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六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路抗氧化应激防治阿尔茨海默病的机制研究
被引量:
9
1
作者
蔡菊
袁永
+4 位作者
宋军营
贾亚泉
谢治深
曾华辉
张振强
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023年第3期1002-1010,共9页
目的观察六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路对H_(2)O_(2)诱导海马神经元细胞(HT22)氧化损伤的保护作用,探讨其防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)的作用机制。方法(1)以过氧化氢(Hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))诱导HT22细胞,通过噻唑...
目的观察六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路对H_(2)O_(2)诱导海马神经元细胞(HT22)氧化损伤的保护作用,探讨其防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)的作用机制。方法(1)以过氧化氢(Hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))诱导HT22细胞,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,DCFH-DA荧光染色法检测细胞内ROS含量,构建基于氧化应激损伤的早期AD细胞模型;(2)制备六味地黄丸含药血清(Medicated Serum of Liuwei Dihuang Pill,MSLDP),分别设置空白组、模型组、MSLDP组,检测细胞内SOD活力、MDA及ROS含量的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞内Nrf2、HO-1及NQO1等因子的mRNA的转录水平及蛋白表达量的变化;(3)采用Nrf2的抑制剂(ML385)抑制细胞内Nrf2的激活,RT-qPCR及Western blot法检测各组细胞内Nrf2、HO-1、NQO1等因子mRNA的转录水平及蛋白表达量的变化。结果(1)经H_(2)O_(2)诱导后;随着H_(2)O_(2)诱导浓度的增高和时间的增长,细胞活性逐渐降低,细胞内的ROS含量则逐渐升高,细胞内氧化应激与H_(2)O_(2)诱导浓度和时间呈正相关。(2)模型组细胞内ROS和MDA含量较空白组升高,SOD活力下降,Nrf2与Keap1解离并入核,其下游HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达量升高;MSLDP组细胞内的ROS和MDA含量降低,SOD活力升高,Nrf2进一步入核,细胞内Keap1、HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达水平也进一步升高;(3)使用ML385抑制Nrf2后,MSLDP不再上调Nrf2及下游HO-1、NQO1蛋白的转录及表达。结论六味地黄丸对AD模型细胞中的氧化应激具有明显的保护作用,其机制可能是通过调节Nrf2/HO-1通路中抗氧化因子的表达量来实现的。
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关键词
六味地黄丸
阿尔兹海默症
HT22细胞
氧化应激
Nrf2/HO-1通路
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职称材料
六味地黄丸介导RAGE抑制MMP-2/MMP-9对Aβ_(1-40)损伤bEnd.3细胞紧密连接蛋白的影响
被引量:
1
2
作者
丁蕊
袁永
+3 位作者
贾亚泉
高爱社
张振强
宋军营
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期424-430,共7页
目的探讨六味地黄丸对β淀粉样蛋白1-40(Aβ_(1-40))损伤的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的保护作用及其机制。方法采用CCK8法检测Aβ_(1-40)和六味地黄丸含药血清(MSLDP)对细胞活性的影响,筛选合适的作用浓度。将bEnd.3细胞分为对照组...
