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鸡传染性法氏囊病病毒VP3蛋白的原核表达及其B细胞抗原表位鉴定 被引量:1
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作者 赵坤 郑玉姝 +4 位作者 赵德明 赵朴 赵恒章 常新耀 王选年 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期958-962,共5页
为鉴定鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP3蛋白中的B细胞抗原表位,本研究将IBDV的VP3基因亚克隆于pET-28a中,构建了表达重组质粒pETVP3,经IPTG诱导在E. coli BL21(DE3)中表达了重组蛋白(rVP3)。Western blot鉴定表明,rVP3能被IBDV抗血清特... 为鉴定鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP3蛋白中的B细胞抗原表位,本研究将IBDV的VP3基因亚克隆于pET-28a中,构建了表达重组质粒pETVP3,经IPTG诱导在E. coli BL21(DE3)中表达了重组蛋白(rVP3)。Western blot鉴定表明,rVP3能被IBDV抗血清特异性识别。同时,根据IBDVVP3的氨基酸序列,合成覆盖VP3全序列的重叠多肽,并与载体蛋白BSA藕联制备多肽人工结合抗原。Peptide-ELISA和Dot-ELISA检测结果表明VP3中有2个线性表位可以被已制备的单克隆抗体(MAb)识别,即728PRDWDRLPYLNL739和982PKPKPKPNAPTQ993;Dot-ELISA结果显示,在VP3中还存在另外4个线性多克隆抗体识别位点:818LANAPQAGSKSQRA831,851QREKD TRISKKMETMGIYFATP872,876ALNGHRGPSPGQLKYWQNTREI897和961QMKDLLLTAMEMK973。这些抗原表位的鉴定为开发IBD表位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP3蛋白 原核表达 重叠多肽 B细胞抗原表位
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苏丹红Ⅳ和柠檬黄人工抗原的制备与鉴定 被引量:2
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作者 刘珍 张改平 +2 位作者 职爱民 王方雨 李青旺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期538-541,共4页
目的:制备并鉴定苏丹红Ⅳ和柠檬黄人工抗原。方法:琥珀酸酐法构建苏丹红Ⅳ半抗原;以牛血清蛋白(BSA)为载体,用活性脂法分别与苏丹红Ⅳ半抗原和柠檬黄进行偶联。并用紫外吸收色谱法和电泳凝胶色谱鉴定制备是否成功。结果:经紫外吸收和摩... 目的:制备并鉴定苏丹红Ⅳ和柠檬黄人工抗原。方法:琥珀酸酐法构建苏丹红Ⅳ半抗原;以牛血清蛋白(BSA)为载体,用活性脂法分别与苏丹红Ⅳ半抗原和柠檬黄进行偶联。并用紫外吸收色谱法和电泳凝胶色谱鉴定制备是否成功。结果:经紫外吸收和摩尔吸收系数法估算得到苏丹红Ⅳ与BSA的偶联比31∶1,柠檬黄与BSA的偶联比17∶1。结论:成功制备出苏丹红Ⅳ和柠檬黄的人工抗原。 展开更多
关键词 苏丹红Ⅳ 柠檬黄 人工抗原
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