汉黄芩素通过激活活性氧簇介导的p38MAPK信号通路诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡 被引量：27

1

作者 王慧莲 孟庆良 +1 位作者 李松伟 王济华 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期890-895,共6页

目的探讨汉黄芩素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)凋亡的影响以及作用机制。方法类风湿关节炎患者关节滑液经原代培养,应用3~5代传代的成纤维样滑膜细胞。按照不同方法处理... 目的探讨汉黄芩素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)凋亡的影响以及作用机制。方法类风湿关节炎患者关节滑液经原代培养,应用3~5代传代的成纤维样滑膜细胞。按照不同方法处理分为6组:空白对照组、低剂量汉黄芩素组(终浓度为20μg/mL)、中剂量汉黄芩素组(终浓度为50μg/mL)、高剂量汉黄芩素组(终浓度为100μg/mL)、100μg/mL汉黄芩素+NAC组、100μg/mL汉黄芩素+SB203580组。MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),DCFH-DA染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot法检测p38MAPK通路相关蛋白的表达。结果与正常对照组相比,各剂量汉黄芩素均能够抑制RA-FLS细胞的增殖,增加其凋亡,降低MMP以及增加ROS水平,激活p38MAPK信号通路,并且呈现剂量依赖性关系。ROS清除剂NAC和p38抑制剂SB203580可以明显降低汉黄芩素诱导的RA-FLS细胞的凋亡,并且5 mmol/L NAC下调汉黄芩素引起的p38MAPK磷酸化。结论汉黄芩素能够诱导RA-FLS细胞凋亡,ROS/p38MAPK信号通路参与了其凋亡的过程。 展开更多

关键词 汉黄芩素 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 细胞凋亡 中医中药

在线阅读 下载PDF 职称材料

大黄素对TNF⁃α诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响 被引量：20

2

作者 孟庆良 孟婉婷 +7 位作者 卞华 郑福增 谷慧敏 左瑞庭 周子朋 王慧莲 苗喜云 马俊福 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期480-484,共5页

目的探讨大黄素对TNF⁃α诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响。方法将人类风湿关节炎成纤维样滑膜HFLS⁃RA细胞随机分为对照组(未处理)、诱导组(TNF⁃α处理)、25μmol/L大黄素组(TNF⁃α和大黄素处理)、50μmol/L大黄素组(TNF... 目的探讨大黄素对TNF⁃α诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响。方法将人类风湿关节炎成纤维样滑膜HFLS⁃RA细胞随机分为对照组(未处理)、诱导组(TNF⁃α处理)、25μmol/L大黄素组(TNF⁃α和大黄素处理)、50μmol/L大黄素组(TNF⁃α和大黄素处理)和100μmol/L大黄素组(TNF⁃α和大黄素处理)。采用MTT法和克隆形成实验检测细胞的存活率和克隆形成率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,RT⁃PCR检测凋亡相关基因Bcl⁃2和Bax mRNA的表达,ELISA检测细胞上清液中IL⁃6和IL⁃1β水平,Western blot检测细胞中NF⁃κB信号通路相关蛋白p⁃IκBα和p⁃NF⁃κB p65的表达。结果TNF⁃α能够使HFLS⁃RA细胞的存活率、克隆形成率、Bcl⁃2 mRNA的表达和p⁃IκBα、p⁃NF⁃κB p65蛋白的表达以及细胞上清液中IL⁃6和IL⁃1β水平升高(P<0.05),而细胞凋亡率和Bax mRNA表达降低(P<0.05);25、50、100μmol/L大黄素能够呈浓度依赖性抑制TNF⁃α引起的上述变化(P<0.05)。结论大黄素可能通过抑制NF⁃κB信号通路的活化抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖和炎症反应。 展开更多

关键词 大黄素 类风湿性关节炎 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 炎性因子 NF⁃κB信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

丹酚酸B对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制 被引量：7

3

作者 王慧莲 展俊平 +2 位作者 苗喜云 孟庆良 马俊福 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期334-339,共6页

