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题名人水通道蛋白4胞外区的原核表达及纯化
被引量：3
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作者
张迎娜
高峰
方华
赵雪
张婧
杜英
潘卫东
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机构
郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室
河南省医药科学研究院神经免疫学研究室
郑州市神经免疫学重点实验室
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出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2015年第5期601-606,共6页
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基金
国家自然科学基金资助项目30570625
河南省省属科研单位社会公益项目预研专项资金资助项目
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文摘
目的:利用原核表达系统融合表达人水通道蛋白4(AQP4)胞外区,并进行纯化及鉴定。方法:根据大肠埃希菌密码子偏嗜性及后续实验需要设计并人工合成AQP4胞外区序列,退火形成双链后克隆至pET32a(+)载体,构建原核重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果:重组表达质粒经双酶切和测序鉴定构建正确;表达的融合蛋白pET32a(+)-AQP4胞外区相对分子质量约为26 000,可与鼠抗组氨酸单克隆抗体特异性结合,可以可溶性形式存在于上清液中,纯化的融合蛋白纯度达70%以上。结论:成功构建了重组表达质粒pET32a(+)-AQP4胞外区,并成功表达融合蛋白。
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关键词
水通道蛋白4
原核细胞
融合蛋白
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Keywords
aquaporin 4
prokaryotie cell
fusion protein
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分类号
R744.52
[医药卫生—神经病学与精神病学]
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题名替考拉宁对正常兔眼房水细胞因子的影响
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作者
毛理纳
罗予
杜楠楠
胡新辉
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机构
郑州大学基础医学院
河南卫生职工学院药理学教研室
河南省医药科学研究院免疫学研究室
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出处
《中国感染与化疗杂志》
CAS
北大核心
2013年第2期128-131,共4页
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基金
河南省医学科技攻关项目(200904052)
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文摘
目的观察正常兔眼玻璃体腔注射替考拉宁后对房水中细胞因子的影响。方法 24只健康日本大耳白兔,体质量2.5～3.0 kg,雌雄各半,随机分为实验组(替考拉宁1.0 mg)、对照组(灭菌生理盐水),于两组兔右眼玻璃体腔分别注射1 g/100 mL替考拉宁0.1 mL和灭菌生理盐水0.1 mL。术前和术后1、2、3、7、14和28 d抽取房水并采用ELISA法测定房水中TGF-β_2、IFN-γ、IL-6和IL-8的含量。结果术前实验组和对照组房水中TGF-β_2含量分别为(403.86±2.93)pg/mL和(403.83±2.30)pg/mL,术后两组TGF-β_2含量均下降(P<0.05)。术前实验组房水中IFN-γ、IL-6、IL-8含量分别为(340.41±17.36)pg/mL、(46.40±1.87)pg/mL、(44.73±1.37)pg/mL,对照组分别为(340.10±13.78)pg/mL、(46.56±1.86)pg/mL和(44.59±0.52)pg/mL;术后两组房水中IFN-γ、IL-6、IL-8均上升。结论玻璃体腔注射替考拉宁(1.0 mg)对房水中TGF-β_2、IFN-γ、IL-6和IL-8含量变化无影响。玻璃体腔注射操作可引起房水TGF-β_2含量下降,IFN-γ、IL-6和IL-8含量升高。
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关键词
替考拉宁
房水
细胞因子
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Keywords
teicoplanin aqueous humor cytokine
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分类号
R965
[医药卫生—药理学]
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