代抗生素饲料的新产品应运而生,因此对构树饲料的发酵制作方法进行研究... 营养成分丰富、具有多功能功效的构树资源,作为一种极具开发潜力的非常规蛋白饲料原料成为近年来的研究热点。随着抗生素饲料的禁止使用,发酵构树饲料作为一种可替代抗生素饲料的新产品应运而生,因此对构树饲料的发酵制作方法进行研究具有重要现实意义。本文对构树作为饲料原料的发酵制作方法进行了研究综述,并对构树的多营养成分及其他功能应用进行了分析,以期对我国饲料产业健康持续发展和构树扶贫工程提供一些理论支持。 展开更多

关键词 构树 构树饲料 发酵制作方法

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一株产酸性α-淀粉酶菌株的筛选及酶学性质研究 被引量：5

14

作者 权淑静 解复红 +2 位作者 马焕 刘德海 陈国参 《中国酿造》 CAS 2014年第5期104-108,共5页

从酿造大曲中筛选到高产α-淀粉酶菌株A-5-3,对其进行生物学鉴定,鉴定结果为黑曲霉;对其发酵液进行酶学性质初步研究,结果表明：该酶的最适pH值为3.6,最适温度为70℃,热稳定性良好.在pH3.0～5.0之间,具有很好的酸稳定性且为非Ca2＋依赖... 从酿造大曲中筛选到高产α-淀粉酶菌株A-5-3,对其进行生物学鉴定,鉴定结果为黑曲霉;对其发酵液进行酶学性质初步研究,结果表明：该酶的最适pH值为3.6,最适温度为70℃,热稳定性良好.在pH3.0～5.0之间,具有很好的酸稳定性且为非Ca2＋依赖型水解酶,在工业生产上有良好的应用前景. 展开更多

关键词 酸性Α-淀粉酶 黑曲霉 酶学性质

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磷灰石联合黑麦修复铜污染土壤研究 被引量：3

15

作者 杜志敏 郭雪白 +7 位作者 甄静 罗宏基 周静 王继雯 岳丹丹 巩涛 杨文玲 陈国参 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期330-337,共8页

通过田间试验研究了不同剂量磷灰石(10、20、30、50 g/kg,编号分别为LH1、LH2、LH3和LH4)与黑麦联合作用对Cu污染土壤的修复效果,重点考察了磷灰石对黑麦生物量及Cu吸收、土壤pH及Cu形态转化、土壤酶活性、植物生理指标等的影响。试验... 通过田间试验研究了不同剂量磷灰石(10、20、30、50 g/kg,编号分别为LH1、LH2、LH3和LH4)与黑麦联合作用对Cu污染土壤的修复效果,重点考察了磷灰石对黑麦生物量及Cu吸收、土壤pH及Cu形态转化、土壤酶活性、植物生理指标等的影响。试验结果表明,磷灰石显著提高了土壤pH、黑麦生物量及其Cu吸收量,显著降低了黑麦地上部分及根系Cu含量,其中LH3处理黑麦Cu吸收量最高,达到对照处理的33.38倍;与对照相比,LH1、LH2、LH3和LH4处理土壤可交换态Cu含量显著降低了37.0%、58.9%、89.0%和83.3%,碳酸盐结合态Cu含量显著增加了46.6%、63.1%、78.0%和93.3%;与对照相比,LH2、LH3和LH4处理显著提高了土壤磷酸酶、过氧化氢酶和脲酶活性,显著提高了黑麦SOD和POD酶活性,显著降低了黑麦MDA含量。综合而言,施用30 g/kg的磷灰石并种植黑麦能够很好地修复Cu污染土壤。 展开更多

关键词 磷灰石 黑麦 修复 铜 土壤酶活性 植物生理指标

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植物提取物在畜禽除臭生产中的应用和作用机理研究 被引量：3

16

作者 刘丽 张秀江 +5 位作者 向凌云 解复红 冯菲 马焕 李磊 胡虹 《中国饲料》 北大核心 2022年第23期1-10,共10页

畜禽除臭方法有多种,植物提取物作为添加剂应用是一种环保、经济、高效的畜禽除臭方法,其在畜牧业生产中较微生物菌剂等其他除臭方法应用少且除臭作用机理有待进一步深入研究。基于此,本文对植物提取物在畜禽生产中的除臭应用和除臭作... 畜禽除臭方法有多种,植物提取物作为添加剂应用是一种环保、经济、高效的畜禽除臭方法,其在畜牧业生产中较微生物菌剂等其他除臭方法应用少且除臭作用机理有待进一步深入研究。基于此,本文对植物提取物在畜禽生产中的除臭应用和除臭作用机理进行了系统梳理和分析,希望为畜牧行业相关生产人员和研究人员提供一些参考,助力于畜牧行业健康、持续、和谐发展。 展开更多

关键词 植物提取物 畜禽除臭 应用 作用机理

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1株纳豆激酶高产菌株的分离·筛选与复合诱变研究 被引量：3

