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miR-144靶向PIK3CD基因影响结直肠癌细胞增殖和细胞因子表达的作用机制
被引量：
4
1
作者
陈红跃
杨萌萌
+1 位作者
张小路
段铮
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1179-1183,1187,共6页
目的:探究miR-144与磷脂酰肌醇-3肌酶催化亚基δ(PIK3CD)的靶向关系及其影响结直肠癌(CRC)细胞增殖和免疫功能的作用机制。方法:RT-qPCR和Westernblot检测CRC肿瘤组织以及HCT116细胞中miR-144和PIK3CD表达水平的变化。miRcode在线预测mi...
目的:探究miR-144与磷脂酰肌醇-3肌酶催化亚基δ(PIK3CD)的靶向关系及其影响结直肠癌(CRC)细胞增殖和免疫功能的作用机制。方法:RT-qPCR和Westernblot检测CRC肿瘤组织以及HCT116细胞中miR-144和PIK3CD表达水平的变化。miRcode在线预测miR-144和PIK3CD的靶向关系,使用双荧光素酶实验进行验证。将miR-144模拟物、抑制剂和PIK3CDsiRNA分别转染至HCT116细胞后,RT-qPCR和Westernblot检测miR-144以及PIK3CDmRNA和蛋白表达水平的变化,MTT法检测细胞增殖能力的变化,ELISA法检测TNF-α和sIL-2R表达水平的变化。结果:在CRC肿瘤组织和HCT116细胞中,miR-144表达下调,PIK3CD表达上调。PIK3CDsiRNA和miR-144模拟物能够促使PIK3CDmRNA和蛋白表达下调,抑制HCT116细胞增殖,同时促进TNF-α和sIL-2R表达下调;miR-144抑制剂作用与之相反。结论:miR-144通过靶向PIK3CD基因抑制HCT116细胞增殖及其免疫功能。
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关键词
miR-144
PIK3CD
结肠直肠癌
增殖
免疫
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职称材料
过表达SIRT1通过上调幽门螺杆菌感染的胃癌细胞自噬通量以促进其凋亡并抑制炎症因子释放
被引量：
3
2
作者
郭伟胜
付利然
+2 位作者
张娟
赵林
魏光亚
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期116-122,130,共8页
目的:探究沉默信息调节因子1(SIRT1)在幽门螺杆菌(Hp)阳性胃癌(GC)中的表达及其对Hp感染的胃癌细胞自噬、炎症因子分泌和凋亡的影响。方法:选取37例Hp阴性GC患者[GC(Hp-)组]、31例Hp阳性GC患者[GC(Hp+)组]和32例癌旁正常胃黏膜组织样本(...
目的:探究沉默信息调节因子1(SIRT1)在幽门螺杆菌(Hp)阳性胃癌(GC)中的表达及其对Hp感染的胃癌细胞自噬、炎症因子分泌和凋亡的影响。方法:选取37例Hp阴性GC患者[GC(Hp-)组]、31例Hp阳性GC患者[GC(Hp+)组]和32例癌旁正常胃黏膜组织样本(Normal组),应用免疫组化(IHC)和Western blot检测3组样本中SIRT1表达;体外培养并筛选SIRT1表达水平最高的胃癌细胞系AGS进行探究,Western blot检测Hp感染对AGS细胞中SIRT1表达的影响;慢病毒感染以过表达AGS中的SIRT1水平,RT-PCR检测感染效率;将AGS分为4组:LV-NC组、LV-SIRT1组、Hp+LV-NC组和Hp+LV-SIRT1组,Western blot检测各组胃癌细胞中SIRT1和自噬标志蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及SQSTM1/p62蛋白水平;转染mRFP-EGFP-LC3B串联质粒,免疫荧光观察各组胃癌细胞中自噬通量变化;ELISA检测各组胃癌细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-8表达水平;Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测各组胃癌细胞凋亡情况;Western blot检测各组胃癌细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bad及cleaved caspase-9与cleaved-caspase-3表达。