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巨噬细胞特异性敲除KLF2基因小鼠模型构建与鉴定
1
作者
孟雪
王新洲
+1 位作者
高水波
吴鸿
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期444-450,共7页
目的 建立巨噬细胞特异性敲除Kruppel样因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)基因小鼠模型,探讨KLF2对巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法 运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建KLF2~(flox/+)小鼠。通过与Lyz2-Cre~(+/+)小鼠繁育得到目的基因...
目的 建立巨噬细胞特异性敲除Kruppel样因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)基因小鼠模型,探讨KLF2对巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法 运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建KLF2~(flox/+)小鼠。通过与Lyz2-Cre~(+/+)小鼠繁育得到目的基因型小鼠,通过基因型鉴定、实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western Blot从DNA、RNA、蛋白水平验证KLF2敲除效率。分离培养小鼠骨髓源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDMs),检测脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的炎症相关因子mRNA变化。结果 建立了KLF2~(flox/flox)/Lyz2-Cre~+基因型小鼠,即巨噬细胞特异性敲除KLF2基因。小鼠骨髓、BMDMs的KLF2 mRNA及蛋白水平显著低于对照组小鼠,而心脏、肝、肾组织中KLF2 mRNA表达较对照组小鼠无显著变化。两组小鼠的体重、进食、进水、形态无显著性差异。在LPS作用下,缺失KLF2的BMDMs炎症相关基因IL-6 mRNA表达水平较对照组显著下降,而IL-1、iNOS、CD86 mRNA表达水平较对照组显著升高。结论 本研究成功构建了巨噬细胞特异性敲除KLF2小鼠模型,为进一步研究巨噬细胞KLF2对临床炎症相关疾病的调控作用及机制奠定基础。
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关键词
Kruppel样因子2
特异性敲除小鼠
CRE/LOXP系统
巨噬细胞
动脉粥样硬化
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职称材料
千金子二萜醇调控TGF-β1/Smad通路影响肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达
被引量：
2
2
作者
蒋俊玲
赵俊峰(指导)
+3 位作者
张嘉琪
周磊
潘世杰
雷震
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第18期2216-2219,共4页
目的:探讨千金子二萜醇调控TGF-β1/Smad通路影响肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达的机制。方法:建立肾癌移植瘤小鼠,分为模型组、实验组(千金子二萜醇组)和SB-431542组(TGF-β1/Smad通路抑制剂组),实验组小鼠灌胃给予20 mg/kg千金子二萜醇溶...
目的:探讨千金子二萜醇调控TGF-β1/Smad通路影响肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达的机制。方法:建立肾癌移植瘤小鼠,分为模型组、实验组(千金子二萜醇组)和SB-431542组(TGF-β1/Smad通路抑制剂组),实验组小鼠灌胃给予20 mg/kg千金子二萜醇溶液,模型组灌胃给予等体积生理盐水,SB-431542组腹腔注射10 mg/kg SB-431542溶液,计算脾脏指数;Western blot检测Smad2/3和p-Smad2/3蛋白表达;ELISA检测肾癌移植瘤小鼠血清TNF-α和IL-17表达。结果:给药19 d后,与模型组相比,实验组和SB-431542组小鼠脾脏指数降低(P<0.05),Smad2/3蛋白表达升高(P<0.05),p-Smad2/3蛋白表达、TNF-α和IL-17水平明显降低(P<0.01)。结论:千金子二萜醇可通过调控TGF-β1/Smad通路活性降低肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达。
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关键词
千金子二萜醇
肾癌
TGF-Β1/SMAD
TNF-Α
IL-17
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职称材料
题名
巨噬细胞特异性敲除KLF2基因小鼠模型构建与鉴定
1
作者
孟雪
王新洲
高水波
吴鸿
机构
河南
中医
药大学第二临床医学院
河南省中医院中心实验室
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期444-450,共7页
基金
国家自然科学基金(81473453)
河南省科技研发计划联合基金(222301420088)
河南省高校重点科研项目(23A360013)。
文摘
目的 建立巨噬细胞特异性敲除Kruppel样因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)基因小鼠模型,探讨KLF2对巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法 运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建KLF2~(flox/+)小鼠。通过与Lyz2-Cre~(+/+)小鼠繁育得到目的基因型小鼠,通过基因型鉴定、实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western Blot从DNA、RNA、蛋白水平验证KLF2敲除效率。分离培养小鼠骨髓源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDMs),检测脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的炎症相关因子mRNA变化。结果 建立了KLF2~(flox/flox)/Lyz2-Cre~+基因型小鼠,即巨噬细胞特异性敲除KLF2基因。小鼠骨髓、BMDMs的KLF2 mRNA及蛋白水平显著低于对照组小鼠,而心脏、肝、肾组织中KLF2 mRNA表达较对照组小鼠无显著变化。两组小鼠的体重、进食、进水、形态无显著性差异。在LPS作用下,缺失KLF2的BMDMs炎症相关基因IL-6 mRNA表达水平较对照组显著下降,而IL-1、iNOS、CD86 mRNA表达水平较对照组显著升高。结论 本研究成功构建了巨噬细胞特异性敲除KLF2小鼠模型,为进一步研究巨噬细胞KLF2对临床炎症相关疾病的调控作用及机制奠定基础。
关键词
Kruppel样因子2
特异性敲除小鼠
CRE/LOXP系统
巨噬细胞
动脉粥样硬化
Keywords
KLF2
specific knockout mice
Cre/LoxP system
macrophages
atherosclerosis
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
千金子二萜醇调控TGF-β1/Smad通路影响肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达
被引量：
2
2
作者
蒋俊玲
赵俊峰(指导)
张嘉琪
周磊
潘世杰
雷震
机构
河南
中医
药大学第二临床医学院
河南
中医
药大学第二附属
医院
泌尿外科
河南省中医院中心实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第18期2216-2219,共4页
基金
河南省中医药科学研究专项课题项目(20-21ZY2216)。
文摘
目的:探讨千金子二萜醇调控TGF-β1/Smad通路影响肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达的机制。方法:建立肾癌移植瘤小鼠,分为模型组、实验组(千金子二萜醇组)和SB-431542组(TGF-β1/Smad通路抑制剂组),实验组小鼠灌胃给予20 mg/kg千金子二萜醇溶液,模型组灌胃给予等体积生理盐水,SB-431542组腹腔注射10 mg/kg SB-431542溶液,计算脾脏指数;Western blot检测Smad2/3和p-Smad2/3蛋白表达;ELISA检测肾癌移植瘤小鼠血清TNF-α和IL-17表达。结果:给药19 d后,与模型组相比,实验组和SB-431542组小鼠脾脏指数降低(P<0.05),Smad2/3蛋白表达升高(P<0.05),p-Smad2/3蛋白表达、TNF-α和IL-17水平明显降低(P<0.01)。结论:千金子二萜醇可通过调控TGF-β1/Smad通路活性降低肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达。
关键词
千金子二萜醇
肾癌
TGF-Β1/SMAD
TNF-Α
IL-17
Keywords
Lathyrol
Renal cell carcinoma
TGF-β1/Smad
TNF-α
IL-17
分类号
R737.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
巨噬细胞特异性敲除KLF2基因小鼠模型构建与鉴定
孟雪
王新洲
高水波
吴鸿
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
千金子二萜醇调控TGF-β1/Smad通路影响肾癌小鼠TNF-α和IL-17表达
蒋俊玲
赵俊峰(指导)
张嘉琪
周磊
潘世杰
雷震
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
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