目的探讨丹酚酸B对人类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的丹酚酸B(0、1、10、20、30、40和50μmol/L)处理人RA滑膜成纤维细胞MH7A,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,... 目的探讨丹酚酸B对人类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的丹酚酸B(0、1、10、20、30、40和50μmol/L)处理人RA滑膜成纤维细胞MH7A,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,筛选丹酚酸B的最适作用浓度。取MH7A细胞,设置对照组(正常培养)、丹酚酸B组(加入丹酚酸B培养)与丹酚酸B+3-MA组(加入丹酚酸B和5 mmol/L自噬抑制剂3-MA共培养)。采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡情况;qRT-PCR检测caspase-3 mRNA相对表达水平;Western blotting检测caspase-3、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白相对表达水平。结果与0μmol/L丹酚酸B组比较,30、40和50μmol/L丹酚酸B处理的MH7A细胞增殖率明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05),据此选择50μmol/L丹酚酸B进行后续实验。与对照组比较,丹酚酸B组细胞增殖率、p62蛋白相对表达水平明显降低,细胞凋亡率、caspase-3 mRNA和蛋白以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05);与丹酚酸B组比较,丹酚酸B+3-MA组细胞增殖率(63.47%±1.94%vs.51.33%±4.67%)、p62蛋白相对表达水平(0.97±0.06 vs.0.20±0.02)明显升高,细胞凋亡率(21.4%±1.8%vs.30.4%±0.6%)、caspase-3 mRNA(0.83±0.06 vs.1.27±0.15)和蛋白(0.64±0.05 vs.1.10±0.09)、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ(0.29±0.07 vs.1.23±0.21)、Beclin-1(0.36±0.05 vs.1.05±0.08)蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05)。结论丹酚酸B可能通过诱导自噬抑制人RA滑膜成纤维细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 丹酚酸B 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 自噬

在线阅读 下载PDF 职称材料

督灸联合补肾祛寒化湿方对肾虚督寒型强直性脊柱炎患者的临床疗效

4

作者 牛晶晶 孟庆良 +2 位作者 杜敏 展俊平 陈雪萍 《中成药》 北大核心 2025年第9期2923-2927,共5页

目的探讨督灸联合补肾祛寒化湿方对肾虚督寒型强直性脊柱炎患者的临床疗效。方法108例患者随机分为对照组和观察组,每组54例,对照组给予美洛昔康和柳氮磺胺吡啶,观察组在对照组基础上加用督灸联合补肾祛寒化湿方,疗程3个月。检测临床疗... 目的探讨督灸联合补肾祛寒化湿方对肾虚督寒型强直性脊柱炎患者的临床疗效。方法108例患者随机分为对照组和观察组,每组54例,对照组给予美洛昔康和柳氮磺胺吡啶,观察组在对照组基础上加用督灸联合补肾祛寒化湿方,疗程3个月。检测临床疗效、VAS评分、BASDAI评分、BASFI评分、炎性因子(IL-6、CRP、TNF-α)、骨代谢指标(骨密度、BGP、BALP)、中医证候评分、体征测量指标(指地距、枕墙距、腰椎活动度)变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组VAS评分、BASDAI评分、BASFI评分、炎性因子、中医证候评分、指地距、枕墙距降低(P<0.05),骨代谢指标、腰椎活动度升高(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。结论督灸联合补肾祛寒化湿方可提高肾虚督寒型强直性脊柱炎患者临床疗效,改善腰椎功能。 展开更多

关键词 督灸 补肾祛寒化湿方 强直性脊柱炎 肾虚督寒 腰椎功能

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于系统性硬化症溶酶体相关基因的人工神经网络模型的构建及实验验证

5

作者 左志威 卞博 +5 位作者 崔家康 耿玉鑫 王一晨 郭克磊 孟庆良 卞华 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第2期109-117,共9页

