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虫草素抑制PI3K通路的活化诱导口腔鳞状细胞癌SCC9细胞自噬性死亡 被引量:4
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作者 朱兰省 王艳玲 +1 位作者 刘爱群 许小婷 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期221-227,共7页
目的探究虫草素(CP)对口腔鳞状细胞癌SCC9细胞系自噬相关的作用和机制。方法实验设置SCC9 blank组、CP(5μg/ml)组、CP(10μg/ml)组和CP(20μg/ml)组。通过5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色检测细胞增殖,通过Hoechst染色检测细胞凋亡,通... 目的探究虫草素(CP)对口腔鳞状细胞癌SCC9细胞系自噬相关的作用和机制。方法实验设置SCC9 blank组、CP(5μg/ml)组、CP(10μg/ml)组和CP(20μg/ml)组。通过5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色检测细胞增殖,通过Hoechst染色检测细胞凋亡,通过Western blot检测Ki67、PCNA、Caspase-3、Caspase-9、Beclin 1、p62、LC3A/B、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达,通过免疫荧光检测细胞自噬标志分子LC3Ⅱ表达。添加PI3K抑制剂LY294002后,通过EdU染色检测细胞增殖,通过Hoechst染色检测细胞凋亡,通过免疫荧光检测细胞自噬标志分子LC3Ⅱ表达。结果与SCC9 blank组比较,各CP处理组细胞发生明显增殖抑制,并且伴随着凋亡发生,增殖相关分子表达下调,凋亡相关分子表达上调,并且伴随着CP使用浓度升高差异增加(P<0.01);自噬促进相关分子(Beclin 1、LC3Ⅱ)表达上调,自噬抑制相关分子p62表达下调,且自噬通路上游信号分子(PI3K/AKT/mTOR)活性降低,并且伴随着CP使用浓度升高差异增加(P<0.01);与CP处理相比,LY294002联合CP处理后细胞发生明显增殖抑制,促进凋亡和自噬。结论CP可以提高口腔鳞状细胞癌自噬水平,并可以抑制细胞增殖,促进细胞凋亡发生;主要原因可能是通过下调PI3K/AKT/mTOR通路来发挥作用。 展开更多
关键词 虫草素 口腔鳞状细胞癌 SCC9细胞系 自噬 凋亡 PI3K
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微弧氧化羟基磷灰石涂层增强金属钛种植体骨整合的体内研究 被引量:5
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作者 王艳玲 丁虹 +3 位作者 何巍 朱兰省 刘爱群 许小婷 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第11期1070-1073,共4页
目的:探索微弧氧化羟基磷灰石(HA)涂层金属钛种植体提高体内的骨整合的作用。方法:分别使用电化学法(ELC)和微弧氧化法(MAO)制备两种HA涂层金属钛种植体,扫描电镜观察两组种植体表面形态;比格犬下颌后牙拔出后2月后进行种植体植入治疗,... 目的:探索微弧氧化羟基磷灰石(HA)涂层金属钛种植体提高体内的骨整合的作用。方法:分别使用电化学法(ELC)和微弧氧化法(MAO)制备两种HA涂层金属钛种植体,扫描电镜观察两组种植体表面形态;比格犬下颌后牙拔出后2月后进行种植体植入治疗,植入后2个月进行骨组织切片染色观察种植体与相邻骨组织的结合程度;使用X线观察两组种植体周围的骨量;使用扭力试验检测扭出种植体所需的扭力,从而判断两组种植体骨结合的强度。结果:扫描电镜显示相比于ELC组,MAO组种植体表面更加粗糙;组织切片显示MAO组种植体与周围骨质结合更紧密;X线结果显示MAO组种植体周围骨质丰富,而ELC组周围骨质较少;扭力试验证明相比于ELC组,MAO组种植体扭出所需扭力更大,两组差异具有统计学意义(P=0.0006)。结论:微弧氧化羟基磷灰石涂层金属钛种植体可以作为一种性能优良的材料应用于临床种植体治疗中。 展开更多
关键词 种植体 微弧氧化 骨结合 金属钛
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微弧氧化羟基磷灰石涂层金属钛调控Wnt通路促进骨髓间充质干细胞的增殖 被引量:2
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作者 王艳玲 邵喆 +1 位作者 何巍 朱兰省 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期689-693,共5页
