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LncRNA-MIAT靶向miR-150-5p对病理性血管化角膜及VEGF、MMP-9的影响 被引量：1
1
作者 赵凌军 杨潇远 +1 位作者 王新茹 李季 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第1期20-24,共5页
目的探讨长链非编码核糖核酸心肌梗死相关转录本(LncRNA-MIAT)靶向miR-150-5p对病理性血管化角膜血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法100只大鼠随机分为对照组、模型组、MIAT-NC组、MIAT组和sh-MIAT组,除对照... 目的探讨长链非编码核糖核酸心肌梗死相关转录本(LncRNA-MIAT)靶向miR-150-5p对病理性血管化角膜血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法100只大鼠随机分为对照组、模型组、MIAT-NC组、MIAT组和sh-MIAT组,除对照组外,其余大鼠以碱烧伤法建立角膜血管化模型。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测大鼠角膜组织中LncRNA-MIAT和miR-150-5p相对表达情况;双荧光素酶实验验证LncRNA-MIAT和miR-150-5p的靶向关系;ELISA检测大鼠角膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8水平;HE染色观察大鼠角膜组织中血管病理变化;Western blot检测大鼠角膜组织中VEGF、MMP-9相对表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠角膜组织中LncRNA-MIAT相对表达水平,TNF-α、IL-6、IL-8水平,VEGF和MMP-9蛋白相对表达量均升高,miR-150-5p相对表达水平降低(均为P<0.05);与模型组和MIAT-NC组比较,MIAT组大鼠角膜组织中LncRNA-MIAT相对表达水平,TNF-α、IL-6、IL-8水平,VEGF和MMP-9蛋白相对表达量均升高,miR-150-5p相对表达水平降低(均为P<0.05),sh-MIAT组上述指标与MIAT组呈相反趋势(均为P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,LncRNA-MIAT可靶向调控miR-150-5p表达。结论LncRNA-MIAT可促进VEGF、MMP-9的表达,加速角膜血管化的发生,其机制可能与抑制miR-150-5p的表达有关。 展开更多
关键词 角膜血管化 长链非编码核糖核酸心肌梗死相关转录本 miR-150-5p 血管内皮生长因子 基质金属蛋白酶-9
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lncRNA MEG3对视网膜母细胞瘤细胞增殖与迁移的作用及其机制研究
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作者 赵凌军 杨卫民 +1 位作者 杨潇远 李季 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第4期323-327,共5页
目的探讨长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)对视网膜母细胞瘤(RB)细胞增殖、迁移的作用及其机制研究。方法将对数生长期的人RB细胞分为对照组(不做任何处理)、NC组(含lncRNA MEG3-NC无序干扰序列的pcDNA3.1质粒)、lncRNA MEG3组(... 目的探讨长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)对视网膜母细胞瘤(RB)细胞增殖、迁移的作用及其机制研究。方法将对数生长期的人RB细胞分为对照组(不做任何处理)、NC组(含lncRNA MEG3-NC无序干扰序列的pcDNA3.1质粒)、lncRNA MEG3组(含lncRNA MEG3序列的pcDNA3.1质粒)、激活剂组(含lncRNA MEG3序列的pcDNA3.1质粒+Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl)。利用RT-qPCR检测各组RB细胞中lncRNA MEG3的相对表达水平;CCK-8法检测lncRNA MEG3对RB细胞增殖的抑制作用;Transwell法检测lncRNA MEG3对RB细胞迁移的影响,RT-PCR检测各组RB细胞中Wnt1、β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA相对表达水平;Western blot检测各组RB细胞中Wnt1、β-catenin、Cyclin D1蛋白相对表达水平。结果对照组、NC组、lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞中lncRNA MEG3相对表达水平分别为0.81±0.27、0.78±0.26、3.88±0.39、3.76±0.38。与对照组和NC组相比,lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞中lncRNA MEG3相对表达水平均升高(均为P<0.05)。与NC组相比,lncRNA MEG3组RB细胞培养24 h、48 h、72 h细胞增殖抑制率逐渐升高(均为P<0.05);与lncRNA MEG3组相比,激活剂组RB细胞培养24 h、48 h、72 h细胞增殖抑制率逐渐降低(均为P<0.05)。NC组、lncRNA MEG3组、激活剂组RB细胞增殖抑制率均随时间延长而升高(均为P<0.05)。与对照组和NC组相比,lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞迁移数均明显减少(均为P<0.05);与lncRNA MEG3组相比,激活剂组RB细胞迁移数增多(P<0.05)。与对照组和NC组相比,lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞中Wnt1、β-catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白相对表达水平均明显降低(均为P<0.05);与lncRNA MEG3组比较,激活剂组RB细胞中Wnt1、β-catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白相对表达水平均有升高(均为P<0.05)。结论过表达lncRNA MEG3可抑制人RB细胞增殖及迁移,其可能是通过阻断Wnt/catenin通路发挥作用的。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 增殖 迁移 长链非编码RNA母系表达基因3
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