河南省副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验 被引量：1

1

作者 朱文豪 徐引弟 +5 位作者 方剑玉 王治方 张青娴 焦文强 李海利 许峰 《养猪》 2017年第5期102-104,共3页

从河南省内不同县市的部分猪场送检疑似感染副猪嗜血杆菌病病料中分离鉴定到9株致病菌。为防治疾病传播,控制疫情蔓延,对分离菌株进行病理剖检、细菌分离培养、生化鉴定以及PCR鉴定和药敏试验。结果表明,分离到的致病菌为副猪嗜血杆菌... 从河南省内不同县市的部分猪场送检疑似感染副猪嗜血杆菌病病料中分离鉴定到9株致病菌。为防治疾病传播,控制疫情蔓延,对分离菌株进行病理剖检、细菌分离培养、生化鉴定以及PCR鉴定和药敏试验。结果表明,分离到的致病菌为副猪嗜血杆菌。药敏试验显示9株分离菌株对氨苄西林、头孢噻呋、头孢他啶、氟苯尼考、阿奇霉素、阿莫西林高敏;对壮观霉素、左氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星敏感;对克林霉素、阿米卡星、卡那霉素、恩诺沙星不敏感或耐药;对红霉素、罗红霉素、新霉素、四环素、强力霉素敏感性不稳定,表现不一。 展开更多

关键词 猪 副猪嗜血杆菌 分离鉴定 药敏试验

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应用大蒜素缓解牛子宫内膜炎损伤的研究

2

作者 楚秋霞 陈付英 +6 位作者 冯亚杰 张子敬 师志海 施巧婷 王二耀 吕世杰 付晓鹤 《安徽农业科学》 2025年第6期85-88,共4页

[目的]研究大蒜素对牛子宫内膜炎损伤的治疗作用。[方法]采用脂多糖诱导牛子宫内膜上皮细胞建立炎性细胞模型,探讨大蒜素的抗炎机制。筛选最佳LPS浓度;通过ELISA方法、荧光定量PCR技术和Western blot方法分别检测细胞炎症因子的含量、m... [目的]研究大蒜素对牛子宫内膜炎损伤的治疗作用。[方法]采用脂多糖诱导牛子宫内膜上皮细胞建立炎性细胞模型,探讨大蒜素的抗炎机制。筛选最佳LPS浓度;通过ELISA方法、荧光定量PCR技术和Western blot方法分别检测细胞炎症因子的含量、mRNA相对表达量和蛋白相对表达量。[结果]不同浓度的LPS均能够提高细胞的增殖量,当LPS浓度为30μg/mL时细胞活力最高。与炎性细胞相比,大蒜素可抑制LPS诱导的子宫内膜上皮细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8炎性因子的分泌,也能降低IL-1β、TLR4和NF-κβp65的基因转录水平。Western blot分析结果表明,大蒜素能够抑制TLR4和NF-κβp65蛋白的表达。[结论]大蒜素能够抑制TLR4/NF-κβ信号通路,通过调节细胞炎症因子的分泌发挥抗炎活性。 展开更多

关键词 牛子宫内膜上皮细胞 大蒜素 炎性反应 细胞因子

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利用混池重测序鉴定萨福克绵羊超数排卵关键调控基因 被引量：5

3

作者 滑留帅 辛晓玲 +6 位作者 王璟 罗生金 曾滔 巴提玛 施巧婷 徐照学 王二耀 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1615-1623,共9页