结果:与Normal组或GC(Hp-)组相比,SIRT1在GC(Hp+)组中表达显著降低(P<0.05);Hp感染AGS细胞后,能以时间依赖性下调细胞中SIRT1表达;感染慢病毒LV-SIRT1可显著促进AGS细胞中SIRT1 mRNA水平(P<0.05);Western blot结果显示,与LV-NC组相比,LV-SIRT1组中SIRT1蛋白和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均明显升高、而SQSTM1/p62蛋白水平显著降低(P<0.05),Hp+LV-NC组与Hp+LV-SIRT1组中SIRT1表达显著降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及SQSTM1/p62蛋白均显著升高(P<0.05或P<0.01),而与Hp+LV-NC组相比,Hp+LV-SIRT1组除LC3Ⅱ/LC3Ⅰ无明显改变外,其他蛋白表达趋势均明显降低(P<0.05);荧光显微镜观察结果表明,Hp感染促进了胃癌细胞中自噬通量的抑制,与Hp+LV-NC组相比,Hp+LV-SIRT1组中自噬通量受损现象显著改善(P<0.05);与LV-NC组或LV-SIRT1组相比,Hp+LV-NC组和Hp+LVSIRT1组中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-8表达均显著增加(P<0.05);而Hp+LV-SIRT1组较Hp+LV-NC组均明显降低(P<0.05);凋亡检测结果显示与LV-NC组相比,LV-SIRT1组和Hp+LV-SIRT1组胃癌细胞凋亡率和细胞中促凋亡蛋白Bad及cleaved caspase-9与cleaved-caspase-3表达均显著升高(P<0.05),而凋亡抑制蛋白Bcl-2明显降低(P<0.05);Hp+LV-NC组凋亡率及上述蛋白表达均无明显变化(P>0.05);与Hp+LV-NC组相比,Hp+LV-SIRT1组细胞凋亡率及凋亡相关蛋白变化趋势均明显升高(P<0.05)。结论:Hp感染可显著降低胃癌组织及细胞中SIRT1表达,过表达胃癌细胞中SIRT1可通过削弱Hp诱导的自噬通量受损现象,上调细胞自噬水平,从而促进胃癌细胞凋亡,并降低炎症因子表达。
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关键词
沉默信息调节因子1
幽门螺杆菌
胃癌
自噬
炎症因子
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职称材料
题名
miR-144靶向PIK3CD基因影响结直肠癌细胞增殖和细胞因子表达的作用机制
被引量：
4
1
作者
陈红跃
杨萌萌
张小路
段铮
机构
河南省中医院普外科
河南
中医
药大学第二附属
医院
河南省
中医院
肿瘤科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1179-1183,1187,共6页
基金
河南省中医药科学研究专项项目(2016ZY2063)资助
文摘
目的:探究miR-144与磷脂酰肌醇-3肌酶催化亚基δ(PIK3CD)的靶向关系及其影响结直肠癌(CRC)细胞增殖和免疫功能的作用机制。方法:RT-qPCR和Westernblot检测CRC肿瘤组织以及HCT116细胞中miR-144和PIK3CD表达水平的变化。miRcode在线预测miR-144和PIK3CD的靶向关系,使用双荧光素酶实验进行验证。将miR-144模拟物、抑制剂和PIK3CDsiRNA分别转染至HCT116细胞后,RT-qPCR和Westernblot检测miR-144以及PIK3CDmRNA和蛋白表达水平的变化,MTT法检测细胞增殖能力的变化,ELISA法检测TNF-α和sIL-2R表达水平的变化。结果:在CRC肿瘤组织和HCT116细胞中,miR-144表达下调,PIK3CD表达上调。PIK3CDsiRNA和miR-144模拟物能够促使PIK3CDmRNA和蛋白表达下调,抑制HCT116细胞增殖,同时促进TNF-α和sIL-2R表达下调;miR-144抑制剂作用与之相反。结论:miR-144通过靶向PIK3CD基因抑制HCT116细胞增殖及其免疫功能。
关键词
miR-144
PIK3CD
结肠直肠癌
增殖
免疫
Keywords
miR-144
PIK3CD
CRC
Proliferation
Immune
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
过表达SIRT1通过上调幽门螺杆菌感染的胃癌细胞自噬通量以促进其凋亡并抑制炎症因子释放
被引量：
3
2
作者
郭伟胜
付利然
张娟
赵林
魏光亚
机构
河南省中医院普外科
郑州人民
医院
中医
科
河南省
中医院
肿瘤内科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期116-122,130,共8页
基金
国家自然科学基金项目(81303096)。
文摘