目的:建立基于GEO数据库硬皮病溶酶体相关基因的随机森林和人工神经网络(artificial neural network,ANN)联合诊断模型并评价其效果。方法:通过GEO数据库获取4份硬皮病芯片,从AmiGO2数据库中获取875个溶酶体相关基因。其中GSE95065及GSE... 目的:建立基于GEO数据库硬皮病溶酶体相关基因的随机森林和人工神经网络(artificial neural network,ANN)联合诊断模型并评价其效果。方法:通过GEO数据库获取4份硬皮病芯片,从AmiGO2数据库中获取875个溶酶体相关基因。其中GSE95065及GSE76807合并作为实验组数据集,使用随机森林算法筛选硬皮病溶酶体相关特征基因,并用特征基因构建人工神经网络模型,用10折交叉验证模型准确性。再用验证数据集GSE32413与GSE59787对模型进一步验证,利用ROC曲线下面积值评估模型准确性。最后用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)进行实验验证。结果:共获取差异基因46个,其中上调基因16个,下调基因30个。进一步通过随机森林筛选得到最相关的6个特征基因(LYN、TNFAIP3、RNF128、MCOLN3、ANKFY1、PLD3),并构建ANN诊断模型。使用该模型绘制了实验组和验证组诊断的ROC曲线,AUC值为0.999。10折交叉验证AUC平均值大于0.980。验证组AUC为0.740和0.732。RT-qPCR结果表明与对照组相比,硬皮病中LYN(P=0.004)、TNFAIP3(P=0.0001)表达量明显上调,而RNF128(P=0.0002)、MCOLN3(P=0.001)、ANKFY1(P=0.02)、PLD3(P<0.0001)表达量在硬皮病组中明显下调。与机器学习算法结果相一致。结论:构建了硬皮病溶酶体相关特征基因的ANN诊断模型,为探索硬皮病发病机制提供了一个新视角。 展开更多

关键词 系统性硬化症 溶酶体 人工神经网络 随机森林 诊断模型

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于生物信息学探讨类风湿关节炎与骨关节炎相关分子机制及免疫细胞浸润分析 被引量：5

6

作者 许博 郑福增 刘畅 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第8期718-723,735,共7页

目的探寻能有效区分类风湿关节炎(RA)和骨关节炎(OA)的潜在生物标志物,并探讨二者在生物信息学方面差异的意义。方法从基因表达综合(GEO)数据库下载2份RA和OA作为相互对照样品的公开可用基因表达谱(GSE55235、GSE55457数据集),并筛选OA... 目的探寻能有效区分类风湿关节炎(RA)和骨关节炎(OA)的潜在生物标志物,并探讨二者在生物信息学方面差异的意义。方法从基因表达综合(GEO)数据库下载2份RA和OA作为相互对照样品的公开可用基因表达谱(GSE55235、GSE55457数据集),并筛选OA与RA的差异表达基因(DEG)。采用LASSO回归模型和SVM-RFE算法识别并筛选生物标志物,在验证组(GSE55584数据集)中进行受试者操作特征(ROC)曲线验证,利用ROC曲线下面积(AUC)值评估辨别能力。利用CIBERSORT算法与筛选出的生物标志物预估RA与OA的生物信息学关联。结果共鉴定出410个DEG,涉及多种信号通路、细胞组分、分子功能和疾病。特征基因有COPZ2、FAH、IL15RA、LTC4S、SCRG1、SFRP1和SLAMF8共7个,且ROC曲线验证结果符合预期。免疫细胞浸润分析显示,巨噬细胞M1、CD8+T细胞、静息肥大细胞、浆细胞、静息树突状细胞等与特征基因相关。结论基于免疫细胞浸润的模型可用于预测RA与OA的鉴别诊断,为RA与OA的治疗靶点提供了新的视角。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 骨关节炎 基因本体富集分析 京都基因与基因组数据库富集分析 疾病本体富集分析 免疫细胞浸润分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