旨在对萨福克绵羊超数排卵处理基础上,通过基因组混池重测序鉴定影响超数排卵效果的关键调控基因。本研究对93头年龄在2~3岁之间、健康状况良好的萨福克供体绵羊进行超数排卵处理后,选取超数排卵效果良好(获得的胚胎数大于等于15枚)的3... 旨在对萨福克绵羊超数排卵处理基础上,通过基因组混池重测序鉴定影响超数排卵效果的关键调控基因。本研究对93头年龄在2~3岁之间、健康状况良好的萨福克供体绵羊进行超数排卵处理后,选取超数排卵效果良好(获得的胚胎数大于等于15枚)的30头个体组建高产群体,同时选取超数排卵效果不良(获得的胚胎数小于等于9枚)的30头个体组建低产群体。对2个群体进行基因组混池重测序,并对2个群体中发现的SNPs进行选择消除分析和基因富集分析。结果表明,超数排卵获得头均总胚胎数为(12.55±7.97)枚,头均可用胚胎数为(7.76±7.43)枚。构建的高产群体和低产群体平均可用胚胎分别为(14.97±8.38)枚和(2.27±2.10)枚。在高产群体和低产群体中分别检出20 189 224和20 396 751个SNPs,对这些SNPs进行选择消除分析和基因富集分析表明,共有11个候选基因能够影响萨福克绵羊超数排卵过程,其中7个基因属于HOXA基因家族,2个基因尚未被验证功能,剩余2个基因分别为DPH6和AKAP6。总体来讲,基于对萨福克绵羊超数排卵高产群体和低产群体的基因组混池重测序,共筛选得到11个关键调控基因,进一步验证HOXA基因家族、DPH6和AKAP6基因在卵泡发育中的作用将有助于解释家畜超数排卵调控机制。 展开更多

关键词 萨福克绵羊 超数排卵 基因组混池 重测序 调控基因

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牛环曲病毒河南分离株的遗传进化分析 被引量：10

4

作者 师志海 徐照学 +1 位作者 兰亚莉 王文佳 《动物医学进展》 北大核心 2019年第10期28-31,共4页

2018年在河南地区规模化牛场进行犊牛腹泻流行病学调查时,在粪便样品中检测到4株牛环曲病毒,分别命名BToV/CH/HN-1、BToV/CH/HN-2、BToV/CH/HN-3和BToV/CH/HN-4。对4个毒株的M基因进行克隆、测序与分析,结果表明,4个BToV毒株之间的基因... 2018年在河南地区规模化牛场进行犊牛腹泻流行病学调查时,在粪便样品中检测到4株牛环曲病毒,分别命名BToV/CH/HN-1、BToV/CH/HN-2、BToV/CH/HN-3和BToV/CH/HN-4。对4个毒株的M基因进行克隆、测序与分析,结果表明,4个BToV毒株之间的基因核酸序列同源性为97.4%~100%,与欧洲BToV代表株同源性最高(95.6%~99.5%)。遗传进化分析表明,4个毒株均属于欧洲谱系的牛源进化分支。提示我国牛群中存在环曲病毒感染,丰富了牛环曲病毒的流行病学资料,可为制定综合防控措施提供参考依据。 展开更多

关键词 牛环曲病毒 序列分析 遗传进化分析

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2型猪链球菌河南株的生物学特性研究 被引量：6

5

作者 王治方 徐引弟 +7 位作者 张青娴 朱文豪 焦文强 李海利 许峰 王克领 张彬 娄治国 《养猪》 2020年第3期97-102,共6页

从河南省豫东某规模化猪场保育猪群发生疫情的病死猪脑组织分离得到一株细菌,通过对该株细菌纯化鉴定、血清型分型鉴定、致病性试验及毒力基因检测、药敏试验和耐药基因检测等一系列研究,结果表明,该株细菌鉴定为2型猪链球菌,毒力较强,... 从河南省豫东某规模化猪场保育猪群发生疫情的病死猪脑组织分离得到一株细菌,通过对该株细菌纯化鉴定、血清型分型鉴定、致病性试验及毒力基因检测、药敏试验和耐药基因检测等一系列研究,结果表明,该株细菌鉴定为2型猪链球菌,毒力较强,为携带胞外因子epf基因、溶血素sly基因、溶菌酶释放蛋白mrp基因的3个毒力基因的强毒力菌株;该菌株对头孢他啶、阿莫西林、氨苄西林、青霉素、复方新诺明、左氟沙星、氧氟沙星等β-内酰胺类、磺胺类和喹诺酮类药物敏感;对氨基糖苷类、四环素类和大环内酯类药物高度耐药,携带有β-内酰胺类耐药基因blaTEM和氨基糖苷类耐药基因strB。该研究对临床防控猪链球菌病具有重要意义。 展开更多