目的:探究沉默信息调节因子1(SIRT1)在幽门螺杆菌(Hp)阳性胃癌(GC)中的表达及其对Hp感染的胃癌细胞自噬、炎症因子分泌和凋亡的影响。方法:选取37例Hp阴性GC患者[GC(Hp-)组]、31例Hp阳性GC患者[GC(Hp+)组]和32例癌旁正常胃黏膜组织样本(Normal组),应用免疫组化(IHC)和Western blot检测3组样本中SIRT1表达;体外培养并筛选SIRT1表达水平最高的胃癌细胞系AGS进行探究,Western blot检测Hp感染对AGS细胞中SIRT1表达的影响;慢病毒感染以过表达AGS中的SIRT1水平,RT-PCR检测感染效率;将AGS分为4组:LV-NC组、LV-SIRT1组、Hp+LV-NC组和Hp+LV-SIRT1组,Western blot检测各组胃癌细胞中SIRT1和自噬标志蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及SQSTM1/p62蛋白水平;转染mRFP-EGFP-LC3B串联质粒,免疫荧光观察各组胃癌细胞中自噬通量变化;ELISA检测各组胃癌细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-8表达水平;Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测各组胃癌细胞凋亡情况;Western blot检测各组胃癌细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bad及cleaved caspase-9与cleaved-caspase-3表达。结果:与Normal组或GC(Hp-)组相比,SIRT1在GC(Hp+)组中表达显著降低(P<0.05);Hp感染AGS细胞后,能以时间依赖性下调细胞中SIRT1表达;感染慢病毒LV-SIRT1可显著促进AGS细胞中SIRT1 mRNA水平(P<0.05);Western blot结果显示,与LV-NC组相比,LV-SIRT1组中SIRT1蛋白和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均明显升高、而SQSTM1/p62蛋白水平显著降低(P<0.05),Hp+LV-NC组与Hp+LV-SIRT1组中SIRT1表达显著降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及SQSTM1/p62蛋白均显著升高(P<0.05或P<0.01),而与Hp+LV-NC组相比,Hp+LV-SIRT1组除LC3Ⅱ/LC3Ⅰ无明显改变外,其他蛋白表达趋势均明显降低(P<0.05);荧光显微镜观察结果表明,Hp感染促进了胃癌细胞中自噬通量的抑制,与Hp+LV-NC组相比,Hp+LV-SIRT1组中自噬通量受损现象显著改善(P<0.05);与LV-NC组或LV-SIRT1组相比,Hp+LV-NC组和Hp+LVSIRT1组中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-8表达均显著增加(P<0.05);而Hp+LV-SIRT1组较Hp+LV-NC组均明显降低(P<0.05);凋亡检测结果显示与LV-NC组相比,LV-SIRT1组和Hp+LV-SIRT1组胃癌细胞凋亡率和细胞中促凋亡蛋白Bad及cleaved caspase-9与cleaved-caspase-3表达均显著升高(P<0.05),而凋亡抑制蛋白Bcl-2明显降低(P<0.05);Hp+LV-NC组凋亡率及上述蛋白表达均无明显变化(P>0.05);与Hp+LV-NC组相比,Hp+LV-SIRT1组细胞凋亡率及凋亡相关蛋白变化趋势均明显升高(P<0.05)。结论:Hp感染可显著降低胃癌组织及细胞中SIRT1表达,过表达胃癌细胞中SIRT1可通过削弱Hp诱导的自噬通量受损现象,上调细胞自噬水平,从而促进胃癌细胞凋亡,并降低炎症因子表达。
关键词
沉默信息调节因子1
幽门螺杆菌
胃癌
自噬
炎症因子
Keywords
SIRT1
Helicobacter pylori
Gastric cancer
Autophagy
Inflammatory factors
分类号
R753.2 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-144靶向PIK3CD基因影响结直肠癌细胞增殖和细胞因子表达的作用机制
陈红跃
杨萌萌
张小路
段铮
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
过表达SIRT1通过上调幽门螺杆菌感染的胃癌细胞自噬通量以促进其凋亡并抑制炎症因子释放
郭伟胜
付利然
张娟
赵林
魏光亚
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
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