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抗菌肽LL-1的鉴定和生物学特性研究 被引量:1
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作者 周玲玲 王宇航 +4 位作者 李亦菲 柴永乐 张明亮 张元臣 连凯琪 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期491-497,共7页
[目的]获得抗菌肽LL-1的完整基因序列,并研究其生物学特性及抗菌效果,为进一步研究开发抗菌肽药物奠定基础。[方法]本研究通过桃蛀螟转录组测序和比对分析发现一种抗菌肽,命名为LL-1。通过RACE扩增技术获得其完整基因序列,从而推导其氨... [目的]获得抗菌肽LL-1的完整基因序列,并研究其生物学特性及抗菌效果,为进一步研究开发抗菌肽药物奠定基础。[方法]本研究通过桃蛀螟转录组测序和比对分析发现一种抗菌肽,命名为LL-1。通过RACE扩增技术获得其完整基因序列,从而推导其氨基酸序列。通过多重序列比对,获得其裂解后的成熟多肽并进行化学合成。通过建立大肠杆菌感染鸡肉模型,评价LL-1的抑菌效果,并检测其耐盐和耐高温特性。[结果]LL-1基因全长474 bp, ORF长192 bp,编码63个氨基酸残基,成熟的LL-1含有39个氨基酸残基,为天蚕素抗菌肽。50 mg/kg的LL-1能极显著抑制大肠杆菌在鸡肉中增殖(P<0.01)。耐温度特性分析结果表明,在4~50℃范围内,温度对抗菌肽LL-1的抑菌效果没有显著影响;与37℃相比,当100℃处理1 h后,抗菌肽LL-1的抑菌活性显著降低(P<0.05)。耐盐特性分析结果表明,在0~200 mmol/L NaCl溶液处理后,抗菌肽LL-1的抑菌效果未出现显著变化(P>0.05)。[结论]抗菌肽LL-1具有较好的稳定性及抗菌活性,具有开发成新型药物的潜力。 展开更多
关键词 抗菌肽 化学合成 生物学特性 抗菌效果 序列比对
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日本奥姬小蜂成虫生物学特性研究
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作者 张元臣 高章鹏 +4 位作者 薛爽 李瑞敏 王兴云 曹亮明 王景顺 《林业科学研究》 北大核心 2025年第5期156-162,共7页
[目的]本文旨在研究日本似凹瘿蜂优势寄生蜂日本奥姬小蜂成虫生物学特性,以期为利用该寄生蜂防治日本似凹瘿蜂提供基础数据。[方法]本文通过田间调查和室内培养的方法,调查了日本似凹瘿蜂两性生殖世代虫瘿内优势天敌日本奥姬小蜂的生物... [目的]本文旨在研究日本似凹瘿蜂优势寄生蜂日本奥姬小蜂成虫生物学特性,以期为利用该寄生蜂防治日本似凹瘿蜂提供基础数据。[方法]本文通过田间调查和室内培养的方法,调查了日本似凹瘿蜂两性生殖世代虫瘿内优势天敌日本奥姬小蜂的生物学特性,并统计了2019—2023年间日本奥姬小蜂寄生率动态变化。[结果]日本似凹瘿蜂两性生殖世代虫瘿内有7种寄生蜂,其中日本奥姬小蜂是优势寄生性天敌。日本奥姬小蜂羽化期持续15 d,羽化高峰期均发生在4月底,羽化时间主要集中在8:00—12:00,雌雄虫性比为1∶1。补充蜂蜜水能够显著延长雌雄日本奥姬小蜂的寿命。雄性寄生蜂取食20%蜂蜜水后寿命显著高于10%蜂蜜水,但是雌寄生蜂取食20%和10%蜂蜜水后寿命在两者间没有显著差异。2019—2023年间日本奥姬小蜂寄生率逐渐增加,分别为17.31%±4.94%、26.75%±3.33%、47.96%±4.13%、72.24%±3.50%和66.02%±7.03%。[结论]在河北地区栓皮栎林内日本奥姬小蜂是日本似凹瘿蜂两性生殖世代的优势寄生天敌,能够有效地压制日本似凹瘿蜂的种群数量,可用于防治日本似凹瘿蜂。 展开更多
关键词 日本似凹瘿蜂 日本奥姬小蜂 两性生殖世代 生物学特性
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我国蚜虫生物防治的研究现状与展望 被引量:6
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作者 高玥 张元臣 +2 位作者 郝钢 王兴云 郭建青 《安徽农业科学》 CAS 2024年第17期11-16,50,共7页
蚜虫是重要的吮吸类农作物害虫,除了刺吸危害,还作为传毒媒介传播多种植物病毒,给农业生产带来严重的经济损失。目前对于蚜虫的防治普遍还是使用化学农药,但长期的化学防治会带来3R(抗性、残留、再猖獗)问题,而生物防治作为绿色环保的... 蚜虫是重要的吮吸类农作物害虫,除了刺吸危害,还作为传毒媒介传播多种植物病毒,给农业生产带来严重的经济损失。目前对于蚜虫的防治普遍还是使用化学农药,但长期的化学防治会带来3R(抗性、残留、再猖獗)问题,而生物防治作为绿色环保的防治措施近年来受到越来越多的关注。对近些年我国蚜虫生物防治的研究现状和展望进行综述,以期为蚜虫生物防治技术的进一步发展和应用提供思路和依据。 展开更多
关键词 蚜虫 生物防治 天敌 病原微生物 植物源农药
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4-萜烯醇对大肠杆菌的抗菌作用研究
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作者 周玲玲 王宇航 +2 位作者 张元臣 张明亮 连凯琪 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4497-4504,共8页