关键词 猪链球菌 分型鉴定 毒力基因 药敏试验 耐药基因

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鸡毒支原体河南株的分离鉴定及生物学特性研究 被引量：4

6

作者 徐引弟 焦文强 +4 位作者 王治方 李海利 张青娴 朱文豪 王克领 《山东农业科学》 2018年第11期124-128,共5页

为确诊2017年4月引起河南省许昌市某蛋鸡场蛋鸡发生呼吸道、关节疾病的病原,采集发生呼吸困难、关节肿大蛋鸡的肺、气管、关节液共21份病料,通过病原分离培养、16S rRNA基因序列测定比对,确定病原为鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum... 为确诊2017年4月引起河南省许昌市某蛋鸡场蛋鸡发生呼吸道、关节疾病的病原,采集发生呼吸困难、关节肿大蛋鸡的肺、气管、关节液共21份病料,通过病原分离培养、16S rRNA基因序列测定比对,确定病原为鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG),共分离鉴定12株鸡毒支原体。对其中分离自肺的毒株HNMga1进行16S rRNA序列分析、动物试验和药敏试验,发现该菌对鸡具有较强毒力,对大观霉素、环丙沙星、左氟沙星、林可霉素、氟苯尼考、乙酰螺旋霉素、克林霉素最为敏感。本研究为下一步研制鸡毒支原体的诊断试剂和筛选疫苗毒株打下基础,同时为鸡毒支原体病的诊断和防治提供了依据。 展开更多

关键词 鸡毒支原体 分离鉴定 毒力 药敏试验

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副猪嗜血杆菌河南分离株的优势血清型和毒力基因研究 被引量：8

7

作者 张青娴 徐引弟 +3 位作者 王治方 朱文豪 焦文强 李海利 《养猪》 2020年第6期89-93,共5页

为了解河南省副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的血清型和毒力基因的流行与分布情况,对2017-2018年河南地区分离到的46株HPS,利用PCR反应鉴定血清型与毒力基因。结果显示,46株HPS共检测出7种血清型(2、4、5/12、6、7、11、13),... 为了解河南省副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的血清型和毒力基因的流行与分布情况,对2017-2018年河南地区分离到的46株HPS,利用PCR反应鉴定血清型与毒力基因。结果显示,46株HPS共检测出7种血清型(2、4、5/12、6、7、11、13),血清型5/12和4为优势血清型,最流行的血清型为5/12型(15/46,32.6%),其次是4型(12/46,26.1%)和7型(7/46,15.2%)。强毒株和中等毒力株含有大多数毒力基因,无毒力菌株一般只含有vta1、ompP2、nanH和espP2基因。可见,毒力基因与血清型有很强的相关性。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌 血清型 毒力基因

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2型猪链球菌河南株cps2J基因的遗传进化关系分析 被引量：2

8

作者 张青娴 徐引弟 +3 位作者 王治方 朱文豪 许峰 王克领 《养猪》 2020年第2期121-123,共3页

从河南某猪场断奶仔猪发生疫情的病死猪脑脊液中分离到一株细菌,经革兰氏染色初步确定为猪链球菌,应用PCR方法扩增猪链球菌谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,gdh)和荚膜多糖基因(capsular polysaccharide,cps)进行猪链球菌及血清... 从河南某猪场断奶仔猪发生疫情的病死猪脑脊液中分离到一株细菌,经革兰氏染色初步确定为猪链球菌,应用PCR方法扩增猪链球菌谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,gdh)和荚膜多糖基因(capsular polysaccharide,cps)进行猪链球菌及血清型鉴定,将阳性产物测序,并进行序列比较分析。结果表明,该分离株为2型猪链球菌,与参考菌株同源性在98%以上,其cps2J基因与人源致病性猪链球菌同源性达99.6%。 展开更多

