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O型口蹄疫病毒VP0和VP1蛋白的可溶性表达与反应原性分析被引量：4: 1; 作者赵宝磊刘运超 +5 位作者陈玉梅姬鹏超王聚财刘畅杨素珍张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第2期105-110,共6页; 为了高效可溶性表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP0、VP1结构蛋白,根据大肠杆菌密码子的偏爱性优化合成VP0和VP1基因片段,并将其克隆到p E-SUMO载体中,构建重组质粒SUMOVP0和SUMO-VP1,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒 VP0、VP1结构蛋白可溶性表达 SUMO标签; 在线阅读下载PDF 职称材料

马立克氏病病毒编码的miR-M12-5p对鸡HVCN1基因表达的靶向调控被引量：5: 2; 作者李会珍滕蔓 +5 位作者党露冯丽丽马圣明赵朴罗俊张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第6期121-125,129,共6页; 为研究miR-M12-5p在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)感染过程中的调控作用,利用生物信息学方法对其候选靶基因进行预测分析,发现4个miR-M12-5p的结合靶点。体外双荧光素酶报告试验结果表明,miR-M12-5p可结合宿主鸡的氢离子... 展开更多; 关键词马立克氏病病毒 miRNA miR-M12-5p 靶基因 HVCN1基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪细小病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 3; 作者刘运超杨苏珍 +6 位作者陈玉梅王聚财尚延丽魏蔷陈维聪冯华张改平《河南农业科学》北大核心 2021年第12期155-162,共8页; 为了制备具有中和活性的抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)单克隆抗体,采用血凝试验(HA)鉴定纯化的重组PPV VP2蛋白的活性,将重组VP2蛋白与弗氏佐剂混合后免疫BALB/c小鼠。免疫3次后,小鼠血清的血凝抑制(HI)效价可达1∶2^(16),取免... 展开更多; 关键词猪细小病毒 VP2蛋白中和性单克隆抗体免疫过氧化物酶单层细胞试验杂交瘤细胞株; 在线阅读下载PDF 职称材料

乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化: 4; 作者滕蔓冯丽丽 +6 位作者罗俊樊剑鸣王方雨郅玉宝李秀杰邓瑞广张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第12期117-120,139,共5页; 研究了日本流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）猪源分离株CSF.XZ-2D感染的BHK-21细胞培养物中JEV的浓缩及纯化方法,对浓缩及纯化后的病毒TCID_（50）效价分别进行测定。结果表明,经差速离心后病毒液在4℃条件下分别... 展开更多; 关键词乙脑病毒 BHK-21细胞蔗糖密度梯度离心浓缩纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型的分离鉴定及其全基因组序列分析被引量：2: 5; 作者汪磊赵宝磊 +3 位作者冯华刘运超魏蔷张改平《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期117-121,共5页; 为分离鉴定流行于河南省的猪圆环病毒2型(PCV2),对河南省不同地区猪场的11份疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)猪的病料进行分离鉴定,得到PCV2毒株。通过PCR检测,11份临床疑似病料中,7份确诊为PCV2阳性病料,阳性率为63.6%。挑选出阳... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型分离鉴定 IPMA 全基因组序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名O型口蹄疫病毒VP0和VP1蛋白的可溶性表达与反应原性分析被引量：4: 1; 作者赵宝磊刘运超陈玉梅姬鹏超王聚财刘畅杨素珍张改平; 机构河南农业大学牧医工程学院河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第2期105-110,共6页; 基金国家重点研发计划项目(2016YFD0500704) 河南省基础与前沿技术研究计划项目(152300410238) +1 种基金河南省重大科技专项(141100110100); 文摘为了高效可溶性表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP0、VP1结构蛋白,根据大肠杆菌密码子的偏爱性优化合成VP0和VP1基因片段,并将其克隆到p E-SUMO载体中,构建重组质粒SUMOVP0和SUMO-VP1,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,并优化诱导温度、时间和IPTG浓度等表达条件。