【目的】评价4-萜烯醇的抗菌活性,为其结构优化改造和临床应用提供支撑。【方法】本试验以大肠杆菌为模式菌,通过倍比稀释法测定4-萜烯醇对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC);通过测定D600 nm值绘制其抑菌曲线;扫描电子显微镜观察4-萜烯醇对... 【目的】评价4-萜烯醇的抗菌活性,为其结构优化改造和临床应用提供支撑。【方法】本试验以大肠杆菌为模式菌,通过倍比稀释法测定4-萜烯醇对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC);通过测定D600 nm值绘制其抑菌曲线;扫描电子显微镜观察4-萜烯醇对大肠杆菌形态的影响。测定胞外碱性磷酸酶(ALP)和β-半乳糖苷酶的含量评价4-萜烯醇对大肠杆菌细胞膜的影响;使用超微量分光光度计检测大肠杆菌核酸和蛋白质的泄漏情况;用核酸凝胶电泳检测4-萜烯醇对大肠杆菌DNA的影响。【结果】4-萜烯醇对大肠杆菌的MIC为0.013 mol/L,其对大肠杆菌的抑制作用呈浓度依赖性,1 MIC的4-萜烯醇能在24 h内完全抑制大肠杆菌增殖。经4-萜烯醇处理后的大肠杆菌菌体肿胀变形、表面粗糙、菌体间黏连。与对照组相比,0.5 MIC的4-萜烯醇能导致大肠杆菌上清中ALP含量显著升高(P<0.05),β-半乳糖苷酶含量极显著升高(P<0.01),且与4-萜烯醇浓度呈正相关;0.5 MIC的4-萜烯醇即可导致大肠杆菌上清中蛋白质和核酸含量增高,且与4-萜烯醇浓度和作用时间呈正相关。4-萜烯醇与大肠杆菌DNA没有结合作用。【结论】4-萜烯醇对大肠杆菌具有良好的抗菌效果,能通过增加细胞膜的通透性,进而使胞内容物泄漏使细菌死亡。试验结果为深入研究4-萜烯醇对大肠杆菌的抗菌机制奠定基础。 展开更多
关键词 4-萜烯醇 大肠杆菌 细胞膜 抗菌作用
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不同玉米自交系对环磺酮的敏感性差异研究 被引量:2
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作者 高玥 黄冀楠 +7 位作者 许贤 李杰 李秉华 赵铂锤 祁志尊 王贵启 郭建青 刘小民 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期132-139,共8页
环磺酮是2021年在中国登记上市的玉米田对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(HPPD)抑制剂类除草剂。为明确环磺酮对不同玉米自交系的安全性,以玉米自交系HB05(‘Mo17’)、HB09(‘PH6WC’)、HB39(‘J525’)和HB82(‘’KH8’)为研究对象,进行了环磺... 环磺酮是2021年在中国登记上市的玉米田对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(HPPD)抑制剂类除草剂。为明确环磺酮对不同玉米自交系的安全性,以玉米自交系HB05(‘Mo17’)、HB09(‘PH6WC’)、HB39(‘J525’)和HB82(‘’KH8’)为研究对象,进行了环磺酮胁迫对不同玉米自交系幼苗生长及体内生理生化指标的影响研究。结果表明:环磺酮按有效成分120 g/hm^(2)处理,敏感型玉米HB82和HB39表现出叶片失绿白化,直至干枯死亡,严重影响玉米的生长发育;而耐药型玉米HB05和HB09叶片没有出现受害症状,对生长发育无明显影响。环磺酮按有效成分240 g/hm^(2)处理14 d后,对敏感型玉米HB82和HB39株高抑制率分别为64.63%和63.79%,鲜重抑制率分别为70.06%和66.02%。环磺酮按有效成分720 g/hm^(2)处理14 d后,对耐药型玉米HB05和HB09株高抑制率分别为48.61%和38.05%,鲜重抑制率分别为21.93%和43.63%。环磺酮对耐药型玉米HB05和HB09的IC50值分别为223.50和37.42 mg/L,明显高于敏感型玉米HB82和HB39(对的IC50值分别为13.48和16.13 mg/L)。对叶绿素含量测定结果表明:叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总含量的变化趋势一致,即随着处理时间的延长,不同玉米自交系体内叶绿素含量呈不同程度的下降趋势,且敏感型玉米下降趋势明显大于耐药型玉米。环磺酮按有效成分120 g/hm^(2)处理7 d后,与0 d相比,敏感型玉米HB82、HB39体内叶绿素总含量较0 d分别下降87.76%和70.55%,而耐药型玉米HB05和HB09分别下降49.86%和33.65%;敏感型玉米HB82和HB39体内类胡萝卜素含量分别下降83.72%和74.02%,耐药型玉米HB05和HB09分别下降40.83%和33.33%。对超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)酶活性的测定结果表明:环磺酮胁迫诱导了不同玉米自交系体内SOD和POD酶活性的增加,呈先上升后下降的趋势,其变化幅度为敏感型玉米高于耐药型玉米。综上所述,不同玉米自交系对环磺酮的敏感性存在显著差异,明确不同玉米自交系对环磺酮的耐药性,在生产中可避免环磺酮对玉米产生药害,减少不必要的损失。 展开更多
关键词 环磺酮 玉米自交系 敏感性 抑制率 生理生化指标
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大学生暑假“三下乡”社会实践创新探索--以安阳工学院太行山昆虫调查队为例 被引量:2
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作者 王兴云 张元臣 +2 位作者 张新强 薛爽 张坤朋 《农村农业农民》 2022年第4期53-55,共3页