祛风通络除湿方对难治性类风湿关节炎患者血清TNF-α与VEGF的影响 被引量：10

7

作者 蔡永 孟庆良 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第4期769-772,共4页

目的:探究祛风通络除湿方对难治性类风湿关节炎(RA)患者血清肿瘤坏死因子(TNF-α)与内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:将2015年1月—2018年1月期间本院收治的96例难治性RA患者随机分为对照组和观察组,各48例。两组患者均口服甲氨蝶呤治疗... 目的:探究祛风通络除湿方对难治性类风湿关节炎(RA)患者血清肿瘤坏死因子(TNF-α)与内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:将2015年1月—2018年1月期间本院收治的96例难治性RA患者随机分为对照组和观察组,各48例。两组患者均口服甲氨蝶呤治疗,观察组患者在此基础上加用祛风通络除湿方治疗。比较两组患者的血清TNF-α与VEGF、关节肿胀数、关节压痛数、僵硬时间和不良反应发生率。结果:治疗前两组患者的血清TNF-α与VEGF、关节肿胀数、关节压痛数、僵硬时间比较差异无统计学意义(P> 0. 05);治疗后较治疗前两组患者的血清TNF-α与VEGF水平、关节肿胀数、关节压痛数、僵硬时间均显著降低,且观察组低于对照组;观察组的不良反应总发生率(10. 40%)低于对照组(27. 06%),差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:难治性RA患者采用祛风通络除湿方治疗能够有效缓解关节肿胀、压痛和僵硬,改善血清TNF-α与VEGF水平,且不良反应发生率低,可在临床上进一步推广和使用。 展开更多

关键词 难治性类风湿关节炎 祛风通络除湿方 肿瘤坏死因子 内皮生长因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

circ_0005276靶向miR-557调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量：1

8

作者 崔家康 高青杰 +1 位作者 马俊福 孟庆良 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期186-191,共6页

目的探讨circ_0005276靶向miR-557对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)增殖、迁移和侵袭的影响。方法RT-qPCR检测circ_0005276和miR-557在CIA大鼠滑膜组织中的表达。将si-circ_0005276、si-NC、pcDNA、pcDNA-circ_0005276、miR-NC、mi... 目的探讨circ_0005276靶向miR-557对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)增殖、迁移和侵袭的影响。方法RT-qPCR检测circ_0005276和miR-557在CIA大鼠滑膜组织中的表达。将si-circ_0005276、si-NC、pcDNA、pcDNA-circ_0005276、miR-NC、miR-557模拟物、si-circ_0005276+anti-miR-NC、si-circ_0005276+anti-miR-557分别转染RA-FLS,CCK-8、划痕愈合、Transwell实验用于检测RA-FLS的活力、划痕愈合率以及侵袭数。双荧光素酶报告验证circ_0005276和miR-557的靶向关系。结果与正常组滑膜组织比较,CIA大鼠滑膜组织中circ_0005276表达上调(P<0.05),miR-557表达下调(P<0.05)。干扰circ_0005276后RA-FLS的光密度(OD)值、划痕愈合率、侵袭数显著降低(P<0.05),miR-557表达升高(P<0.05)。过表达circ_0005276后RA-FLS中miR-557表达显著降低(P<0.05)。过表达miR-557后RA-FLS的OD值、划痕愈合率、侵袭数显著降低(P<0.05)。下调miR-557表达显著减弱了干扰circ_0005276表达对RA-FLS的OD值、划痕愈合率和侵袭数的影响(P<0.05)。结论干扰circ_0005276可通过靶向促进miR-557表达,从而抑制RA-FLS增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 circ_0005276 miR-557 增殖 迁移 侵袭

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于硬皮病线粒体相关基因的人工神经网络模型的构建 被引量：1

9

作者 左志威 孟庆良 +2 位作者 崔家康 郭克磊 卞华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期920-929,共10页

