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传染性法氏囊病毒VP2蛋白的高效表达与免疫原性分析被引量：2: 1; 作者杨棋魏蔷 +4 位作者刘运超冯华蒋大伟陈玉梅张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期124-128,共5页; 为了实现传染性法氏囊病毒(IBDV)B87毒株VP2蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,将IBDV B87毒株VP2基因插入原核表达载体p ET-28a(+),构建重组质粒p ET28a-VP2,将其转化不同大肠杆菌基因工程菌株,通过IPTG诱导表达VP2外源蛋白。利用鸡传... 展开更多; 关键词传染性法氏囊病毒 B87毒株 VP2蛋白原核表达免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型SYBRGreen Real-time qPCR检测方法的建立被引量：9: 2; 作者冯华刘运超 +2 位作者陈玉梅魏蔷张改平《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期98-103,共6页; 为了建立一种基于SYBRGreen的猪圆环病毒2型(PCV2)荧光定量PCR诊断方法,以PCV2 ORF2基因序列为研究对象,构建p MD19T-ORF2重组质粒作为阳性标准品,设计特异性引物,对该方法的最适引物浓度、退火进行了优化,并对该方法的灵敏度、特异性... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型 PCV2 ORF2 SYBRGreen REAL-TIME qPCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪细小病毒病毒样颗粒疫苗研究进展被引量：12: 3; 作者刘运超陈玉梅 +4 位作者姬鹏超赵宝磊王聚财邓瑞广张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第10期12-16,共5页; 猪细小病毒(PPV)感染可导致母猪繁殖障碍、断奶仔猪多系统衰弱综合征和肠炎性腹泻等疾病,给养猪业造成巨大的经济损失。临床防控以接种疫苗为主,常用的疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗。随着生物技术的发展,新型PPV疫苗的研究工作成绩显著。VP... 展开更多; 关键词猪猪细小病毒 VLP 疫苗 VP2蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪乙脑病毒分离株BSF．ZZ-1和BSF．ZZ-3在BHK-21细胞上的传代培养及E基因序列稳定性分析被引量：3: 4; 作者胡博滕蔓 +5 位作者禹乐乐罗俊迟佳琪宿靖伟柴书军张改平《华北农学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期71-76,共6页; 为研究猪乙脑病毒(JEV)分离株遗传基因的稳定性,将JEV分离株BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3在BHK-21细胞上进行连续传代培养,并对其E基因的遗传稳定性进行了研究。结果表明,经连续传代60次后病毒E基因趋于稳定,BSF.ZZ-1毒株E蛋白氨基酸位点E21(A→V... 展开更多; 关键词乙脑病毒 BSF.ZZ-1 BSF.ZZ-3 BHK-21细胞系传代培养 E基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型重组Cap蛋白体外稳定性研究: 5; 作者刘肖金前跃 +5 位作者郭军庆王寅彪张腾李鹏陈丽颖张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第3期124-127,共4页; 为筛选猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白在体外的稳定性条件,采用建立的PCV2双抗夹心ELISA方法,对Cap蛋白在不同贮藏条件下的抗原活性进行了检测。结果表明,Cap蛋白在25℃以下贮存时,其活性保持稳定;贮存时温度变化对蛋白质稳定性影响较大;... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型 CAP蛋白双抗夹心ELISA 稳定性; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的原核表达、纯化及活性检测: 6; 作者张二芹滕蔓 +5 位作者罗俊赵孟孟许倩茹赵东邓瑞广张改平《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第9期28-30,共3页; 在大肠杆菌BL21(DE3)中表达乙脑病毒(JEV)EDⅢ蛋白、镍柱纯化并检测表达蛋白。采用RT-PCR方法扩增EDⅢ基因片段,构建重组表达载体p ET-28a-EDⅢ并转化到BL21(DE3)菌,经IPTG诱导蛋白表达,表达可溶性产物经NiNTA亲和层析纯化,最后通过SDS-... 展开更多; 关键词乙脑病毒 EDⅢ蛋白表达蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒入侵受体唾液酸黏附素的表达与纯化被引量：3: 7; 作者侯婕李睿 +2 位作者马红芳乔松林张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第3期130-134,共5页; 为了探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)假定受体唾液酸黏附素(sialoadhesin,Sn)的结构生物学信息及其在PRRSV入侵过程中所发挥的作用,利用昆虫表达系统(果蝇胚胎细胞,S2细胞)表... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒唾液酸黏附素 v-set Ig-like结构域 S2细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