暑期“三下乡”社会实践活动是引导学生真正走出校门、接触社会、了解国情,使理论与实践相结合的重要途径,同时对于加强大学生社会经验,培养大学生工作能力,具有非常重要的意义。该调查队社会实践活动以“接地气,有创意”为主旨,让学生... 暑期“三下乡”社会实践活动是引导学生真正走出校门、接触社会、了解国情,使理论与实践相结合的重要途径,同时对于加强大学生社会经验,培养大学生工作能力,具有非常重要的意义。该调查队社会实践活动以“接地气,有创意”为主旨,让学生充分发挥自己的创意,展现他们的才能。这区别于普通的社会调研类“三下乡”实践活动,为后期“三下乡”选题提供了一个很好的选题角度。 展开更多
关键词 新农科 “三下乡” 接地气 有创意
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抗菌肽LL-1对沙门氏菌的抗菌机制
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作者 王宇航 周玲玲 +4 位作者 周瑶玲 撒俊梦 张元臣 马增军 连凯琪 《食品科学》 北大核心 2025年第4期110-116,共7页
为探究抗菌肽LL-1对沙门氏菌的抗菌效果及机制,首先通过倍比稀释法测定LL-1对沙门氏菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并以抗菌曲线评价LL-1对沙门氏菌的抗菌效果;然后,使用扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察... 为探究抗菌肽LL-1对沙门氏菌的抗菌效果及机制,首先通过倍比稀释法测定LL-1对沙门氏菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并以抗菌曲线评价LL-1对沙门氏菌的抗菌效果;然后,使用扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察细菌形态,通过检测核酸、蛋白质、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的泄漏情况以及碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色实验,评价LL-1对沙门氏菌细胞壁和细胞膜的影响,通过核酸凝胶电泳观察LL-1与沙门氏菌DNA结合情况;最后,通过检测胞内琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-malatedehydrogenase,NADP-MDH)活性以及腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)含量,评价LL-1对沙门氏菌能量代谢的影响。结果表明:LL-1对沙门氏菌的MIC为6.25μg/mL,有良好的抗菌效果,且呈浓度和时间依赖性;经LL-1处理的沙门氏菌出现菌体皱缩、胞膜溶解和质壁分离等形态变化;沙门氏菌经LL-1处理后,胞内核酸、蛋白质、ALP发生泄漏,并且经PI染色后胞内荧光强度增强,同时LL-1与DNA发生结合;随着LL-1质量浓度的升高,胞内ATP含量下降、SDH及NADP-MDH的活性降低。综上,LL-1能增大沙门氏菌细胞膜和细胞壁的通透性引起胞内容物泄漏,结合其DNA,并通过影响细菌能量代谢等方式抗菌,本实验可为后续深入研究LL-1的抗菌机制和应用奠定基础。 展开更多
关键词 沙门氏菌 抗菌肽 抗菌机制 食源性致病菌 细胞膜 能量代谢
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抗菌肽LL-1体内治疗大肠杆菌感染的效果
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作者 周玲玲 王宇航 +4 位作者 撒俊梦 马小宁 张元臣 连凯琪 曹瑾玲 《河南农业科学》 北大核心 2025年第5期142-148,共7页
为了评估抗菌肽LL-1对大肠杆菌感染小鼠的体内治疗效果,为抗菌肽LL-1的临床应用奠定基础,首先建立大肠杆菌感染小鼠模型,确定最佳感染剂量;然后使用抗菌肽LL-1和恩诺沙星分别对大肠杆菌感染的小鼠模型进行治疗,根据小鼠存活率、血常规... 为了评估抗菌肽LL-1对大肠杆菌感染小鼠的体内治疗效果,为抗菌肽LL-1的临床应用奠定基础,首先建立大肠杆菌感染小鼠模型,确定最佳感染剂量;然后使用抗菌肽LL-1和恩诺沙星分别对大肠杆菌感染的小鼠模型进行治疗,根据小鼠存活率、血常规参数、器官指数、内脏载菌量等指标多方面评价抗菌肽LL-1体内治疗效果,并通过检测小鼠脏器组织学变化来分析抗菌肽LL-1对小鼠的影响。结果表明,建立大肠杆菌感染小鼠模型的最佳感染浓度为10^(8)cfu/mL。阳性对照组(POS组)小鼠存活率为30%,80 mg/kg LL-1治疗组(PEPJ组)小鼠的存活率达到100%;与POS组相比,PEPJ组的小鼠肝脏指数极显著升高,脾脏指数显著降低,脾脏、肺脏大肠杆菌载菌量极显著降低;在小鼠血常规主要参数中,PEPJ组中间细胞计数显著减少;HE染色结果显示,LL-1显著缓解了大肠杆菌感染引起的多器官(肝、脾、肾、肺)病变、炎性细胞浸润,以及肠道绒毛脱落。80 mg/kg LL-1对大肠杆菌感染小鼠的总体治疗效果优于200 mg/kg恩诺沙星治疗组。综上,抗菌肽LL-1对小鼠具有良好的体内抗大肠杆菌作用,为今后更深入研究该抗菌肽的作用及临床应用奠定基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 大肠杆菌 体内抗菌 小鼠感染模型 临床应用
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汤川瘿蜂寄生性天敌调查及其优势天敌长尾小蜂生物学特性 被引量:2
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作者 张元臣 鲍梦楠 +4 位作者 薛爽 王璞 王兴云 张坤朋 王景顺 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第6期112-117,共6页