目的建立基于GEO数据库硬皮病线粒体相关基因的机器学习和人工神经网络联合诊断模型并评价其效果。方法通过GEO数据库获取3份硬皮病芯片。其中GSE95065及GSE59785合并作为实验数据集并提取线粒体相关基因表达量,使用随机森林、LASSO回归... 目的建立基于GEO数据库硬皮病线粒体相关基因的机器学习和人工神经网络联合诊断模型并评价其效果。方法通过GEO数据库获取3份硬皮病芯片。其中GSE95065及GSE59785合并作为实验数据集并提取线粒体相关基因表达量,使用随机森林、LASSO回归和SVM算法筛选硬皮病线粒体相关特征基因,并用特征基因构建人工神经网络模型,用10折交叉验证模型准确性。来用验证数据集GSE76807对模型进一步验证,利用ROC曲线下面积值评估模型准确性。用RT-qPCR实验验证关键基因mRNA相对表达量。最后用CIBERSORT算法预估硬皮病与筛选出的潜在生物标志物的生物信息学关联。结果共获取差异基因24个,其中上调基因11个,下调基因13个。通过3种机器学习算法筛选到最相关的7个线粒体相关特征基因(POLB、GSR、KRAS、NT5DC2、NOX4、IGF1、TGM2),并构建人工神经网络诊断模型。使用该模型绘制了实验组和验证组诊断的ROC曲线,AUC值为0.984。验证组AUC为0.740。10折交叉验证AUC平均值大于0.980。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,硬皮病中POLB(P=0.004)、GSR(P=0.029)、KRAS(P=0.007)、NOX4(P=0.019)、IGF1(P=0.008)、TGM2(P<0.0001)表达量明显上调,而NT5DC2(P=0.001)表达量在硬皮病组中明显下调。免疫细胞浸润显示,特征基因与滤泡辅助T细胞、幼稚B细胞、静息树突状细胞、记忆激活CD4+T细胞、巨噬细胞M0、单核细胞、记忆静息CD4+T细胞和肥大细胞激活等相关。结论构建了硬皮病特征基因的人工神经网络诊断模型,为探索硬皮病发病机制提供了一个新视角。 展开更多

关键词 硬皮病 线粒体 人工神经网络 免疫细胞浸润 机器学习

在线阅读 下载PDF 职称材料

茯苓多糖对系统性红斑狼疮患者Th17/Treg平衡的影响 被引量：26

10

作者 王慧莲 孟庆良 +1 位作者 李松伟 王济华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1514-1519,共6页

目的:研究茯苓多糖对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的免疫调节作用。方法:选取45例SLE患者和35例健康对照者,应用磁珠分选法分离外周血CD4^+ T细胞,流式细胞术检测CD4^+ T细胞中Th17和Treg... 目的:研究茯苓多糖对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的免疫调节作用。方法:选取45例SLE患者和35例健康对照者,应用磁珠分选法分离外周血CD4^+ T细胞,流式细胞术检测CD4^+ T细胞中Th17和Treg细胞的比例。用茯苓多糖分别处理健康对照者及患者的CD4^+ T细胞,MTT法检测细胞活力以测定茯苓多糖毒性,ELISA检测细胞中白细胞介素17(IL-17)、IL-6、IL-10及转化生长因子β(TGF-β)的含量,RT-q PCR和Western blot法分别测定维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)与叉头框蛋白P3(Foxp3)的mRNA和蛋白表达水平。结果:与健康对照组相比,SLE患者的Th17细胞比例显著升高,Treg细胞比例明显降低(P<0.05)。用100μg/L的茯苓多糖处理SLE患者CD4^+ T细胞,与空白对照组相比,IL-17和IL-6的含量显著降低,IL-10和TGF-β的含量明显上升(P<0.05);RORγt的mRNA和蛋白表达显著下降,同时Foxp3的表达在mRNA和蛋白水平上明显增加(P<0.05);并且Th17/Treg的比值降低(P<0.05)。结论:茯苓多糖可以通过升高Treg并降低Th17细胞的比例,对SLE起到一定的治疗作用。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 辅助性T细胞17 调节性T细胞 茯苓多糖

在线阅读 下载PDF 职称材料

紫草素对强直性脊柱炎大鼠T淋巴细胞亚群平衡及破骨细胞分化的影响 被引量：3

11

作者 周子朋 范围 +3 位作者 孟庆良 崔家康 谷慧敏 王慧莲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2542-2548,共7页

