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水稻愈伤特异性启动子P_(OsCSPpro)在花生愈伤中的功能鉴定及碱基编辑效率分析
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作者 薛璐璐 李晓娜 +7 位作者 罗丹丹 刘涵 渠鹏宇 黄冰艳 韩锁义 董文召 石磊 张新友 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第5期1091-1099,共9页
CRISPR/Cas9基因编辑系统的脱靶问题是研究者们一直以来的重点关注问题,采用愈伤特异性启动子驱动Cas9蛋白能够降低编辑株系成苗后的脱靶风险。为有效降低脱靶效应,本研究克隆了一个源自水稻的愈伤特异性启动子P_(OsCSPpro),研究了其在... CRISPR/Cas9基因编辑系统的脱靶问题是研究者们一直以来的重点关注问题,采用愈伤特异性启动子驱动Cas9蛋白能够降低编辑株系成苗后的脱靶风险。为有效降低脱靶效应,本研究克隆了一个源自水稻的愈伤特异性启动子P_(OsCSPpro),研究了其在花生愈伤中的表达活性及碱基编辑效率。GUS组织化学染色结果表明,该启动子在花生愈伤中具有活性。选择AhALS2基因第190位氨基酸P190为靶点,以该启动子驱动胞嘧啶脱氨酶和nCas9蛋白,构建碱基编辑载体并转化花生,对该启动子的编辑效率进行检验。结果表明,P_(OsCSPpro)驱动的胞嘧啶碱基编辑器在花生中具有编辑活性,编辑效率为3.6%。 展开更多
关键词 花生 愈伤特异性启动子 P_(OsCSPpro) 脱靶效应 GUS报告基因 碱基编辑
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