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赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定
被引量:
2
1
作者
王耀
胡骁飞
+5 位作者
裴亚峰
赵东
刘运超
张改平
李志西
邓瑞广
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1271-1277,共7页
从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位,并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,以EL...
从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位,并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,并以筛选的模拟表位建立赭曲霉毒素A的ELISA检测方法。经过4轮亲和筛选,共得到22株与OTA mAb特异结合的阳性噬菌体克隆,且该结合都能够被OTA标品阻断,DNA测序及多肽核心序列分析后,得到赭曲霉毒素A的模拟表位的主要序列为:MPLWXDL,X为任意氨基酸,以阳性噬菌体克隆建立的竞争ELISA检测方法,线性范围为250~8000pg/ml。基于制备的OTA mAb,利用噬菌体随机七肽库可成功筛选到赭曲霉毒素A的模拟表位,并能够替代OTA标品建立直接竞争模式的免疫学快速检测方法。
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关键词
噬菌体随机七肽库
赭曲霉毒素A
模拟表位
单克隆抗体
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职称材料
伏马菌素B_1人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备
被引量:
10
2
作者
王耀
胡骁飞
+5 位作者
裴亚峰
张小辉
龚芳
侯玉泽
张改平
邓瑞广
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期113-117,140,共6页
本研究合成并鉴定伏马菌素B1(FB1)人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源FB1多克隆抗血清。采用碳二亚胺(EDC)法将FB1分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫抗原FB1-BSA和检测抗原FB1-OVA,经鉴定后,分别按10和30μg/只的剂...
本研究合成并鉴定伏马菌素B1(FB1)人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源FB1多克隆抗血清。采用碳二亚胺(EDC)法将FB1分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫抗原FB1-BSA和检测抗原FB1-OVA,经鉴定后,分别按10和30μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔3周,最后1次免疫30d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达1∶104以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50为61.3ng/ml,且具有良好的特异性。本试验成功合成了FB1人工抗原,并制备了敏感性高、特异性好的鼠源多克隆抗体血清,为FB1单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
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关键词
伏马菌素B1
人工抗原
多抗血清
ELISA
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职称材料
草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备
被引量:
6
3
作者
王晶
王耀
+5 位作者
王方雨
胡骁飞
姚静静
邓瑞广
侯玉泽
张改平
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期194-200,共7页
为检测小分子农药草甘膦(PMG)的残留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl)glycine PMG]人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法将PMG分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;...
为检测小分子农药草甘膦(PMG)的残留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl)glycine PMG]人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法将PMG分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;经紫外扫描、SDS-PAGE电泳、质谱鉴定后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清;利用间接ELISA法测定多抗血清效价,竞争ELISA测定多抗血清的敏感性和特异性。结果表明,所合成的免疫抗原效果较好,免疫的4只小鼠效价均达1∶104以上,4号小鼠的多抗血清敏感性最高,半数抑制浓度IC50为31.4μg·m L-1,与其他有机磷类农药无交叉反应,具备良好的特异性。本试验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的鼠源多抗血清,为PMG单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
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关键词
草甘膦
人工抗原
多抗血清
ELISA
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职称材料
题名
赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定
被引量:
2
1
作者
王耀
胡骁飞
裴亚峰
赵东
刘运超
张改平
李志西
邓瑞广
机构
河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室
西北农林科技大
学
食品
科学
与工程
学院
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1271-1277,共7页
基金
农业部公益性行业(农业)科研专项(201203040)
河南省扶持企业自主创新资金项目
河南省农业科学院科技发展及示范推广专项基金
文摘
从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位,并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,并以筛选的模拟表位建立赭曲霉毒素A的ELISA检测方法。经过4轮亲和筛选,共得到22株与OTA mAb特异结合的阳性噬菌体克隆,且该结合都能够被OTA标品阻断,DNA测序及多肽核心序列分析后,得到赭曲霉毒素A的模拟表位的主要序列为:MPLWXDL,X为任意氨基酸,以阳性噬菌体克隆建立的竞争ELISA检测方法,线性范围为250~8000pg/ml。基于制备的OTA mAb,利用噬菌体随机七肽库可成功筛选到赭曲霉毒素A的模拟表位,并能够替代OTA标品建立直接竞争模式的免疫学快速检测方法。
关键词
噬菌体随机七肽库
赭曲霉毒素A
模拟表位
单克隆抗体
Keywords
Phage random 7 peptide library
Ochratoxin A
mimicking epitope
monoclonal antibody
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
伏马菌素B_1人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备
被引量:
10
2
作者
王耀
胡骁飞
裴亚峰
张小辉
龚芳
侯玉泽
张改平
邓瑞广
机构
河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室
/
河南省
动物
免疫
学
重点
实验室
河南
科技大
学
食品与生物工程
学院
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期113-117,140,共6页
基金
农业部公益性行业(农业)科研专项(201203040)
河南省农业科学院科技发展及示范推广专项基金项目
文摘
本研究合成并鉴定伏马菌素B1(FB1)人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源FB1多克隆抗血清。采用碳二亚胺(EDC)法将FB1分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫抗原FB1-BSA和检测抗原FB1-OVA,经鉴定后,分别按10和30μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔3周,最后1次免疫30d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达1∶104以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50为61.3ng/ml,且具有良好的特异性。本试验成功合成了FB1人工抗原,并制备了敏感性高、特异性好的鼠源多克隆抗体血清,为FB1单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
关键词
伏马菌素B1
人工抗原
多抗血清
ELISA
Keywords
Fumonisin B1
artificial antigen
polyclonal antiserum
ELISA
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备
被引量:
6
3
作者
王晶
王耀
王方雨
胡骁飞
姚静静
邓瑞广
侯玉泽
张改平
机构
河南
科技大
学
食品与生物工程
学院/
畜禽疫病诊断与食品安全检测
河南省
工程
实验室
河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室
/
河南省
动物
免疫
学
重点
实验室
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期194-200,共7页
基金
"十二五"国家科技支撑计划(2014BAD13B05)
河南省基础与前沿项目(142300413222)
河南科技大学博士科研启动基金项目(13480062)
文摘
为检测小分子农药草甘膦(PMG)的残留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl)glycine PMG]人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法将PMG分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;经紫外扫描、SDS-PAGE电泳、质谱鉴定后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清;利用间接ELISA法测定多抗血清效价,竞争ELISA测定多抗血清的敏感性和特异性。结果表明,所合成的免疫抗原效果较好,免疫的4只小鼠效价均达1∶104以上,4号小鼠的多抗血清敏感性最高,半数抑制浓度IC50为31.4μg·m L-1,与其他有机磷类农药无交叉反应,具备良好的特异性。本试验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的鼠源多抗血清,为PMG单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
关键词
草甘膦
人工抗原
多抗血清
ELISA
Keywords
glyphosate
artificial antigen
polyclonal antiserum
ELISA
分类号
TQ450.263 [化学工程—农药化工]
O657 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定
王耀
胡骁飞
裴亚峰
赵东
刘运超
张改平
李志西
邓瑞广
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
伏马菌素B_1人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备
王耀
胡骁飞
裴亚峰
张小辉
龚芳
侯玉泽
张改平
邓瑞广
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备
王晶
王耀
王方雨
胡骁飞
姚静静
邓瑞广
侯玉泽
张改平
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
6
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职称材料
已选择
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