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抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定
被引量：
5
1
作者
刘运超
陈玉梅
+4 位作者
冯丽丽
汪磊
王聚财
陆东峰
张改平
《河南农业科学》
北大核心
2019年第12期114-120,共7页
为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获...
为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获得5D1、8H7、9A1和13B2共4株能够稳定分泌抗CSFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。4株单克隆抗体轻链均属于κ型,其中5D1、8H7、13B2为IgG1亚型,9A1为IgG2c亚型。间接ELISA检测结果显示,4株单克隆抗体的腹水效价在2.56×10^5~1.02×10^6;IPMA效价分别为6.40×10^4、1.28×10^5、2.56×10^5、1.28×10^5;SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,4株单克隆抗体均能与经原核表达系统及杆状病毒表达系统获得的CSFV E2蛋白发生特异性反应;IPMA检测结果显示,4株单克隆抗体均能与CSFV发生特异性反应,而与牛流行性腹泻病毒(BVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒(PCV2)均无交叉反应。病毒中和试验证实,单克隆抗体13B2具有中和活性,其中和效价为1.28×10^4。综上,成功筛选出4株能够分泌抗CSFV特异性抗体的杂交瘤细胞株,其中单克隆抗体13B2具有中和CSFV感染活性。
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关键词
猪瘟病毒
E2蛋白
中和性单克隆抗体
抗体中和效价
免疫过氧化物酶单层细胞试验
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职称材料
题名
抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定
被引量：
5
1
作者
刘运超
陈玉梅
冯丽丽
汪磊
王聚财
陆东峰
张改平
机构
河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点开放实验室
郑州大
学
生命
科学
学院
河南省
农业
科学院
农业
经济与信息研究所
河南
花花牛实业总公司
出处
《河南农业科学》
北大核心
2019年第12期114-120,共7页
基金
国家重点研发计划项目(2016YFD0500704
2017YFD0501103)
文摘
为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获得5D1、8H7、9A1和13B2共4株能够稳定分泌抗CSFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。4株单克隆抗体轻链均属于κ型,其中5D1、8H7、13B2为IgG1亚型,9A1为IgG2c亚型。间接ELISA检测结果显示,4株单克隆抗体的腹水效价在2.56×10^5~1.02×10^6;IPMA效价分别为6.40×10^4、1.28×10^5、2.56×10^5、1.28×10^5;SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,4株单克隆抗体均能与经原核表达系统及杆状病毒表达系统获得的CSFV E2蛋白发生特异性反应;IPMA检测结果显示,4株单克隆抗体均能与CSFV发生特异性反应,而与牛流行性腹泻病毒(BVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒(PCV2)均无交叉反应。病毒中和试验证实,单克隆抗体13B2具有中和活性,其中和效价为1.28×10^4。综上,成功筛选出4株能够分泌抗CSFV特异性抗体的杂交瘤细胞株,其中单克隆抗体13B2具有中和CSFV感染活性。
关键词
猪瘟病毒
E2蛋白
中和性单克隆抗体
抗体中和效价
免疫过氧化物酶单层细胞试验
Keywords
Classical swine fever virus
E2 protein
Neutralizing monoclonal antibodies
Antibody neutralization titer
Immunoperoxidase monolayer assay
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定
刘运超
陈玉梅
冯丽丽
汪磊
王聚财
陆东峰
张改平
《河南农业科学》
北大核心
2019
5
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