关键词 2型猪链球菌 cps2J基因 遗传进化

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5型副猪嗜血杆菌河南分离株的毒力基因研究 被引量：1

9

作者 张青娴 徐引弟 +3 位作者 王治方 朱文豪 焦文强 李海利 《养猪》 2020年第5期105-109,共5页

为了探究豫北某猪场呼吸道疾病发病原因,通过PCR鉴定分离株血清型,检测了14个可能与致病力有关的毒力基因(lsgB、capD、vta1、vta2、vta3、wza、hhdA、hhdB、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP2),分析其与血清型可能存在的关系,并做... 为了探究豫北某猪场呼吸道疾病发病原因,通过PCR鉴定分离株血清型,检测了14个可能与致病力有关的毒力基因(lsgB、capD、vta1、vta2、vta3、wza、hhdA、hhdB、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP2),分析其与血清型可能存在的关系,并做了豚鼠致病性试验。结果显示,该分离株含有全部上述毒力基因,对豚鼠致病力强,为5型副猪嗜血杆菌强毒株。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌 血清型 毒力基因

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核桃青皮粉及其提取物对猪生长性能、胴体性状和肉品质的影响

10

作者 王璟 贾名扬 +6 位作者 陈俊峰 任巧玲 刘付玖 莫德林 张家庆 王磊 邢宝松 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2451-2459,共9页

【目的】研究核桃青皮粉及其提取物对育肥猪生长性能、胴体和肉质性状的影响。【方法】选取90头健康、体重约80 kg的“杜×长×大”三元杂交育肥阉公猪,随机分为3组,每组3个重复,每个重复10头猪。对照组育肥猪饲喂基础饲粮,核... 【目的】研究核桃青皮粉及其提取物对育肥猪生长性能、胴体和肉质性状的影响。【方法】选取90头健康、体重约80 kg的“杜×长×大”三元杂交育肥阉公猪,随机分为3组,每组3个重复,每个重复10头猪。对照组育肥猪饲喂基础饲粮,核桃青皮粉试验组及其提取物试验组分别在基础饲粮中添加0.1%核桃青皮粉和0.1%核桃青皮粉提取物。预试期10 d,正试期40 d。试验第41天,测定每头猪初始体重、终末体重及各组采食量。试验结束后,每个重复中选取2头体重接近平均体重的试验猪进行屠宰,测定胴体性状、肉质性状,以及背最长肌的氨基酸和脂肪酸含量。【结果】与对照组相比,饲粮中添加核桃青皮粉或其提取物对育肥猪末重、平均日增重、平均日采食量、料重比、胴体直长、胴体斜长、胴体重、屠宰率、眼肌面积、板油重以及背最长肌pH_(45 min)、滴水损失、加压损失、大理石纹评分、红度均无显著影响(P>0.05),但可显著提高育肥猪背膘厚、背最长肌黄度和肌内脂肪含量(P<0.05)。与对照组相比,除了组氨酸,核桃青皮粉组育肥猪背最长肌中其他氨基酸含量均有一定提高,而核桃青皮提取物组的氨基酸含量与对照组的差异不大,核桃青皮粉组和提取物组多不饱和脂肪酸总含量均比对照组含量有一定提高。【结论】饲粮添加0.1%核桃青皮粉及其提取物对生长性能和胴体性状无负面影响,二者均可改善育肥猪肉质性状,核桃青皮粉效果更佳。 展开更多

关键词 育肥猪 核桃青皮粉 核桃青皮提取物 肉质性状

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印记基因在孤雌生殖方面的研究进展

11

作者 彭晟坤 张子敬 +9 位作者 张格阳 张志浩 闵佳 李欣淼 王香南 施巧婷 祁兴山 黄永震 李惠侠 王二耀 《中国畜禽种业》 2024年第1期36-41,共6页

孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能... 孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能够通过孤雌生殖发育为正常个体的实例极为罕见。该文介绍了孤雌激活的方式,孤雌胚胎获取方式和印记基因在孤雌生殖中的应用,以期为未来孤雌生殖的相关应用提供思路。 展开更多