HPV45-L1和HPV58-L1蛋白植物表达载体的构建及水稻转基因植株的鉴定被引量：2: 8; 作者王聚财刘运超 +6 位作者陈玉梅孟凤丽王爱萍张二芹许倩茹邓瑞广张改平《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期55-60,共6页; 利用水稻胚乳细胞生物反应器,构建含有HPV45-L1和HPV58-L1基因的重组植物表达载体,为HPV-45L1和HPV58-L1蛋白的表达提供一种新的高效、低廉的表达方式。利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV45-L1和HPV58-L1蛋白编码基因,将其重组于中间载体p... 展开更多; 关键词人乳头瘤病毒转基因水稻水稻胚乳特异性启动子根癌农杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性法氏囊病毒VP2蛋白的高效表达与免疫原性分析被引量：2: 1; 作者杨棋魏蔷刘运超冯华蒋大伟陈玉梅张改平; 机构河南农业大学生命科学学院河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期124-128,共5页; 基金国家重点研发计划(2017YFD0501103); 文摘为了实现传染性法氏囊病毒(IBDV)B87毒株VP2蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,将IBDV B87毒株VP2基因插入原核表达载体p ET-28a(+),构建重组质粒p ET28a-VP2,将其转化不同大肠杆菌基因工程菌株,通过IPTG诱导表达VP2外源蛋白。利用鸡传染性法氏囊病抗原快速检测试纸筛选,确定了BL21(DE3)为VP2可溶性蛋白的高效表达菌株。SDS-PAGE、Western blot分析表明,VP2实现了可溶性表达,且可溶性VP2蛋白具有良好的反应原性。将表达的重组蛋白利用琼脂扩散试验(AGP)分析,结果表明,VP2蛋白的AGP效价达到1∶64。将重组蛋白免疫接种SPF鸡,制备的抗血清AGP效价可达1∶16,说明表达的B87毒株VP2蛋白免疫原性良好。; 关键词传染性法氏囊病毒 B87毒株 VP2蛋白原核表达免疫原性; Keywords Infectious bursal disease virus B87 strain VP2 protein Prokaryotic expression Immunogenicity; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2型SYBRGreen Real-time qPCR检测方法的建立被引量：9: 2; 作者冯华刘运超陈玉梅魏蔷张改平; 机构河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室农业部动物免疫学重点实验室郑州大学生命科学院河南农业大学牧医工程学院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期98-103,共6页; 基金国家重点研发计划项目(2016YFD0500704) 河南省重点研发与推广专项(182102110087); 文摘为了建立一种基于SYBRGreen的猪圆环病毒2型(PCV2)荧光定量PCR诊断方法,以PCV2 ORF2基因序列为研究对象,构建p MD19T-ORF2重组质粒作为阳性标准品,设计特异性引物,对该方法的最适引物浓度、退火进行了优化,并对该方法的灵敏度、特异性、可重复性以及临床样品检出率进行了评价。结果表明,该方法引物的最佳终浓度为0. 2 mol/L,最适退火温度为55℃;检测限可达到3. 0×10~2个拷贝/mL,而普通PCR检测限在3. 0×10~4个拷贝/mL;溶解曲线分析显示,在77~79℃有单一的溶解峰出现,并与CSFV、PPV、PRRSV、PRV没有交叉反应;组内重复性变异系数为0. 29%~0. 32%,组间变异系数为0. 32%~0. 36%;此外,该方法对临床样品的检出率为81. 5%(31/38),而常规PCR为68. 4%(26/38)。因此,相比常规PCR,该方法更为快速、灵敏、特异、稳定,更适合PCV2临床样品的检测,可为该PCV2早期感染的快速检测提供新方法。; 关键词猪圆环病毒2型 PCV2 ORF2 SYBRGreen REAL-TIME qPCR; Keywords Porcine circovirus type 2 PCV2 ORF2 SYBRGreen Real-time qPCR; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪细小病毒病毒样颗粒疫苗研究进展被引量：12: 3; 作者刘运超陈玉梅姬鹏超赵宝磊王聚财邓瑞广张改平; 机构河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室郑州大学基础医学院河南农业大学牧医工程学院; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第10期12-16,共5页; 基金中国博士后科学基金(2013M541980) 河南省重大科技专项(141100110100) 河南省基础前瞻类项目(20141644); 文摘猪细小病毒(PPV)感染可导致母猪繁殖障碍、断奶仔猪多系统衰弱综合征和肠炎性腹泻等疾病,给养猪业造成巨大的经济损失。