【目的】明确汤川瘿蜂虫瘿内寄生性天敌种类,研究其优势天敌的生物学特性,为利用寄生性天敌防治汤川瘿蜂提供科学依据。【方法】对汤川瘿蜂虫瘿进行林间调查、室内解剖和室内试验,明确虫瘿内寄生性天敌种类及其优势天敌长尾小蜂的生物... 【目的】明确汤川瘿蜂虫瘿内寄生性天敌种类,研究其优势天敌的生物学特性,为利用寄生性天敌防治汤川瘿蜂提供科学依据。【方法】对汤川瘿蜂虫瘿进行林间调查、室内解剖和室内试验,明确虫瘿内寄生性天敌种类及其优势天敌长尾小蜂的生物学特性。【结果】汤川瘿蜂无性世代虫瘿内主要有长尾小蜂、金小蜂和啮小蜂3种寄生性天敌,其中长尾小蜂为优势天敌。长尾小蜂1年发生1代,以幼虫在无性虫瘿内越冬,越冬成虫10月下旬开始出瘿,产卵于无性虫瘿内。2019和2020年连续2年虫瘿调查发现,长尾小蜂对汤川瘿蜂无性世代寄生率分别为18.00%和21.86%。寄生蜂羽化期持续81~85天,雌雄虫羽化高峰期分别在11月下旬和11月中旬,羽化时间集中在上午8:00―12:00,雌雄性比为1∶2。长尾小蜂善跳跃,有假死性,雌雄成虫羽化后当天即可交配,有多次交配现象。补充蜂蜜水可显著延长雄性长尾小蜂寿命,对雌性长尾小蜂寿命没有显著影响。【结论】汤川瘿蜂无性世代虫瘿内有长尾小蜂、金小蜂和啮小蜂3种寄生性天敌,长尾小蜂对汤川瘿蜂寄生率最高,为优势寄生蜂种,可作为防治汤川瘿蜂的重要手段。 展开更多
关键词 汤川瘿蜂 长尾小蜂 虫瘿 生物学特性 寄生天敌
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抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌ATCC 700603的抗菌机制 被引量:2
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作者 连凯琪 王宇航 +5 位作者 曾雅静 周玲玲 张元臣 张明亮 张改平 王双山 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2237-2244,共8页
【目的】探明新抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)的抗菌效果和机制。【方法】测定抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),通过抑菌曲线评价抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的体外抗... 【目的】探明新抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)的抗菌效果和机制。【方法】测定抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),通过抑菌曲线评价抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的体外抗菌效果;通过检测碱性磷酸酶(ALP)、β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)、核酸、蛋白质的泄露,评价抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌细胞膜和细胞壁的影响;通过核酸凝胶电泳检测抗菌肽LL-1与肺炎克雷伯菌DNA的结合作用;通过扫描电子显微镜观察抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌菌体形态的影响。【结果】抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌具有良好的抗菌活性,MIC为50μg/mL;抑菌曲线表明,抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌具有生长抑制作用,且2 MIC的抗菌肽LL-1在6 h内能完全抑制肺炎克雷伯菌;抗菌肽LL-1能导致肺炎克雷伯菌的ALP和β-半乳糖苷酶发生泄漏,且1/4 MIC的抗菌肽LL-1即可导致其泄漏量极显著高于对照组(P<0.01);核酸和蛋白质泄露的检测结果进一步证实抗菌肽LL-1能导致肺炎克雷伯菌胞内容物外流;此外抗菌肽LL-1还能与肺炎克雷伯菌DNA结合;扫描电子显微镜观察显示,抗菌肽LL-1会导致肺炎克雷伯菌表面变得粗糙、菌体变形等。【结论】抗菌肽LL-1能增加肺炎克雷伯菌细胞壁和细胞膜的通透性,并结合其DNA,从而发挥抗菌作用,本研究结果将为深入研究抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的抗菌机制奠定基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 肺炎克雷伯菌 抗菌机制 细胞壁 细胞膜
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基于代谢组学解析抗感水稻差异代谢物β-谷甾醇对褐飞虱的杀虫活性 被引量:1
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作者 王兴云 张新强 +7 位作者 李菁 孟姗姗 尚晨旭 郜新强 李佳丽 张曼曼 张坤朋 王景顺 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期958-968,共11页