关键词 孤雌生殖 印记基因 孤雌激活 孤雌胚胎

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猪链球菌14型的分离鉴定及生物学特性研究 被引量：13

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作者 王治方 徐引弟 +8 位作者 张青娴 朱文豪 白红杰 焦文强 李海利 许峰 王克领 张彬 娄治国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1861-1869,共9页

为了检测确定2019年5月河南某规模化猪场一栋保育仔猪发病猪群的病原,本研究从送检的发病猪关节液中分离获得1株细菌。通过细菌纯化培养、革兰氏染色、形态学观察及猪链球菌gdh基因PCR扩增,确定该分离菌株为猪链球菌。用猪链球菌分型引... 为了检测确定2019年5月河南某规模化猪场一栋保育仔猪发病猪群的病原,本研究从送检的发病猪关节液中分离获得1株细菌。通过细菌纯化培养、革兰氏染色、形态学观察及猪链球菌gdh基因PCR扩增,确定该分离菌株为猪链球菌。用猪链球菌分型引物对该菌株进行PCR扩增分型鉴定及软件比对分析,结果表明该分离菌株为猪链球菌14型,与猪链球菌JS14株(GenBank登录号:CP002465.1)同源性为100%。毒力基因检测结果表明,该菌株的同时携带有epf、mrp、sly、fbps、orf2毒力基因,属于高致病性菌株。小鼠致病性试验结果也证明该菌株是一株高致病性猪链球菌。药物敏感性试验结果显示,该菌株对β内酰胺类和喹诺酮类药物敏感,对氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和磺胺类高度耐药,表现出多重耐药现象。对该菌株进行5大类24种耐药基因检测,该菌株同时携带有blaTEM、aadA1、strA、strB、aacC2、aphA1、tet(B)、gyrA、parC、sul2耐药基因。该研究为后续进一步开展猪链球菌14型流行特点和致病机制研究奠定了基础,为猪链球菌14型临床防控提供了理论依据,同时具有重要的公共卫生意义。 展开更多

关键词 链球菌14型 分型鉴定 毒力基因 药敏试验 耐药基因 猪

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牛诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：8

13

作者 师志海 王文佳 +5 位作者 兰亚莉 张彬 孟红丽 王亚州 滑留帅 徐照学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1728-1736,共9页

牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值... 牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102~2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好,相关系数R2=0.997,扩增效率为98.44%;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL-1;批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好。对2017年9月—2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%(25/221),采样场阳性率为92.86%(13/14)。本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 实时荧光定量PCR 犊牛腹泻 检测

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发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴差异表达基因筛选及分析 被引量：5

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作者 任巧玲 张家庆 +8 位作者 郭红霞 王献伟 王璟 吕玲燕 陈俊峰 马强 张彬 邢宝松 徐泽君 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第8期2864-2877,共14页

研究旨在分析发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴基因表达的差异,探讨母猪乏情调控的分子机制。选用6头健康的断奶初产母猪,分为发情组(3头)和乏情组(3头),屠宰后分别采集下丘脑、垂体、卵巢进行转录组测序(RNA-Seq)、GO功能富集、K... 研究旨在分析发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴基因表达的差异,探讨母猪乏情调控的分子机制。选用6头健康的断奶初产母猪,分为发情组(3头)和乏情组(3头),屠宰后分别采集下丘脑、垂体、卵巢进行转录组测序(RNA-Seq)、GO功能富集、KEGG通路及相关蛋白的Western blotting分析。结果发现,发情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52432800、52573730和52209252条clean reads,与猪参考基因组(Sus scrofa 11.1)的比对率分别为78.69%、81.49%和79.26%;乏情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52516724,52476820和52195962条clean reads,与猪参考基因组的比对率分别为82.38%、83.05%和80.20%。与发情组母猪相比,乏情组母猪下丘脑中共有710个差异表达基因,其中上调基因392个,下调基因318个;垂体中共有707个差异表达基因,其中上调基因283个,下调基因424个;卵巢中共有956个差异表达基因,其中上调基因635个,下调基因321个。3种组织中的共有差异表达基因为36个。与母猪情期调控相关的亲吻素-1(KISS1)、G-蛋白偶联受体54(GPR54)、速激肽3(TAC3)、速激肽3受体(TACR3)、17-α-羟化酶/17,20碳链裂解酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、类固醇激素合成急性调节蛋白(STAR)、促性腺激素释放激素受体(GnRHR)和雌激素受体1(ESR1)基因在乏情组母猪体内显著下调(P<0.05;P<0.01)。Western blotting分析结果显示,TAC3、TAC3R、KISS1和GPR54相关蛋白在乏情组母猪下丘脑中也显著下调(P<0.05)。GO和KEGG通路分析发现,差异表达基因显著富集于正调控胆固醇酯化反应、卵巢类固醇生成、GnRH信号通路、FoxO信号等一些与类固醇激素生成和卵泡发育相关的信号通路。本研究结果表明,发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴上与情期调控相关的基因存在差异表达,尤其是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR3两大系统的mRNA及蛋白表达水平在乏情组母猪下丘脑中均显著下调,推测可能是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR表达受损导致了下丘脑调节功能障碍,进而导致了初产母猪乏情。该研究为揭示初产母猪乏情分子调控机制提供了重要支持,为今后利用分子技术改善母猪乏情问题提供了重要理论依据。 展开更多