临床防控以接种疫苗为主,常用的疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗。随着生物技术的发展,新型PPV疫苗的研究工作成绩显著。VP2蛋白是PPV主要的衣壳蛋白,对研究新型PPV疫苗至关重要,综述了猪细小病毒VP2蛋白及病毒样颗粒疫苗的研究进展,以期为新型PPV疫苗的研究提供参考。; 关键词猪猪细小病毒 VLP 疫苗 VP2蛋白; Keywords swine porcine parvovirus VLP vaccine VP2; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪乙脑病毒分离株BSF．ZZ-1和BSF．ZZ-3在BHK-21细胞上的传代培养及E基因序列稳定性分析被引量：3: 4; 作者胡博滕蔓禹乐乐罗俊迟佳琪宿靖伟柴书军张改平; 机构吉林大学畜牧兽医学院河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室河南农业大学牧医工程学院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期71-76,共6页; 基金国家“公益性”行业(农业)科研专项经费(201203082-5); 文摘为研究猪乙脑病毒(JEV)分离株遗传基因的稳定性,将JEV分离株BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3在BHK-21细胞上进行连续传代培养,并对其E基因的遗传稳定性进行了研究。结果表明,经连续传代60次后病毒E基因趋于稳定,BSF.ZZ-1毒株E蛋白氨基酸位点E21(A→V)、E200(T→A)、E244(G→E)、E279(M→K)和E426(G→D),以及BSF.ZZ-3毒株的E244(G→E)、E255(F→L)、E285(M→L)、E368(L→S)和E497(N→S)传代后发生稳定点突变。与JEV毒力相关的部分位点如E107、E138、E176、E177和E315遗传稳定性较高,经连续传代后均未发生突变,与疫苗株SA14-14-2相应位点完全一致。但是,另外一些位点的遗传稳定性较差,如BSF.ZZ-3的E279(M→K→M)出现反复突变。这些突变是否与JEV的宿主细胞适应性及毒力变化相关有待进一步研究。; 关键词乙脑病毒 BSF.ZZ-1 BSF.ZZ-3 BHK-21细胞系传代培养 E基因序列分析; Keywords JEV BSF.ZZ-1 BSF.ZZ-3 BHK-21 cell line Serial subcultivation E gene Sequence analysis; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2型重组Cap蛋白体外稳定性研究: 5; 作者刘肖金前跃郭军庆王寅彪张腾李鹏陈丽颖张改平; 机构河南农业大学牧医工程学院河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室新乡学院生命科学与技术系生物技术研究中心; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第3期124-127,共4页; 基金农业部公益性项目(201203039); 文摘为筛选猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白在体外的稳定性条件,采用建立的PCV2双抗夹心ELISA方法,对Cap蛋白在不同贮藏条件下的抗原活性进行了检测。结果表明,Cap蛋白在25℃以下贮存时,其活性保持稳定;贮存时温度变化对蛋白质稳定性影响较大;在甘氨酸和甘油2种蛋白保护剂存在条件下,蛋白质活性稳定性增强。表明,Cap蛋白的体外贮存、改造及病毒样颗粒组装应在25℃以下进行,尽量避免温度剧烈变化,同时添加蛋白质保护剂有利于蛋白质的体外稳定。; 关键词猪圆环病毒2型 CAP蛋白双抗夹心ELISA 稳定性; Keywords PCV2 Cap protein double antibody sandwich ELISA stability; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学] Q51 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的原核表达、纯化及活性检测: 6; 作者张二芹滕蔓罗俊赵孟孟许倩茹赵东邓瑞广张改平; 机构河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室农业部动物免疫学重点实验室河南农业大学牧医工程学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第9期28-30,共3页; 基金河南省博士后科研资助项目(2013047) 河南省科技攻关计划项目(152102110127) 河南省农业科技推广财政补助资金项目(YCN201519111); 文摘在大肠杆菌BL21(DE3)中表达乙脑病毒(JEV)EDⅢ蛋白、镍柱纯化并检测表达蛋白。采用RT-PCR方法扩增EDⅢ基因片段,构建重组表达载体p ET-28a-EDⅢ并转化到BL21(DE3)菌,经IPTG诱导蛋白表达,表达可溶性产物经NiNTA亲和层析纯化,最后通过SDS-PAGE和Western-Blot检测表达蛋白。结果成功构建原核表达载体p ET-28a-EDⅢ;EDⅢ蛋白在BL21(DE3)菌已表达,经Ni-NTA获得纯化蛋白,并经Western-Blot检测具有反应活性。