本研究利用代谢组学筛选抗性水稻中有活性的代谢物质,为开发控制褐飞虱Nilaparvata lugens的绿色植物源农药开拓思路。基于水稻品种对褐飞虱有抗性的差异,采用生长发育和存活率比较方法,验证了水稻品种Mudgo和TN1对褐飞虱的抗性差异;通... 本研究利用代谢组学筛选抗性水稻中有活性的代谢物质,为开发控制褐飞虱Nilaparvata lugens的绿色植物源农药开拓思路。基于水稻品种对褐飞虱有抗性的差异,采用生长发育和存活率比较方法,验证了水稻品种Mudgo和TN1对褐飞虱的抗性差异;通过代谢组学分析抗褐飞虱水稻Mudgo和感褐飞虱水稻TN1代谢物的不同,筛选了品种间有显著差异的物质β-谷甾醇和无显著差异的物质豆甾醇作为褐飞虱生测物质,进行存活率和适合度功能验证,明确其对褐飞虱的功能效应。褐飞虱在Mugdo和TN1两种水稻品种上的生命参数间存在显著差异,在Mudgo水稻上发育历期延长,体重、体长和存活率降低。代谢组学分析共检测到69种差异代谢物,主要为脂质(36%)、碳水化合物(23%)、氨基酸(19%)、次生代谢物质(14%)、核酸(6%)及其他物质(1%)等6大类物质。褐飞虱人工饲料添加剂生测数据显示,褐飞虱取食20.0μg/mL和500.0μg/mL浓度β-谷甾醇,雌虫体重显著降低;取食500.0μg/mL浓度β-谷甾醇,雄虫体重显著降低。此外,取食不同浓度豆甾醇对褐飞虱体重均无显著性影响。β-谷甾醇对褐飞虱的存活率有显著降低作用,而豆甾醇只有在4.0μg/mL、100.0μg/mL和500.0μg/mL浓度下有降低作用。确认了水稻品种Mudgo对褐飞虱有显著的抗性,可显著降低存活率,抑制生长。代谢组学筛选到的69种差异代谢物可作为抗褐飞虱绿色植物源农药的备选库;其中,差异显著的代谢物质β-谷甾醇对褐飞虱体重和存活率有显著降低作用,可作为防治褐飞虱的植物源农药。 展开更多
关键词 褐飞虱 水稻抗性品种Mudgo 代谢组学 Β-谷甾醇 豆甾醇 生长发育 存活率
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GABA_(B)受体介导草地贪夜蛾幼虫对甜味和苦味物质的取食选择
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作者 刘永冲 孙龙龙 +7 位作者 霍昳陶 牛林 王豪杰 张元臣 闫凤鸣 刘龙 马英 汤清波 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1451-1460,共10页
【目的】本研究旨在探究昆虫重要的抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)B型受体(GABA_(B)receptor)在介导草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫对甜味物质和苦味物质的取食选择中的作用。【方法】利用RT-qPCR测定GABA... 【目的】本研究旨在探究昆虫重要的抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)B型受体(GABA_(B)receptor)在介导草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫对甜味物质和苦味物质的取食选择中的作用。【方法】利用RT-qPCR测定GABA_(B)受体基因在不同龄期(1-6龄)第2天草地贪夜蛾幼虫以及在5龄第2天幼虫不同组织(头、表皮、中肠、脂肪体和血淋巴)中的表达量;饲喂草地贪夜蛾5龄幼虫ds GABA_(B)R沉默GABA_(B)受体基因,向5龄幼虫注射GABA_(B)受体拮抗剂,利用叶碟法分别测定ds GABA_(B)R和GABA_(B)受体拮抗剂处理后5龄幼虫对甜味物质蔗糖和苦味物质黑芥子苷的取食选择指数以及对玉米叶片的摄食面积。【结果】GABA_(B)受体基因在草地贪夜蛾1龄幼虫中的表达量显著高于其他龄期幼虫,在5龄幼虫脂肪体中的表达量显著高于其他组织中的。5龄幼虫饲喂dsGABA_(B)R后对玉米叶片的摄食面积显著低于对照幼虫,且不再显著趋向取食蔗糖,但是对苦味物质黑芥子苷依然表现为拒食反应。5龄幼虫血淋巴中注射GABA_(B)受体拮抗剂后对玉米叶片的摄食面积也显著低于对照幼虫;不同于对照幼虫显著趋向取食蔗糖的行为,注射GABA_(B)受体拮抗剂的5龄幼虫对蔗糖表现为显著拒食行为;但是,5龄幼虫对苦味物质黑芥子苷的拒食趋势没有显著改变。【结论】GABA_(B)受体能够显著影响草地贪夜蛾幼虫的摄食量,以及改变幼虫对甜味物质的趋向取食,但是对幼虫拒食黑芥子苷的趋势没有显著影响。本研究结果有助于我们理解昆虫取食行为的调控机制。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 GABA_(B)受体 RNAI 拮抗剂 摄食量 取食选择
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侧柏为甜菜夜蛾的新寄主
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作者 张元臣 丁欣然 +4 位作者 李世豪 李广帅 苏超 薛爽 王景顺 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期291-295,共5页
甜菜夜蛾Spodoptera exigua是一种全球分布、间歇性发生的农林多食性害虫,给全球多种农作物和园艺作物造成严重的经济损失。2022年在河南省安阳县林场苗圃基地调查时发现一种昆虫为害侧柏叶片,我们对其进行了形态学鉴定,并利用线粒体细... 甜菜夜蛾Spodoptera exigua是一种全球分布、间歇性发生的农林多食性害虫,给全球多种农作物和园艺作物造成严重的经济损失。2022年在河南省安阳县林场苗圃基地调查时发现一种昆虫为害侧柏叶片,我们对其进行了形态学鉴定,并利用线粒体细胞色素氧化酶基因(COⅠ)进行了分子鉴定,证实该虫为甜菜夜蛾。本文简要描述了该虫为害特点以及生活习性,并对该虫在不同区域的为害情况进行了调查。本文是首次报道侧柏可以作为甜菜夜蛾的寄主,研究结果为进一步研究甜菜夜蛾在侧柏上生物生态学及防治技术提供基础数据。 展开更多