目的探讨紫草素对强直性脊柱炎(AS)大鼠T淋巴细胞亚群平衡及破骨细胞分化的影响。方法大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组(9 mg/kg柳氮磺吡啶)和紫草素低、中、高剂量组(5、10、20 mg/kg),每组10只,造模同时进行给药。30 d后,检测T... 目的探讨紫草素对强直性脊柱炎(AS)大鼠T淋巴细胞亚群平衡及破骨细胞分化的影响。方法大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组(9 mg/kg柳氮磺吡啶)和紫草素低、中、高剂量组(5、10、20 mg/kg),每组10只,造模同时进行给药。30 d后,检测T淋巴细胞亚群Th17、Treg细胞比例及Th17/Treg比值,检测血清IL-17、IL-6、GM-CSF、IL-10水平,HE、TRACP染色观察组织形态和破骨细胞数量,免疫组化法检测NFATc1、c-Fos表达,Western blot法检测关节组织GATA2、OPG、NF-κB、RANK、RANKL蛋白表达。结果与正常组比较,模型组骶髂关节组织炎症浸润严重,破骨细胞数目,Th17细胞比例、Th17/Treg比值,血清IL-17、IL-6、GM-CSF水平,关节组织GATA2、NFATc1、c-Fos、RANK、RANKL、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达升高(P<0.05),Treg细胞比例、血清IL-10水平、关节组织OPG蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组和紫草素各剂量组骶髂关节组织炎症浸润减轻,破骨细胞数目,Th17细胞比例、Th17/Treg比值,血清IL-17、IL-6、GM-CSF水平,关节组织GATA2、NFATc1、c-Fos、RANK、RANKL、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达降低(P<0.05),Treg细胞比例、血清IL-10水平、关节组织OPG蛋白表达升高(P<0.05),其中高剂量紫草素的效果与阳性药相近。结论紫草素可调控GATA2表达,改善AS大鼠T淋巴细胞亚群平衡,降低血清炎症水平,抑制破骨细胞分化。 展开更多

关键词 紫草素 强直性脊柱炎 GATA2 T淋巴细胞 破骨细胞分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

丹参多酚酸酯调控SMAD2/FKBP1A/NF-κB轴对骨质疏松症大鼠破骨细胞分化和骨吸收的影响 被引量：5

12

作者 马运锋 韩小飞 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期111-121,共11页

目的:探讨丹参多酚酸酯(Sal)对骨质疏松症大鼠破骨细胞分化和骨吸收的影响,阐明其作用机制。方法:体内实验,采用去势法建立骨质疏松症大鼠模型,30只雌性大鼠随机分为假手术组、模型组和Sal组(建模4周后隔天腹腔注射40 mg·kg^(-1) S... 目的:探讨丹参多酚酸酯(Sal)对骨质疏松症大鼠破骨细胞分化和骨吸收的影响,阐明其作用机制。方法:体内实验,采用去势法建立骨质疏松症大鼠模型,30只雌性大鼠随机分为假手术组、模型组和Sal组(建模4周后隔天腹腔注射40 mg·kg^(-1) Sal,共4周)。采用HE染色法观察各组大鼠股骨组织病理形态表现,双能X射线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD),三点弯曲试验检测各组大鼠股骨最大载荷。体外实验,采用30μg·L^(-1)巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和100μg·L^(-1)核因子κB(NF-κB)配体(RANKL)诱导骨髓巨噬细胞(BMMs)分化,细胞分为对照组、RANKL组、RANKL+Sal组(10 mg·L^(-1)Sal)、RANKL+Sal+空载体(vector)组(10 mg·L^(-1) Sal和2 mg·L^(-1) vector)、RANKL+Sal+LV-FKBP1A组[10 mg·L^(-1) Sal和2 mg·L^(-1)慢病毒介导的FKBP1A过表达载体(LV-FKBP1A)]、RANKL+Sal+LV-FKBP1A+QNZ组(10 mg·L^(-1) Sal、2 mg·L^(-1) LV-FKBP1A和10 nmol·L-1NF-κB抑制剂QNZ),MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Co-IP实验验证SMAD2和FKBP1A的相互作用,Westernblotting法检测各组大鼠骨组织和各组细胞中SMAD家族蛋白2(SMAD2)、FK506结合蛋白1A(FKBP1A)和磷酸化核因子-κB P65(p-P65)蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清和各组细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠骨组织和各组细胞中组织蛋白酶K(CTSK)和降钙素受体(CTR)mRNA表达水平。结果:体内实验,与模型组比较,Sal组大鼠骨小梁数量明显增加,大鼠股骨BMD和最大负载明显升高(P<0.01),血清中TRAP5b水平明显降低(P<0.01),骨组织中SMAD2及FKBP1A蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。Co-IP实验结果证实SMAD2与FKBP1A蛋白存在相互作用。体外实验,与RANKL组比较,RANKL+Sal组细胞增殖活性明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显降低(P<0.01);与RANKL+Sal+vector组比较,RANKL+Sal+LV-FKBP1A组细胞凋亡率明显降低(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显升高(P<0.01);与RANKL+Sal+LVFKBP1A组比较,RANKL+Sal+LV-FKBP1A+QNZ组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:Sal通过调控SMAD2和FKBP1A蛋白的相互作用,抑制NF-κB活化,缓解大鼠骨质疏松症。 展开更多