关键词 发情 乏情 初产母猪 下丘脑-垂体-卵巢轴 MRNA

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猪源产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的耐药性调查与耐药基因型分析 被引量：14

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作者 张青娴 徐引弟 +8 位作者 王治方 郎利敏 李海利 焦文强 朱文豪 张立宪 游一 许峰 王克领 《养猪》 2019年第4期105-108,共4页

为了解猪源产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌的耐药基因型分布情况,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证试验,采用PCR方法ESBLs耐药基因型分析。结果表明,60.21%(112/186)的猪源大肠杆菌菌株... 为了解猪源产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌的耐药基因型分布情况,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证试验,采用PCR方法ESBLs耐药基因型分析。结果表明,60.21%(112/186)的猪源大肠杆菌菌株为ESBLs阳性。blaCTX-M、blaTEM、blaSHV和blaOXA型ESBLs菌株检出率分别为91.07%、68.75%、4.46%和1.78%。由此可见,河南部分猪场大肠杆菌广泛流行ESBLs,流行的主要基因型为blaCTX-M型和blaCTX-M+blaTEM型,且多为复合基因型耐药菌株。 展开更多

关键词 大肠杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 基因型 耐药性

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猴源葡萄糖调节蛋白78生物信息学分析及其真核表达 被引量：3

16

作者 焦文强 刘运超 +5 位作者 邢广旭 陈鹏举 徐引弟 王治方 张青娴 许峰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第4期1170-1178,共9页

试验旨在探究葡萄糖调节蛋白78(glucose regulatory protein 78,GRP78)基因的理化性质和结构特点,阐述GRP78在猪流行性腹泻病毒复制中的分子伴侣作用和调控机制。通过RT-PCR方法扩增GRP78基因,并插入到pMD20-T Simple载体进行克隆测序,... 试验旨在探究葡萄糖调节蛋白78(glucose regulatory protein 78,GRP78)基因的理化性质和结构特点,阐述GRP78在猪流行性腹泻病毒复制中的分子伴侣作用和调控机制。通过RT-PCR方法扩增GRP78基因,并插入到pMD20-T Simple载体进行克隆测序,利用生物信息学方法对其氨基酸序列、跨膜结构、糖基化位点、磷酸化位点、三级结构等进行预测和分析。将GRP78基因插入pCDNA 3.1中,然后转染Vero-E6细胞。Western blotting检测Vero-E6细胞中GRP78的表达。生物信息学分析结果表明,GRP78基因全长1965 bp,编码654个氨基酸,蛋白质分子质量为72.33 ku,理论等电点为5.07,分子式为C_(3189)H_(5153)N_(865)O_(1019)S_(13)。遗传进化树分析显示,猴源GRP78基因与双峰驼、犬、猫、大猩猩、蝙蝠、狒狒、猪、马的氨基酸序列同源性为99.5%~99.8%;遗传进化分析显示,大猩猩和狒狒亲缘关系最为接近。跨膜区和信号肽预测结果显示,该蛋白存在信号肽但不存在跨膜结构。GRP78蛋白无N-糖基化修饰位点,存在6个O-糖基化位点、28个磷酸化位点,表明GRP78可能有与激酶磷酸化有关的PKC、PKA特异性蛋白激酶的结合位点,可能参与己糖代谢和单糖代谢。 展开更多