关键词 甜菜夜蛾 侧柏 分子鉴定 幼虫数量 COⅠ
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东方黏虫溶菌酶基因MseLYS的克隆与表达分析
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作者 张元臣 苏圣盈 +2 位作者 张家祺 薛爽 王景顺 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期206-214,共9页
克隆东方黏虫C型溶菌酶基因MseLYS,构建MseLYS基因的原核表达载体,检测该基因在东方黏虫不同龄期和组织的表达情况,旨在为探究MseLYS基因的功能和结构提供理论参考,也为进一步研究该基因的抗菌功能和生理机制奠定基础。以东方黏虫为研... 克隆东方黏虫C型溶菌酶基因MseLYS,构建MseLYS基因的原核表达载体,检测该基因在东方黏虫不同龄期和组织的表达情况,旨在为探究MseLYS基因的功能和结构提供理论参考,也为进一步研究该基因的抗菌功能和生理机制奠定基础。以东方黏虫为研究对象,通过反转录PCR(RT-PCR)和末端快速扩增技术(RACE),获得了溶菌酶基因MseLYS的全长核苷酸序列,之后将去掉信号肽的开放阅读框架(ORF)序列连接到表达载体pET-30a(+)上,并用IPTG进行了诱导表达,最后用荧光定量PCR明确了该基因的时空表达模式。序列分析表明,此基因全长729 bp,ORF全长426 bp,5′和3′非编码区分别为75,228 bp,共编码141个氨基酸残基,其蛋白质的等电点和分子质量分别为7.72,16.13 ku。系统进化树分析结果表明,MseLYS与其他物种的C型溶菌酶聚集在一起,且与其他昆虫的氨基酸序列具有高度一致性,表明MseLYS为C型溶菌酶。SDS-PAGE电泳结果表明,MseLYS在表达菌BL21(DE3)内表达的蛋白质分子质量与预期大小一致,约20 ku,说明MseLYS在大肠杆菌中能够高效表达。龄期表达谱分析表明,MseLYS基因在东方黏虫幼虫、雄虫和雌虫不同发育阶段表达量显著不同,在末龄幼虫、蛹中表达量较高,其他发育时期表达水平较低。组织表达分析结果表明,MseLYS基因在雄虫不同组织表达量存在着显著差异,其中脂肪体和胸内表达量较高;在雌虫不同组织表达量也存在显著差异,其中触角、翅和体壁中表达量较高。综上,成功克隆了东方黏虫C型溶菌酶MseLYS基因的全长序列,构建了该基因的原核表达载体并能够高效表达蛋白质,明确了该基因在不同组织和不同龄期的表达模式。 展开更多
关键词 东方黏虫 溶菌酶 基因克隆 原核表达 定量PCR
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棉蚜ATP合成酶基因AgoATPb的克隆与表达 被引量:1
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作者 杨卫军 董艳蕾 +3 位作者 吴秋芳 张美玲 韩丽滨 张元臣 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第2期329-336,共8页
为确定棉蚜(Aphis gossypii)ATP合成酶B亚基基因在棉蚜不同组织和日龄,以及取食不同植物的表达情况,以棉蚜为研究对象,采用RT-PCR和RACE技术获得AgoATPb的全长cDNA序列,通过Expasy、SignalP-4.0 Server等在线工具对其进行了生物信息学分... 为确定棉蚜(Aphis gossypii)ATP合成酶B亚基基因在棉蚜不同组织和日龄,以及取食不同植物的表达情况,以棉蚜为研究对象,采用RT-PCR和RACE技术获得AgoATPb的全长cDNA序列,通过Expasy、SignalP-4.0 Server等在线工具对其进行了生物信息学分析,同时利用实时荧光定量PCR技术研究了该基因在棉蚜不同组织和不同日龄,以及在不同植物上取食的表达水平。结果表明,棉蚜AgoATPb基因全长cDNA序列为1247 bp,开放阅读框(ORF)长度为822 bp,编码274个氨基酸,5′端非编码区长128 bp,3′端非编码区长297 bp,理论分子量为31.40 ku,等电点为8.95,无信号肽和跨膜区域。氨基酸序列比对结果表明,棉蚜AgoATPb与其他昆虫同源基因编码蛋白的氨基酸序列一致性为47%~99%。除了不在胚胎表达外,AgoATPb基因在棉蚜其他日龄和不同组织均有表达,且在不同日龄间与不同组织表达水平存在显著差异。取食不同植物后棉蚜AgoATPb基因表达水平存在显著差异,取食棉花表达水平最高,其次是黄瓜和西葫芦,取食甜瓜表达水平最低,推测该基因可能与棉蚜适应寄主植物有关。 展开更多
关键词 棉蚜 ATP合成酶B亚基 生物信息学 基因克隆 寄主
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8种蛱蝶线粒体基因组及蛱蝶亚科Nymphalinae系统发育重建研究
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作者 夏梦玉 刘晨阳 +5 位作者 翟卿 张欢欢 信红娟 王露丹 李祥 王保海 《河南农业大学学报》 2025年第6期1047-1057,共11页