关键词 骨质疏松症 丹参多酚酸酯 SMAD家族蛋白2 FK506结合蛋白1A 破骨细胞 骨吸收

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于俞募配穴法针灸结合康复治疗非特异性腰痛的临床疗效 被引量：15

13

作者 沙书娅 张铭 孟庆良 《世界中医药》 CAS 2018年第11期2847-2850,共4页

目的:探讨俞募配穴法联合康复训练对非特异性腰痛的临床疗效,并对其部分作用机制进行分析。方法:选取2013年3月至2016年4月河南省省直第一医院收治的非特异性腰痛患者100例,随机分为对照组和观察组,每组50例。取同期健康体检者50例作为... 目的:探讨俞募配穴法联合康复训练对非特异性腰痛的临床疗效,并对其部分作用机制进行分析。方法:选取2013年3月至2016年4月河南省省直第一医院收治的非特异性腰痛患者100例,随机分为对照组和观察组,每组50例。取同期健康体检者50例作为健康对照组。对照组及观察组非特异性腰痛均接受核心肌群康复训练法及物理治疗康复训练,观察组在常规训练基础上采用俞募配穴法进行针刺,2组均使用电针仪通电,疏密波条件下留针30 min。2组患者治疗前后均测评McGILL评分、JOA腰痛疾患疗效评分、Oswestry功能障碍指数评分、腰腹肌等长收缩值,同时检测3组受试人员外周血β-内啡肽(β-EP)。结果:2组治疗后McGILL评分、JOA腰痛疾患疗效评分、Oswestry功能障碍指数评分均较治疗前明显改善,与治疗前比较,差异有统计学意义(P <0. 05),其中观察组改善的趋势更为明显,与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。治疗后2组腰腹肌等长收缩值明显高于治疗前(P <0. 05),其中治疗后观察组数值明显优于对照组(P <0. 05)。2组非特异性腰痛患者治疗前β-EP均明显高于健康对照组,干预后2组β-EP均一定程度下调,其中观察组下降的更为明显与对照组治疗后比较(P <0. 05)。结论:俞募配穴法联合康复训练可明显缓解非特异性腰痛的临床不适,其作用机制可能与下调机体β-EP水平有关。 展开更多

关键词 腰痛 非特异性 俞募配穴 康复训练 核心肌群训练 临床疗效 机制 Β-内啡肽

在线阅读 下载PDF 职称材料

熟地黄多糖调控lncRNA MEG3对碘乙酸钠致骨关节炎软骨细胞损伤的保护作用 被引量：3

14

作者 杜晨飞 韩磊 +2 位作者 范围 李红旗 郑福增 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期92-99,122,共9页

