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西红花酸对白细胞介素1β诱导人膝关节原代软骨细胞炎症因子表达的影响 被引量:4
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作者 齐秀春 陈昕 +5 位作者 曹玉净 李扬 宋鹏 王前进 艾进伟 李浩亮 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期436-441,共6页
目的研究西红花酸对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的人膝关节原代软骨细胞分解代谢及炎症应答的影响。方法西红花酸0.5,1,5,10和20μmol·L^-1处理人膝关节原代软骨细胞12 h,MTT检测细胞存活率。西红花酸0.5,1,5,10和20μmol·L^-... 目的研究西红花酸对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的人膝关节原代软骨细胞分解代谢及炎症应答的影响。方法西红花酸0.5,1,5,10和20μmol·L^-1处理人膝关节原代软骨细胞12 h,MTT检测细胞存活率。西红花酸0.5,1,5,10和20μmol·L^-1处理人膝关节原代软骨细胞12 h后,再加IL-1β10μg·L^-1处理24 h;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基质金属蛋白酶3(MMP-3)、MMP-13及Ⅱ型胶原(CollⅡ)mRNA水平;ELISA检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2(PGE2)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;试剂盒检测一氧化氮(NO)含量;Western印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)P85、磷酸化PI3K P85(p-PI3K P85)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、P65 NF-κB和p-P65 NF-κB蛋白表达水平。结果MTT结果显示,西红花酸对人膝关节原代软骨细胞存活率无影响。qRT-PCR和ELISA检测结果显示,与IL-1β处理组相比,西红花酸处理可抑制IL-1β诱导的MMP-3和MMP-13 mRNA和蛋白表达(P<0.05),上调CollⅡmRNA表达水平(P<0.05)。西红花酸还可抑制IL-1β诱导的NO和PGE2释放(P<0.05),降低IL-1β处理组炎症因子IL-6和TNF-α的产生(P<0.05)。此外,IL-1β可显著上调人膝关节原代软骨细胞中p-Akt,p-P65 NF-κB,PI3K P85和p-PI3K P85蛋白表达,而西红花酸处理后可显著抑制IL-1β诱导的p-Akt,p-P65 NF-κB和p-PI3K P85蛋白表达(P<0.05)。结论西红花酸可抑制IL-1β诱导的人膝关节原代软骨细胞过度分解代谢及炎症应答,PI3K/Akt/NF-κB信号通路参与该过程,提示西红花酸可能具有潜在的抗骨关节炎的功效。 展开更多
关键词 西红花酸 骨关节炎 人膝关节原代软骨细胞 炎症因子
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靛玉红可减轻骨关节炎大鼠的软骨细胞炎症和损伤 被引量:2
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作者 陈昕 齐秀春 +4 位作者 曹玉净 李扬 李浩亮 王前进 艾进伟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1381-1388,共8页
目的探讨靛玉红对大鼠骨关节炎症和损伤的作用及其机制。方法IL-1β构建骨关节炎细胞模型;0.1、0.5、1、2μmol/L靛玉红分别与IL-1β共同处理细胞;NPAS2 siRNA或non-specificsiRNA转染细胞;四甲基噻唑蓝染色法检测细胞增殖;流式细胞仪... 目的探讨靛玉红对大鼠骨关节炎症和损伤的作用及其机制。方法IL-1β构建骨关节炎细胞模型;0.1、0.5、1、2μmol/L靛玉红分别与IL-1β共同处理细胞;NPAS2 siRNA或non-specificsiRNA转染细胞;四甲基噻唑蓝染色法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Westernblot检测BAX、Bcl-2、ACAN、COL2A1、MMP-13和NPAS2蛋白含量;ELISA检测细胞培养上清液NO、PGE2和TNF-α含量,实时荧光定量PCR检测NPAS2、ACAN、COL2A1和MMP-13 mRNA含量;构建C57BL/6小鼠骨关节炎模型,Westernblot检测靛玉红对骨关节组织BAX、Bcl-2、ACAN和MMP-13蛋白含量的影响。结果0.1μmol/L靛玉红对软骨细胞增殖、凋亡、caspase-3活性、BAX和Bcl-2蛋白表达水平无显著影响;0.5、1和2μmol/L靛玉红上调细胞增殖量和Bcl-2蛋白含量,降低凋亡、caspase-3活性和BAX蛋白含量(P<0.05);0.5μmol/L靛玉红上调NPAS2、ACAN和COL2A1蛋白和mRNA含量,下调MMP-13蛋白和mRNA、NO、PGE2和TNF-α含量(P<0.05);干扰NPAS2表达可显著抑制0.5μmol/L靛玉红对IL-1β诱导的软骨细胞炎症和损伤的保护作用;小鼠骨关节炎模型中BAX和MMP-13蛋白含量上升(P<0.01),而Bcl-2(P<0.05)和ACAN(P<0.01)下降;靛玉红抑制小鼠关节组织中BAX和MMP-13蛋白含量(P<0.01),上调Bcl-2和ACAN蛋白含量(P<0.05)。结论靛玉红对骨关节炎组织具有保护作用并可能通过NPAS2调节骨关节炎软骨细胞炎症和损伤。 展开更多
关键词 靛玉红 软骨细胞 NPAS2 炎症因子 细胞外基质 骨关节炎
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