【目的】丰富蛱蝶线粒体基因组序列数据,分析蛱蝶亚科线粒体基因组结构特点,厘定蛱蝶亚科各级分类阶元间的系统发育关系。【方法】利用高通量测序方法对8种蛱蝶的线粒体基因组进行测序;利用线粒体基因组中的13个蛋白质编码基因和2个核糖... 【目的】丰富蛱蝶线粒体基因组序列数据,分析蛱蝶亚科线粒体基因组结构特点,厘定蛱蝶亚科各级分类阶元间的系统发育关系。【方法】利用高通量测序方法对8种蛱蝶的线粒体基因组进行测序;利用线粒体基因组中的13个蛋白质编码基因和2个核糖体RNA基因序列,以帅蛱蝶Sephisa chandra(Moore,[1858])和紫闪蛱蝶Apatura iris(Linnaeus,1758)为外群,采用最大似然法(maximum likelihood,ML)和贝叶斯法(bayesian inference,BI)分别构建蛱蝶亚科20属49种间的系统发育树。【结果】测定的8种蛱蝶线粒体基因组长度均在15000 bp左右,与大多数已知鳞翅目昆虫结构相似,均为闭合环状分子,包含37个基因和1个控制区,A+T含量较高(80.2%~81.4%)。蛋白质编码基因中除了cox1以CGA为起始密码子,其他均以ATN作为起始密码子;相对同义密码子使用频率(relative synonymous codon usage,RSCU)最高的3个密码子分别为UUA、GGA、CGA,最低的是AGC。控制区中均存在微卫星结构。2种方法构建的系统发育树结构相同,均有2个主要分支,1支仅包含蛱蝶族Nymphalini,另1支中各族间的系统发育关系为((枯叶蛱蝶族Kallimini+(网蛱蝶族Melitaeini+眼蛱蝶族Junoniini))+维蛱蝶族Victoriniini);西藏麻蛱蝶Nymphalis ladakensis Moore,1882与孔雀蛱蝶Inachis io(Linnaeus,1758)聚为1支,亲缘关系较近;网蛱蝶族包含蠹叶蛱蝶属Doleschallia、网蛱蝶属Melitaea和堇蛱蝶属Euphydryas;瑶蛱蝶属Yoma、矩蛱蝶属Salamis与眼蛱蝶属Junonia均为单系群,瑶蛱蝶属Yoma和矩蛱蝶属Salamis亲缘关系更近;褐蜜蛱蝶Mellicta ambigua Ménétriés,1859与兰网蛱蝶Melitaea bellona Leech,[1892]聚为1支和庆网蛱蝶Melitaea cinxia(Linnaeus,1758)互为姐妹群。【结论】蛱蝶亚科划分蛱蝶族、枯叶蛱蝶族、网蛱蝶族、眼蛱蝶族、维蛱蝶族5族。蠹叶蛱蝶属应从枯叶蛱蝶族移入网蛱蝶族;褐蜜蛱蝶归入网蛱蝶属。 展开更多
关键词 蛱蝶亚科 线粒体基因组 最大似然法 贝叶斯法 系统发育
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金丝楸幼苗响应盐碱胁迫的生理和转录组分析 被引量:8
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作者 郜新强 王小艳 +8 位作者 焦伟 李娜 王静 郑丽月 王丹宁 王兴云 侯立江 尚增振 刘彦珍 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2023年第1期166-178,共13页
[目的]研究不同盐碱胁迫对金丝楸幼苗生长、光合和生理指标的影响,并结合转录组测序分析,探究楸树耐盐碱的生理机制和分子机制。[方法]采用盆栽法对金丝楸幼苗进行不同盐碱胁迫处理,分析其生物量、光合及生理指标对不同盐碱响应的差异,... [目的]研究不同盐碱胁迫对金丝楸幼苗生长、光合和生理指标的影响,并结合转录组测序分析,探究楸树耐盐碱的生理机制和分子机制。[方法]采用盆栽法对金丝楸幼苗进行不同盐碱胁迫处理,分析其生物量、光合及生理指标对不同盐碱响应的差异,采用Illumina高通量测序技术进行转录组测序,通过生物信息学分析盐碱胁迫对转录水平的影响。[结果]不同盐碱胁迫下,金丝楸幼苗叶片受伤害程度为Na_(2)CO_(3)>混合盐碱>NaCl;新增株高和地径、地上部和根的干质量和鲜质量、生物量、根冠比均受到明显抑制,并随盐碱浓度增加而抑制加强,但生长胁迫指数均随浓度的增加而降低;丙二醛(MDA)含量和相对电导率都随胁迫浓度增加而不同程度上升,超氧化物歧化酶(SOD)活性、可溶性糖含量、脯氨酸(Pro)含量、叶绿素总量和光合速率都呈现先上升后下降的趋势。转录组测序共产生约60.4 Gb原始数据,组装得到55793个Unigenes,其中29534(52.93%)个Unigenes获得了注释;通过差异表达基因(DEGs)分析,3个比较组(CK vs NaCl,CK vs Na_(2)CO_(3)和CK vs混合盐碱)分别筛选出1779、2835和4059个DEGs;DEGs GO富集分析表明,膜的整体成分、膜的内在成分、催化活性、类异戊二烯代谢和合成过程、氧化还原酶活性等条目被显著富集;DEGs KEGG分析表明,苯丙素生物合成、淀粉和蔗糖代谢、植物激素信号转导、萜类主干生物合成和精氨酸代谢等通路被显著富集;此外,在DEGs中鉴定的bHLH、ERF、MYB-related、NAC、C2H2、WRKY、MYB和b ZIP转录因子家族成员最多。[结论]金丝楸主要通过积累可溶性糖和Pro,提高SOD酶活和光合作用来抵御盐碱胁迫,但都呈现“低促高抑”的现象,说明其具有一定阈值。金丝楸通过调节膜成分、催化活性、类异戊二烯代谢和生物合成过程、苯丙素生物合成、淀粉和蔗糖代谢、植物激素信号转导等生物过程和代谢途径,并结合有关转录因子共同响应盐碱胁迫。本研究为深入研究楸树耐盐碱生理机制和分子机制提供科学的理论依据。 展开更多
关键词 金丝楸 盐碱胁迫 转录组 差异表达基因 耐盐碱机制
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盛冈纹瘿蜂(膜翅目:瘿蜂科)雌虫的超微形态 被引量:2
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作者 薛爽 张元臣 +2 位作者 高姗姗 王景顺 张坤朋 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第8期112-120,共9页