目的探讨六味地黄丸对β淀粉样蛋白1-40(Aβ_(1-40))损伤的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的保护作用及其机制。方法采用CCK8法检测Aβ_(1-40)和六味地黄丸含药血清(MSLDP)对细胞活性的影响,筛选合适的作用浓度。将bEnd.3细胞分为对照组、Aβ_(1-40)组、MSLDP+Aβ_(1-40)组和MSLDP组,采用Western blot检测低密度脂蛋白相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达,免疫荧光检测LRP1、RAGE、ZO-1表达;再将bEnd.3细胞分为对照组、Aβ_(1-40)组、FPS-ZM1(RAGE抑制剂)+Aβ_(1-40)组和FPS-ZM1+Aβ_(1-40)+MSLDP组,Western blot检测RAGE、MMP-9、MMP-2、ZO-1蛋白表达。结果Aβ_(1-40)呈剂量依赖性降低bEnd.3细胞活性(P<0.01),MSLDP对Aβ_(1-40)损伤的细胞活性具有保护作用(P<0.05,P<0.01),因此选择10μmol/L Aβ_(1-40)和10%MSLDP进行后续实验。与对照组比较,Aβ_(1-40)组RAGE、MMP-2、MMP-9蛋白表达升高(P<0.01),LRP1、ZO-1、BDNF蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),并且LRP1、ZO-1荧光强度降低(P<0.01),RAGE荧光增强(P<0.01);与Aβ_(1-40)组比较,MSLDP组RAGE、MMP-2、MMP-9蛋白表达和RAGE荧光强度降低(P<0.05,P<0.01),而LRP1、ZO-1、BDNF蛋白表达和LRP1、ZO-1荧光强度升高(P<0.05,P<0.01)。与Aβ_(1-40)组比较,Aβ_(1-40)+FPS-ZM1组MMP-2、MMP9、RAGE蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),ZO-1蛋白表达升高(P<0.05);Aβ_(1-40)+FPS-ZM1+MSLDP组MMP-2、MMP9、RAGE蛋白表达降低(P<0.01),ZO-1蛋白表达升高(P<0.01),FPS-ZM1和MSLDP联合使用的效果更佳。结论六味地黄丸能够保护Aβ_(1-40)损伤的脑微血管内皮的细胞紧密连接,减轻血脑屏障障碍,保护神经血管单元防治阿尔茨海默病,可能通过调节RAGE途径抑制MMP-2/MMP-9途径实现。
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关键词
六味地黄丸
阿尔茨海默病
脑微血管内皮细胞
β淀粉样蛋白1-40(Aβ_(1-40))
晚期糖基化终末产物受体(RAGE)
基质金属蛋白酶家族(MMPs)
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职称材料
题名
六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路抗氧化应激防治阿尔茨海默病的机制研究
被引量:
9
1
作者
蔡菊
袁永
宋军营
贾亚泉
谢治深
曾华辉
张振强
机构
河南
中医药大学中医药科学院
河南省神经退行性疾病防治工程研究中心
河南
中医药大学医学院
出处
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023年第3期1002-1010,共9页
基金
河南省科学技术厅中原科技创新领军人才计划资助项目(204200510022),六味地黄丸介导PPARγ/Nrf2/TXNIP信号通路防治早期老年痴呆的作用机制,负责人:张振强
河南省教育厅河南省高校科技创新团队支持计划(21IRTSTHN026):中西医结合防治重大慢性病,负责人:张振强
河南省教育厅河南省科技攻关项目(212102311084):六味地黄丸通过调控FoxO3a靶点防治早期AD的抗氧化功效研究,负责人:宋军营
文摘
目的观察六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路对H_(2)O_(2)诱导海马神经元细胞(HT22)氧化损伤的保护作用,探讨其防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)的作用机制。方法(1)以过氧化氢(Hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))诱导HT22细胞,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,DCFH-DA荧光染色法检测细胞内ROS含量,构建基于氧化应激损伤的早期AD细胞模型;(2)制备六味地黄丸含药血清(Medicated Serum of Liuwei Dihuang Pill,MSLDP),分别设置空白组、模型组、MSLDP组,检测细胞内SOD活力、MDA及ROS含量的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞内Nrf2、HO-1及NQO1等因子的mRNA的转录水平及蛋白表达量的变化;(3)采用Nrf2的抑制剂(ML385)抑制细胞内Nrf2的激活,RT-qPCR及Western blot法检测各组细胞内Nrf2、HO-1、NQO1等因子mRNA的转录水平及蛋白表达量的变化。结果(1)经H_(2)O_(2)诱导后;随着H_(2)O_(2)诱导浓度的增高和时间的增长,细胞活性逐渐降低,细胞内的ROS含量则逐渐升高,细胞内氧化应激与H_(2)O_(2)诱导浓度和时间呈正相关。(2)模型组细胞内ROS和MDA含量较空白组升高,SOD活力下降,Nrf2与Keap1解离并入核,其下游HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达量升高;MSLDP组细胞内的ROS和MDA含量降低,SOD活力升高,Nrf2进一步入核,细胞内Keap1、HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达水平也进一步升高;(3)使用ML385抑制Nrf2后,MSLDP不再上调Nrf2及下游HO-1、NQO1蛋白的转录及表达。结论六味地黄丸对AD模型细胞中的氧化应激具有明显的保护作用,其机制可能是通过调节Nrf2/HO-1通路中抗氧化因子的表达量来实现的。