目的探讨熟地黄多糖(RGP)调控长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)对碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响。方法培养大鼠软骨细胞,不同浓度MIA(0、1、2、4、8μmol/L)诱导建立软骨细胞损伤模型,并给予不同浓度RGP... 目的探讨熟地黄多糖(RGP)调控长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)对碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响。方法培养大鼠软骨细胞,不同浓度MIA(0、1、2、4、8μmol/L)诱导建立软骨细胞损伤模型,并给予不同浓度RGP(50、100、200、400、800 mg/mL)处理筛选合适的实验浓度。实验分为正常组、MIA组、RGP组、RGP+si-NC组、RGP+si-MEG3组,Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测细胞活力;Hoechst 33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中MEG3、金属蛋白酶13(MMP-13)、Ⅱ型胶原α1(COL2A1)和蛋白聚糖(ACAN)mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p-PI3K、丝/苏氨酸激酶(AKT)、p-AKT、BAX、BCL-2、caspase3蛋白表达水平。结果MIA以剂量依赖性方式降低软骨细胞活力,诱导细胞凋亡,并降低MEG3和COL2A1 mRNA、ACAN mRNA水平,升高MMP-13 mRNA水平(P<0.05)。100、200、400、800 mg/mL RGP可升高软骨细胞活力及MEG3水平(P<0.05)。与正常组相比,MIA组细胞活力、MEG3、COL2A1 mRNA、ACAN mRNA和p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、BCL-2蛋白水平降低,细胞凋亡率、MMP-13 mRNA和BAX、caspase3蛋白水平升高(P<0.05);与MIA组相比,RGP组细胞活力、MEG3、COL2A1 mRNA、ACAN mRNA和p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、BCL-2蛋白水平升高,细胞凋亡率、MMP-13 mRNA和BAX、caspase3蛋白水平降低(P<0.05);敲低MEG3可减弱RGP对MIA诱导的软骨细胞损伤的保护作用。结论RGP可促进软骨细胞ECM合成,并抑制细胞凋亡,减轻MIA诱导的软骨细胞损伤,其作用机制可能与上调MEG3表达,诱导PI3K/AKT通路活化有关。 展开更多

关键词 熟地黄多糖 长链非编码RNA 母系表达基因3 骨关节炎 软骨细胞 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于生物信息学分析硬皮病的发病机制 被引量：2

15

作者 郭嘉 卞华 +2 位作者 陈爽 单雨 卞博 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期776-782,共7页

目的通过生物信息学技术探讨硬皮病发病的相关分子机制。方法通过基因表达图谱数据库获取GSE117928芯片数据。使用R软件,|logFC|>1,调整P<0.05为过滤条件,筛选出硬皮病差异基因,然后将差异基因进行蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI... 目的通过生物信息学技术探讨硬皮病发病的相关分子机制。方法通过基因表达图谱数据库获取GSE117928芯片数据。使用R软件,|logFC|>1,调整P<0.05为过滤条件,筛选出硬皮病差异基因,然后将差异基因进行蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI)分析及基因本体(GO)功能富集分析。GSE117928芯片数据进行基因集富集分析(GSEA)通路分析和免疫细胞浸润分析,获取富集通路和免疫细胞相对含量。结果获得硬皮病差异基因722个,其中上调基因298个,下调基因424个;核心靶点包括RPS27A、BTRC、FBXO32、ZBTB16、FBXO21、VHL、ATG7、CBLB、ANAPC1、COMMD9、CSNK1E、RPS8、MPHOSPH10、KRR1、RPL5。GO富集生物功能包括中性粒细胞活化参与免疫反应、嗜中性粒细胞脱颗粒、髓系细胞分化、对脂多糖反应、积极调节防御反应等。GSEA富集通路中硬皮病组排名前五位通路包括氨基糖和核苷酸糖代谢、溶酶体、谷胱甘肽代谢、糖酵解糖异生和半乳糖代谢通路;正常对照组排名前五位通路为自然杀伤细胞介质细胞毒性、剪接体、泛素介导的蛋白水解、小细胞肺癌、T细胞受体信号通路。免疫浸润结果显示正常对照组CD8+T细胞、幼稚CD4+T细胞相对含量明显增加,而硬皮病组单核细胞相对含量明显增加。结论硬皮病的发病机制可能是通过调节RPS27A、BTRC、FBXO32、ZBTB16、FBXO21、VHL、ATG7、CBLB、ANAPC1等基因,参与中性粒细胞活化参与免疫反应、嗜中性粒细胞脱颗粒等生物过程,上调氨基糖和核苷酸糖代谢、溶酶体、谷胱甘肽代谢、糖酵解糖异生和半乳糖代谢等通路来完成的。硬皮病发病与单核细胞增多密切相关。 展开更多

关键词 硬皮病 发病机制 生物信息学技术

在线阅读 下载PDF 职称材料