【目的】盛冈纹瘿蜂是在栎树上形成虫瘿危害的重要害虫。明确盛冈纹瘿蜂雌虫的超微形态,主要包括复眼、触角、口器、足和产卵器上感器的种类、数量和分布等,为瘿蜂综合防治与利用提供理论依据。【方法】运用扫描电子显微镜对雌虫的超微... 【目的】盛冈纹瘿蜂是在栎树上形成虫瘿危害的重要害虫。明确盛冈纹瘿蜂雌虫的超微形态,主要包括复眼、触角、口器、足和产卵器上感器的种类、数量和分布等,为瘿蜂综合防治与利用提供理论依据。【方法】运用扫描电子显微镜对雌虫的超微形态结构进行观察。【结果】盛冈纹瘿蜂的复眼由多个小眼组成,其间有锥形感器。雌虫触角由柄节、梗节和鞭节组成,鞭节分为11亚节,柄节呈漏斗状,梗节较短呈球状。鞭节1—3亚节呈长圆柱状,末节粗壮、端部渐尖,其余呈短圆柱状。触角上分布有毛形感器、刺形感器、锥形感器、板形感器和腔锥形感器5种感器,其中毛形感器的数量最多、分布最广泛。板形感器较为特殊,形状宽长,表面光滑,分布在第3—11亚鞭节上。口器为咀嚼式口器,下颚须发达,密被毛形感器。足上有许多毛形感器和刺形感器;产卵器上分布有毛形感器、刺形感器、锥形感器、耳形感器和火山形感器。【结论】盛冈纹瘿蜂雌虫复眼、触角、口器、足和产卵器上有各种不同类型的感器,感器的功能与瘿蜂栖息、取食、繁殖等一系列生理活动密切相关。 展开更多
关键词 盛冈纹瘿蜂 触角 口器 产卵器 感器
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对褐飞虱有功能效应的水稻挥发物活性组分的筛选与鉴定 被引量:2
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作者 王兴云 张新强 +4 位作者 李菁 黄小玲 张元臣 张坤朋 王景顺 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2023年第6期1474-1481,共8页
为明确抗褐飞虱水稻品种Mudgo和感褐飞虱水稻品种TN1释放的挥发物中化学组分的差异,筛选鉴定对褐飞虱具有功能效应的活性化合物。本研究通过顶空动态收集装置获取Mudgo和TN1水稻的挥发物,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)筛选、鉴定水稻... 为明确抗褐飞虱水稻品种Mudgo和感褐飞虱水稻品种TN1释放的挥发物中化学组分的差异,筛选鉴定对褐飞虱具有功能效应的活性化合物。本研究通过顶空动态收集装置获取Mudgo和TN1水稻的挥发物,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)筛选、鉴定水稻挥发物的活性组分,基于筛选鉴定出的Mudgo与TN1水稻挥发物中的差异活性化合物,采用Y型嗅觉仪对其进行功能验证。本研究在两水稻品种的挥发物中共筛选鉴定到52种化合物,其中Mudgo和TN1分别鉴定到27种,仅在Mudgo挥发物中存在的化合物有10种,仅在TN1挥发物中存在的化合物有15种。基于Mudgo和TN1水稻挥发物的差异活性组分鉴定结果,筛选出11种活性化合物进行功能验证。Y型嗅觉仪测定结果表明:低浓度(2μL/mL)的芳樟醇、高浓度(200μL/mL)的β-倍半水芹烯和水杨酸甲酯这3种化合物对褐飞虱具有显著的驱避作用,可发展用于褐飞虱防治的驱避剂;D-柠檬烯、β-石竹烯和高浓度的2-庚酮、2-乙基苯胺和姥鲛烷这5种化合物对褐飞虱具有显著的引诱作用,可发展用于褐飞虱防治的引诱剂。该研究可为褐飞虱的绿色防控和害虫综合治理提供科学数据和理论依据。 展开更多
关键词 褐飞虱 水稻挥发物 功能效应 筛选与鉴定 选择响应
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基于COⅠ基因的我国悬铃木方翅网蝽(半翅目:网蝽科)种群遗传多样性和遗传结构分析 被引量:5
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作者 张元臣 卢绍辉 +1 位作者 龚东风 马兴莉 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第8期102-111,共10页
【目的】研究悬铃木方翅网蝽在我国不同地理种群间的遗传多样性和遗传结构,探讨其种群在我国的入侵趋势。【方法】共测定12个悬铃木方翅网蝽地理种群中240个个体COⅠ基因的部分核苷酸序列,利用DnaSP V6.12.03等软件对方翅网蝽不同地理... 【目的】研究悬铃木方翅网蝽在我国不同地理种群间的遗传多样性和遗传结构,探讨其种群在我国的入侵趋势。【方法】共测定12个悬铃木方翅网蝽地理种群中240个个体COⅠ基因的部分核苷酸序列,利用DnaSP V6.12.03等软件对方翅网蝽不同地理种群间的遗传分化程度、基因流水平、分子变异情况、种群历史动态等进行分析。【结果】悬铃木方翅网蝽12个地理种群的COⅠ核苷酸序列含有13个变异位点和9个单倍型,其中有5个共享单倍型,Hap1为祖先单倍型。方翅网蝽总种群单倍型多样性指数Hd为0.584,地理种群间Hd值在0~0.758之间。种群总固定系数FST值为0.48,各地理种群间FST值在-0.05~0.89之间,种群间基因分化程度差异较大;种群总基因流Nm值为0.55,且各地理种群间Nm值在-85.25~47.58之间,种群间基因交流程度不同。悬铃木方翅网蝽种群内个体间变异占总变异的52.19%,同时华中组群经历了方翅网蝽种群扩张事件。【结论】12个悬铃木方翅网蝽地理种群在不同组群间和地理种群间具有显著分化的遗传结构。悬铃木方翅网蝽的遗传分化主要来自种群内个体间变异,各地理种群间遗传距离与地理距离无明显的相关性,地理距离未明显阻碍地理种群间的基因交流。同时,推测在中国主要分布区内悬铃木方翅网蝽以上海为中心向全国进行扩散。 展开更多
关键词 悬铃木方翅网蝽 COⅠ基因 固定系数 遗传分化 基因流
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