关键词
六味地黄丸
阿尔兹海默症
HT22细胞
氧化应激
Nrf2/HO-1通路
Keywords
Liuwei Dihuang Pills
Alzheimer’s disease
HT22 cell
Oxidative Stress
Nrf2/HO-1 pathway
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
六味地黄丸介导RAGE抑制MMP-2/MMP-9对Aβ_(1-40)损伤bEnd.3细胞紧密连接蛋白的影响
被引量:
1
2
作者
丁蕊
袁永
贾亚泉
高爱社
张振强
宋军营
机构
河南
中医药大学中医药科学院
河南
中医药大学医学院
河南省神经退行性疾病防治工程研究中心
出处
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期424-430,共7页
基金
国家自然科学基金(U1504829)
中原科技创新领军人才项目(204200510022)
+3 种基金
河南省自然科学基金面上项目(222300420483)
河南省高校科技创新团队支持计划(21IRTSTHN026)
河南省中医药科学研究专项重点课题(2018ZY1009)
河南省科技攻关项目(212102311084)。
文摘
目的探讨六味地黄丸对β淀粉样蛋白1-40(Aβ_(1-40))损伤的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的保护作用及其机制。方法采用CCK8法检测Aβ_(1-40)和六味地黄丸含药血清(MSLDP)对细胞活性的影响,筛选合适的作用浓度。将bEnd.3细胞分为对照组、Aβ_(1-40)组、MSLDP+Aβ_(1-40)组和MSLDP组,采用Western blot检测低密度脂蛋白相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达,免疫荧光检测LRP1、RAGE、ZO-1表达;再将bEnd.3细胞分为对照组、Aβ_(1-40)组、FPS-ZM1(RAGE抑制剂)+Aβ_(1-40)组和FPS-ZM1+Aβ_(1-40)+MSLDP组,Western blot检测RAGE、MMP-9、MMP-2、ZO-1蛋白表达。结果Aβ_(1-40)呈剂量依赖性降低bEnd.3细胞活性(P<0.01),MSLDP对Aβ_(1-40)损伤的细胞活性具有保护作用(P<0.05,P<0.01),因此选择10μmol/L Aβ_(1-40)和10%MSLDP进行后续实验。与对照组比较,Aβ_(1-40)组RAGE、MMP-2、MMP-9蛋白表达升高(P<0.01),LRP1、ZO-1、BDNF蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),并且LRP1、ZO-1荧光强度降低(P<0.01),RAGE荧光增强(P<0.01);与Aβ_(1-40)组比较,MSLDP组RAGE、MMP-2、MMP-9蛋白表达和RAGE荧光强度降低(P<0.05,P<0.01),而LRP1、ZO-1、BDNF蛋白表达和LRP1、ZO-1荧光强度升高(P<0.05,P<0.01)。与Aβ_(1-40)组比较,Aβ_(1-40)+FPS-ZM1组MMP-2、MMP9、RAGE蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),ZO-1蛋白表达升高(P<0.05);Aβ_(1-40)+FPS-ZM1+MSLDP组MMP-2、MMP9、RAGE蛋白表达降低(P<0.01),ZO-1蛋白表达升高(P<0.01),FPS-ZM1和MSLDP联合使用的效果更佳。结论六味地黄丸能够保护Aβ_(1-40)损伤的脑微血管内皮的细胞紧密连接,减轻血脑屏障障碍,保护神经血管单元防治阿尔茨海默病,可能通过调节RAGE途径抑制MMP-2/MMP-9途径实现。
关键词
六味地黄丸
阿尔茨海默病
脑微血管内皮细胞
β淀粉样蛋白1-40(Aβ_(1-40))
晚期糖基化终末产物受体(RAGE)
基质金属蛋白酶家族(MMPs)
Keywords
Liuwei Dihuang Pills
Alzheimer’s disease
brain microvascular endothelial cells
β-Amyloid protein1-40(Aβ_(1-40))
receptor for advanced glycation end products(RAGE)
matrix metalloproteinases(MMPs)
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路抗氧化应激防治阿尔茨海默病的机制研究
蔡菊
袁永
宋军营
贾亚泉
谢治深
曾华辉
张振强
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023
9
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职称材料
2
六味地黄丸介导RAGE抑制MMP-2/MMP-9对Aβ_(1-40)损伤bEnd.3细胞紧密连接蛋白的影响
丁蕊
袁永
贾亚泉
高爱社
张振强
宋军营
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
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职称材料
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