17

作者 巩涛 魏传军 +2 位作者 安明理 宁萌 周伏忠 《安徽农业科学》 CAS 2021年第15期159-161,175,共4页

为选育纳豆激酶(Nattokinase,NK)高活性菌株,从4种不同风味食品中分离得到26株菌株,通过酪蛋白平板初筛和液体发酵复筛,得到2株纳豆激酶高产菌株,利用分子生物学技术鉴定为2株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。采用氯化锂-紫外与亚硝基... 为选育纳豆激酶(Nattokinase,NK)高活性菌株,从4种不同风味食品中分离得到26株菌株,通过酪蛋白平板初筛和液体发酵复筛,得到2株纳豆激酶高产菌株,利用分子生物学技术鉴定为2株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。采用氯化锂-紫外与亚硝基胍(NTG)复合诱变的方式,最终获得1株纳豆激酶活性达到2338.01 U/mL的高产菌株SD3-3-6,该突变菌株纳豆激酶酶活相较于初始菌株SD3提高了1.93倍,是1株具有应用前景的高产菌株。 展开更多

关键词 纳豆 纳豆激酶 多肽 复合诱变 芽孢杆菌

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昆明假单胞菌HL22-2海藻糖合酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 被引量：1

18

作者 王一雯 马焕 +6 位作者 权淑静 陈国参 王佰涛 安明理 刘德海 王有科 解复红 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第1期154-159,共6页

采用热不对称交错聚合酶链式反应(Tail-PCR)克隆云南磷矿来源昆明假单胞菌(Pseudomonas kunmingensis)HL22-2的海藻糖合酶(TreS)基因HL22-2TreS,将该基因与表达载体pETM3C连接后在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)pLysS中进行异源表... 采用热不对称交错聚合酶链式反应(Tail-PCR)克隆云南磷矿来源昆明假单胞菌(Pseudomonas kunmingensis)HL22-2的海藻糖合酶(TreS)基因HL22-2TreS,将该基因与表达载体pETM3C连接后在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)pLysS中进行异源表达,通过Ni-NTA柱纯化重组酶HL22-2TreS,并对其酶学特性进行分析。结果表明,HL22-2TreS基因全长3336 bp,编码1111个氨基酸,氨基酸序列与Genbank数据库中相关的海藻糖合酶具有极高的相似性。重组酶HL22-2TreS的分子质量约126 kDa,该酶的最适反应温度和pH值分别为40℃和7.0,在温度20~50℃及pH值6.0~9.0条件下比较稳定,Cu2+、Hg2+、Ba2+及Al3+对海藻糖合酶的活力有强烈的抑制效果。HL22-2TreS基因对麦芽糖和海藻糖的米氏常数(Km)分别为20.6 mmol/L和87.5 mmol/L,对麦芽糖具有更高的亲和性,更容易将麦芽糖转化成海藻糖。 展开更多

关键词 昆明假单胞菌 海藻糖合酶 克隆 表达 酶学性质

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产几丁质酶高原菌的分离鉴定及酶学性质初步研究 被引量：1

19

作者 权淑静 杨文玲 +4 位作者 雷高 王佰涛 刁文涛 梁博 刘德海 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第11期152-156,共5页

该研究通过透明圈法进行菌株初筛和几丁质酶活力测定进行复筛,从西藏日喀则地区土壤中分离筛选高产几丁质酶的菌株,通过形态观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,并对其产酶酶学性质进行初步研究,同时利用薄层层析(TLC... 该研究通过透明圈法进行菌株初筛和几丁质酶活力测定进行复筛,从西藏日喀则地区土壤中分离筛选高产几丁质酶的菌株,通过形态观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,并对其产酶酶学性质进行初步研究,同时利用薄层层析(TLC)分析其对几丁质的酶解产物。结果表明,从西藏日喀则地区土壤中分离筛选到一株高产几丁质酶的菌株RGZ2-4-5,经鉴定为Massilia aquatica,其几丁质酶活力为242.36 U/mL。该菌株所产胞外几丁质酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为5.0,在温度30~40℃、pH 5.0~7.0条件下稳定性较好,金属离子Zn^(2+)、Mn^(2+)、Fe^(2+)、Cr^(2+)、Ag^(+)、Co^(2+)及苯甲基磺酰氟(PMSF)对酶活抑制作用显著(P<0.05),而其他金属离子对酶活无显著的促进或抑制作用(P>0.05)。该酶水解几丁质的最终产物为几丁二糖[(GlcNAc)2]和几丁单糖(GlcNAc)。 展开更多

关键词 几丁质酶 筛选 鉴定 酶学性质 薄层层析

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青藏高原土壤低温产蛋白酶菌株的筛选及酶学性质研究 被引量：6

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作者 权淑静 马焕 +2 位作者 王一雯 解复红 刘德海 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第5期66-70,共5页

从青藏高原土壤样品分离保藏的菌种中筛选到低温条件下产蛋白酶菌株LS20-2,对其进行生理生化试验以及分子生物学鉴定,并对其发酵液进行酶学性质初步研究。结果表明,该菌被鉴定为皮氏类芽孢杆菌(Paenibacillus peoriae),产蛋白酶的最适反... 从青藏高原土壤样品分离保藏的菌种中筛选到低温条件下产蛋白酶菌株LS20-2,对其进行生理生化试验以及分子生物学鉴定,并对其发酵液进行酶学性质初步研究。结果表明,该菌被鉴定为皮氏类芽孢杆菌(Paenibacillus peoriae),产蛋白酶的最适反应p H值为7.0,最适温度为40℃。在p H5.0~7.0之间、温度0~40℃时酶活稳定,金属离子Fe^(2+)、Zn^(2+)及Triten X-100能抑制蛋白酶活性,金属离子Mn^(2+)及表面活性剂Tween-20、Tween-80能提高蛋白酶活性。 展开更多

关键词 蛋白酶 皮氏类芽孢杆菌 鉴定 酶学性质

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