结果显示,SUMO-VP0可溶性蛋白表达的最佳条件为:20℃条件下,0.1 mmol/L IPTG诱导表达8 h;SUMO-VP1可溶性蛋白表达的最佳条件为:37℃条件下,0.1 mmol/L IPTG诱导表达12 h。SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明,表达的SUMOVP0、SUMO-VP1可溶性蛋白能够被抗FMDV的阳性血清识别,具有很好的反应原性。; 关键词口蹄疫病毒 VP0、VP1结构蛋白可溶性表达 SUMO标签; Keywords FMDV structural protein VP0 and VP1 soluble protein expression SUMO tag; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马立克氏病病毒编码的miR-M12-5p对鸡HVCN1基因表达的靶向调控被引量：5: 2; 作者李会珍滕蔓党露冯丽丽马圣明赵朴罗俊张改平; 机构河南农业大学牧医工程学院河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南省农业科学院农业经济与信息研究所河南科技大学动物科学学院; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第6期121-125,129,共6页; 基金国家自然科学基金面上项目(31372445) 河南省农业科学院优秀青年科技基金项目(2013YQ28); 文摘为研究miR-M12-5p在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)感染过程中的调控作用,利用生物信息学方法对其候选靶基因进行预测分析,发现4个miR-M12-5p的结合靶点。体外双荧光素酶报告试验结果表明,miR-M12-5p可结合宿主鸡的氢离子电压门控通道1(HVCN1)基因mRNA的3'-UTR相应位点并发生特异性相互作用。实时荧光定量PCR分析进一步证实,miR-M12-5p能够在体内下调HVCN1基因的表达水平。上述结果表明,miR-M12-5p可以靶向调控宿主基因HVCN1的表达。; 关键词马立克氏病病毒 miRNA miR-M12-5p 靶基因 HVCN1基因; Keywords MDV miRNA miR-M12-5p target gene HVCN1 gene; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪细小病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 3; 作者刘运超杨苏珍陈玉梅王聚财尚延丽魏蔷陈维聪冯华张改平; 机构河南省农业科学院动物免疫学实验室/农业部动物免疫学重点实验室郑州大学生命科学学院; 出处《河南农业科学》北大核心 2021年第12期155-162,共8页; 基金国家重点研发计划项目(2016YFD0500704)。; 文摘为了制备具有中和活性的抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)单克隆抗体,采用血凝试验(HA)鉴定纯化的重组PPV VP2蛋白的活性,将重组VP2蛋白与弗氏佐剂混合后免疫BALB/c小鼠。免疫3次后,小鼠血清的血凝抑制(HI)效价可达1∶2^(16),取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,采用有限稀释法进行多轮亚克隆,经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选,成功获得杂交瘤细胞株5F7和11B3,能够稳定分泌中和性单克隆抗体。单克隆抗体5F7和11B3的轻链型均为Kappa,重链型分别为IgG2a和IgG2b。经ELISA和IPMA检测,单克隆抗体5F7和11B3均能与重组PPV VP2蛋白和PPV病毒粒子发生特异反应,而与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)无交叉反应。5F7和11B3腹水针对PPV病毒反应的ELSIA效价分别为1∶10 240和1∶20 480;针对PPV感染PK15细胞的中和效价分别为1∶2^(11)和1∶2^(10)。Western blot鉴定结果显示,单克隆抗体5F7和11B3均不与变性的VP2蛋白发生反应,说明2株单克隆抗体均识别重组PPV VP2蛋白的构象型表位。综上,成功制备了2株具有中和活性的抗PPV单克隆抗体。