关键词 GRP78基因 生物信息学分析 真核表达

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一例副猪嗜血杆菌病的临床诊断与防治 被引量：3

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作者 张立宪 白红杰 +3 位作者 郎利敏 游一 朱文豪 王克领 《养猪》 2019年第6期109-110,共2页

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌引起的一种常见传染病,又称革拉塞氏病(Glasser’s disease),以多发性浆膜炎和关节炎性肿为特征病变,发病率15%~90%,主要危害2~28周龄仔猪和生长猪,特别是5~8周龄保育猪,可引发较为严重的身体多部位疾病[... 副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌引起的一种常见传染病,又称革拉塞氏病(Glasser’s disease),以多发性浆膜炎和关节炎性肿为特征病变,发病率15%~90%,主要危害2~28周龄仔猪和生长猪,特别是5~8周龄保育猪,可引发较为严重的身体多部位疾病[1],已成为当前对我国猪场断奶仔猪和保育猪危害最大的细菌性疫病之一。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌病 多发性浆膜炎 细菌性疫病 保育猪 常见传染病 生长猪 断奶仔猪 诊断与防治

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去势对淮南公猪背最长肌转录组的影响 被引量：1

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作者 王璟 滑留帅 +8 位作者 陈俊峰 张家庆 任巧玲 白红杰 郭红霞 徐照学 邢宝松 白献晓 曹海 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1548-1560,共13页

旨在分析去势对猪背最长肌基因表达的影响,探讨去势对肉质性状的分子调控机制。本研究将6头健康公猪分为两组,去势组和非去势组(对照组),在体重达到130 kg时(大约300~315日龄)采集背最长肌样品,利用Illumina HiSeq 2000高通量RNA-seq测... 旨在分析去势对猪背最长肌基因表达的影响,探讨去势对肉质性状的分子调控机制。本研究将6头健康公猪分为两组,去势组和非去势组(对照组),在体重达到130 kg时(大约300~315日龄)采集背最长肌样品,利用Illumina HiSeq 2000高通量RNA-seq测序技术对两组猪背最长肌进行转录组测序,使用DESeq软件筛选差异表达基因,并在GO和KEGG数据库中对这些差异表达基因进行功能注释和富集分析。结果显示,去势和非去势淮南公猪分别获得83 613 018和83 746 508条可用读段,与猪参考基因组(Sscrofa10.2)的比对率分别为73.78%和74.09%。与非去势组相比,去势后共有差异表达基因935个,其中上调基因503个,下调基因432个(P<0.05且|log2(Fold Change)|>0.8)。其中与肌肉发育相关上/下调最显著的基因分别是胶原蛋白XI型α1(COL11A1)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AGTR1),而与脂肪代谢相关上/下调最显著的基因分别是硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD-1)和脂肪特异性磷脂酶A2(PLA2G16)。GO和KEGG通路分析发现,两组差异表达基因显著富集于胰岛素、脂解、脂肪酸延长等脂质代谢相关通路,以及肾上腺素能、心肌收缩、磷酸腺苷活化的蛋白激酶等肌肉发育相关通路。本研究表明,去势后公猪脂肪沉积能力增强,肌肉发育改变,肉质性状随之改变。SCD-1、激素敏感脂酶(HSL)、葡萄糖转运体4(GLUT4)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)、促分裂原活化蛋白激酶(MEK)等12个差异表达基因能同时或部分参与激素分泌、脂肪沉积和肌肉发育的调控,这些基因与去势后肉质性状的改变显著相关,值得进行进一步的功能验证。 展开更多