; 关键词乙脑病毒 EDⅢ蛋白表达蛋白; Keywords Japanese encephalitis virus domain Ⅲ of envelope protein expression protein; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒入侵受体唾液酸黏附素的表达与纯化被引量：3: 7; 作者侯婕李睿马红芳乔松林张改平; 机构河南农业大学牧医工程学院河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第3期130-134,共5页; 基金国家自然科学基金重大项目(31490601) 河南省基础与前沿技术研究项目(162300410252); 文摘为了探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)假定受体唾液酸黏附素(sialoadhesin,Sn)的结构生物学信息及其在PRRSV入侵过程中所发挥的作用,利用昆虫表达系统(果蝇胚胎细胞,S2细胞)表达了猪源Sn v-set Ig-like结构域重组蛋白,并进行了Western blotting检测、质谱检测及镍柱纯化试验。结果表明,成功表达了目的重组蛋白,表达的重组蛋白序列与Sn v-set Ig-like结构域目的蛋白序列100%匹配,且获得的重组蛋白具有生物学活性,纯度高达99%。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒唾液酸黏附素 v-set Ig-like结构域 S2细胞; Keywords PRRSV sialoadhesin v-set Ig-like domain S2 cell; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HPV45-L1和HPV58-L1蛋白植物表达载体的构建及水稻转基因植株的鉴定被引量：2: 8; 作者王聚财刘运超陈玉梅孟凤丽王爱萍张二芹许倩茹邓瑞广张改平; 机构河南农业大学牧医工程学院河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室郑州大学生命科学学院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期55-60,共6页; 基金河南省高校科技创新团队和创新人才支持计划(14HASTIT027); 文摘利用水稻胚乳细胞生物反应器,构建含有HPV45-L1和HPV58-L1基因的重组植物表达载体,为HPV-45L1和HPV58-L1蛋白的表达提供一种新的高效、低廉的表达方式。利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV45-L1和HPV58-L1蛋白编码基因,将其重组于中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA-1300中,构建含HPV45-L1和HPV58-L1基因的植物表达载体pCAMBIA-1300-pMP3-HPV45-L1、pCAMBIA-1300-pMP3-HPV58-L1,随后采用根癌农杆菌侵染水稻愈伤组织介导的水稻遗传转化,获得HPV-L1转基因水稻植株。PCR检测结果表明,HPV45-L1和HPV58-L1基因已整合到水稻基因组中,说明已成功构建水稻胚乳特异性表达载体。; 关键词人乳头瘤病毒转基因水稻水稻胚乳特异性启动子根癌农杆菌; Keywords Human papilloma virus Transgenic rice The rice specific endosperm-promoter Agrobacterium tumefaciens; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S511.03 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	传染性法氏囊病毒VP2蛋白的高效表达与免疫原性分析	杨棋魏蔷刘运超冯华蒋大伟陈玉梅张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2018	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪圆环病毒2型SYBRGreen Real-time qPCR检测方法的建立	冯华刘运超陈玉梅魏蔷张改平	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2018	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪细小病毒病毒样颗粒疫苗研究进展	刘运超陈玉梅姬鹏超赵宝磊王聚财邓瑞广张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2015	12	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪乙脑病毒分离株BSF．ZZ-1和BSF．ZZ-3在BHK-21细胞上的传代培养及E基因序列稳定性分析	胡博滕蔓禹乐乐罗俊迟佳琪宿靖伟柴书军张改平	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪圆环病毒2型重组Cap蛋白体外稳定性研究	刘肖金前跃郭军庆王寅彪张腾李鹏陈丽颖张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的原核表达、纯化及活性检测	张二芹滕蔓罗俊赵孟孟许倩茹赵东邓瑞广张改平	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	猪繁殖与呼吸综合征病毒入侵受体唾液酸黏附素的表达与纯化	侯婕李睿马红芳乔松林张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料
8	HPV45-L1和HPV58-L1蛋白植物表达载体的构建及水稻转基因植株的鉴定	王聚财刘运超陈玉梅孟凤丽王爱萍张二芹许倩茹邓瑞广张改平	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料