; 关键词猪细小病毒 VP2蛋白中和性单克隆抗体免疫过氧化物酶单层细胞试验杂交瘤细胞株; Keywords Porcine parvovirus VP2 protein Neutralizing monoclonal antibodies Immunoperoxidase monolayer assay(IPMA) Hybridoma cell line; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化: 4; 作者滕蔓冯丽丽罗俊樊剑鸣王方雨郅玉宝李秀杰邓瑞广张改平; 机构河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南省农业科学院农业经济与信息研究所郑州大学公共卫生学院河南农业大学牧医工程学院; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第12期117-120,139,共5页; 基金河南省农业科学院科研发展专项资金项目(20157817) 河南省科技攻关计划项目(152102110127) +2 种基金国家公益性行业(农业)科研专项经费项目(201203082-5); 文摘研究了日本流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）猪源分离株CSF.XZ-2D感染的BHK-21细胞培养物中JEV的浓缩及纯化方法,对浓缩及纯化后的病毒TCID_（50）效价分别进行测定。结果表明,经差速离心后病毒液在4℃条件下分别以30 000 r/min、40 000 r/min、50 000r/min、60 000 r/min超速离心3 h,其中50 000 r/min超速离心可将绝大部分JEV病毒粒子充分沉淀至离心管底部,浓缩效果最佳;病毒沉淀用PBS重悬后进行不连续蔗糖密度梯度离心,病毒粒子主要集中在35%~50%的区带蔗糖层。; 关键词乙脑病毒 BHK-21细胞蔗糖密度梯度离心浓缩纯化; Keywords Japanese encephalitis virus BHK-21 cell sucrosedensitygradientcentrifugation concentra-tion purification; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2型的分离鉴定及其全基因组序列分析被引量：2: 5; 作者汪磊赵宝磊冯华刘运超魏蔷张改平; 机构河南农业大学牧医工程学院河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期117-121,共5页; 基金河南省重点研发与推广专项(科技攻关)(182102110087) 国家重点研发计划项目(2016YFD0500704); 文摘为分离鉴定流行于河南省的猪圆环病毒2型(PCV2),对河南省不同地区猪场的11份疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)猪的病料进行分离鉴定,得到PCV2毒株。通过PCR检测,11份临床疑似病料中,7份确诊为PCV2阳性病料,阳性率为63.6%。挑选出阳性值较高的毒株命名为zmd-20161022,通过增殖培养筛选出优良毒株,并对其进行单层过氧化物酶试验(IPMA)鉴定,分析免疫原性;应用PCR对该病毒全基因组进行特异性扩增,经测序后对该病毒的同源性和系统进化进行分析。结果显示,该毒株序列全长1 767 bp,同源性分析发现与国内3株PCV2毒株(AY686763、HM641752、HM038034)的同源性为95.2%~98.3%,与基因登录号为HM038030.1的同源性高达98.6%。系统进化树分析发现,zmd-20161022毒株与基因登录号为HM038030.1的亲缘关系很近,被鉴定为PCV2b-1c型,属于PCV2b的一种亚型。; 关键词猪圆环病毒2型分离鉴定 IPMA 全基因组序列分析; Keywords Porcine circovirus type 2 Isolation and identification IPMA Genome Sequence analysis; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	O型口蹄疫病毒VP0和VP1蛋白的可溶性表达与反应原性分析	赵宝磊刘运超陈玉梅姬鹏超王聚财刘畅杨素珍张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	马立克氏病病毒编码的miR-M12-5p对鸡HVCN1基因表达的靶向调控	李会珍滕蔓党露冯丽丽马圣明赵朴罗俊张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2016	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪细小病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定	刘运超杨苏珍陈玉梅王聚财尚延丽魏蔷陈维聪冯华张改平	《河南农业科学》北大核心	2021	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化	滕蔓冯丽丽罗俊樊剑鸣王方雨郅玉宝李秀杰邓瑞广张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪圆环病毒2型的分离鉴定及其全基因组序列分析	汪磊赵宝磊冯华刘运超魏蔷张改平	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2018	2	在线阅读下载PDF 职称材料