关键词 淮南猪 肉质 转录组测序 肌肉发育 脂肪沉积

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副猪格拉菌血清2型毒力及耐药性分析 被引量：1

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作者 王治方 徐引弟 +5 位作者 朱文豪 焦文强 张青娴 李海利 许峰 王克领 《广东农业科学》 CAS 2023年第5期112-120,共9页

【目的】副猪格拉菌是引起猪格拉泽氏病的病原,是危害养猪业最为严重的细菌性病原之一,该菌血清型众多,不同血清型之间交叉保护力弱。血清2型是中等毒力毒株,近年来临床分离比例越来越高,危害越来越严重。从河南某规模化猪场保育猪群分... 【目的】副猪格拉菌是引起猪格拉泽氏病的病原,是危害养猪业最为严重的细菌性病原之一,该菌血清型众多,不同血清型之间交叉保护力弱。血清2型是中等毒力毒株,近年来临床分离比例越来越高,危害越来越严重。从河南某规模化猪场保育猪群分离到副猪格拉菌血清2型并进行系列试验,为科学防控该病提供参考。【方法】对副猪格拉菌临床疑似病例猪只无菌采集肺脏、气管、心血等样品,通过细菌分离纯化、革兰氏染色镜检、常规PCR、豚鼠致病性试验及琼脂扩散药敏试验等方法,对疑似细菌进行形态观察、鉴定、血清型分型、毒力基因检测、耐药基因检测、致病性和耐药性等一系列生物学特性研究。【结果】从肺脏样品中分离获得1株副猪格拉菌,经鉴定为血清2型,该菌株携带vta1、vta2、vta3、wza、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP2毒力基因,对豚鼠有较强的致病力。该菌株携带有aadA1、strA、strB、aphA1、tet(B)、sul2多个耐药基因,对青霉素G、卡那霉素、阿米卡星、链霉素、四环素、土霉素、复方新诺明有较强的耐药性;对头孢噻呋、头孢他啶、阿莫西林、氨苄西林、左氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星敏感性较好,临床用药效果显著。【结论】分离出的副猪格拉菌2型菌株毒力较强,且能透过血脑屏障,有明显的多重耐药性。研究结果可为副猪格拉菌血清2型流行病学调查、致病机制研究以及临床防控措施制定提供参考。 展开更多

关键词 副猪格拉菌血清2型 毒力基因 致病性 药敏试验 耐药基因

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GDF9慢病毒载体的构建及其在山羊原代成纤维细胞中的稳定表达 被引量：1

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作者 滑留帅 王璟 +5 位作者 陈付英 辛晓玲 楚秋霞 冯亚杰 徐照学 王二耀 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第9期2566-2572,共7页

试验旨在构建山羊生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)慢病毒载体,并使其在山羊原代成纤维细胞中稳定表达。利用全基因合成法克隆了绵羊GDF9基因的CDS全长片段,长约1 362bp,编码453个氨基酸。利用双酶切和连接,将GDF9... 试验旨在构建山羊生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)慢病毒载体,并使其在山羊原代成纤维细胞中稳定表达。利用全基因合成法克隆了绵羊GDF9基因的CDS全长片段,长约1 362bp,编码453个氨基酸。利用双酶切和连接,将GDF9基因片段亚克隆至慢病毒载体中,构建了过表达GDF9的慢病毒载体。将慢病毒载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞后,获得了滴度为1×106 TU/mL的慢病毒。利用制备的GDF9慢病毒感染山羊原代成纤维细胞后,观察荧光表明,60%以上的细胞能够观察到红色荧光,说明制备的慢病毒对山羊原代成纤维细胞具有较高的感染效率。经过嘌呤霉素筛选后,所有的细胞均能观察到红色荧光。实时荧光定量PCR分析表明,制备的细胞系中GDF9表达水平比对照组高12.17倍,说明成功获得了稳定表达GDF9的山羊成纤维细胞系。本试验结果为进一步研究GDF9基因的生物学功能,以及山羊未来的种质资源创新奠定基础。 展开更多

关键词 GDF9基因 慢病毒 山羊 原代成纤维细胞

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