目的探讨微弧氧化羟基磷灰石涂层金属钛对骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖的影响和相关通路。方法采用电化学法(ELC)与微弧氧化法(MAO)制备羟基磷灰石(HA)涂层金属钛材料,通过比较水滴与2种涂层材料的接触角来评价材料亲水性的优良;通过扫... 目的探讨微弧氧化羟基磷灰石涂层金属钛对骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖的影响和相关通路。方法采用电化学法(ELC)与微弧氧化法(MAO)制备羟基磷灰石(HA)涂层金属钛材料,通过比较水滴与2种涂层材料的接触角来评价材料亲水性的优良;通过扫描电镜(SEM)观察材料的微观地形及BMSC在其表面的生长形态;使用CCK-8方法观察2种材料培养的BMSC在不同时间点(24、48和72 h)的增殖情况;使用Western blot方法检测Wnt通路关键蛋白Wnt-3a、β-catenin、GSK3β和p-GSK3β的表达。结果MAO-HA涂层材料的水滴接触角为(50.1±1.9)°,而ELC-HA涂层材料水滴接触角为(73.0±1.5)°(P<0.01);MAO-HA材料表面具有均匀粗糙的孔隙,ELC-HA材料表面光滑。扫描电镜下可见MAO组BMSC细胞充分伸展,细胞突起粗大,而ELC组细胞皱缩,突起较细。CCK-8实验显示MAO组BMSC在48 h和72 h时间点细胞增殖水平高于ELC组(P<0.05)。Western blot结果显示MAO组材料可以显著提高Wnt-3a、p-GSK3β和β-catenin蛋白表达(均P<0.05)。结论MAO-HA涂层金属钛材料可以通过激活Wnt通路促进BMSC增殖,有望作为新的种植体材料应用于临床。 展开更多
关键词 种植体 骨髓间充质干细胞 微弧氧化 金属钛 WNT通路
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姜黄素通过上调miR-124抑制牙龈卟啉单胞菌LPS诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应 被引量:7
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作者 李坤阳 陈栋 +3 位作者 左春然 刘爱群 朱兰省 牛兵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1867-1874,共8页
目的:探究姜黄素(Cur)对牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGFs)炎症反应及微小RNA-124(miR-124)的影响。方法:将HGFs分为对照(control)组、LPS组(10 mg/L LPS)及LPS+Cur(20、40和80μmol/L)组(10 mg/L LPS+对应剂... 目的:探究姜黄素(Cur)对牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGFs)炎症反应及微小RNA-124(miR-124)的影响。方法:将HGFs分为对照(control)组、LPS组(10 mg/L LPS)及LPS+Cur(20、40和80μmol/L)组(10 mg/L LPS+对应剂量Cur)。各组处理24 h,CCK-8法检测细胞活力;ELISA检测上清液中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;RT-qPCR法检测细胞中miR-124的水平;Western blot检测胞浆和胞核中核因子κB(NF-κB)p-p65蛋白水平;激光共聚焦显微镜检测NF-κB p-p65蛋白的入核情况。转染mimic-NC和miR-124 mimic,检测细胞中miR-124及胞浆和胞核中NF-κB p-p65蛋白水平。结果:LPS组细胞活力、miR-124水平和胞浆NF-κB p-p65蛋白水平低于control组(P<0.05),上清液IL-1β和TNF-α水平及胞核NF-κB p-p65蛋白水平高于control组(P<0.05)。LPS+Cur(40和80μmol/L)组细胞活力、miR-124水平及胞浆NF-κB p-p65蛋白水平高于LPS组(P<0.05),上清液TNF-α水平和胞核NF-κB p-p65蛋白水平低于LPS组(P<0.05)。LPS+80μmol/L Cur组细胞上清液IL-1β水平低于LPS组(P<0.05)。miR-124 mimic组细胞miR-124和胞浆中NF-κB p-p65蛋白水平高于LPS组和mimic-NC组(P<0.05),胞核NF-κB p-p65蛋白水平低于LPS组和mimic-NC组(P<0.05)。结论:Cur可抑制Pg LPS诱导的HGFs炎症反应,可能是通过上调miR-124进而抑制NF-κB p-p65入核实现的。 展开更多
关键词 姜黄素 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 人牙龈成纤维细胞 炎症反应 微小RNA-124
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雪旺细胞对种植体周围组织修复的实验研究
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作者 王艳玲 丁虹 +3 位作者 何巍 朱兰省 刘爱群 许小婷 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期571-575,共5页
目的:探索雪旺细胞移植治疗是否对种植体周围牙龈组织具有修复作用。方法:体外培养比格犬坐骨神经雪旺氏细胞,免疫荧光染色鉴定。6只比格犬双侧下颌后牙拔出后2月,自体坐骨神经雪旺细胞(实验组)或生理盐水(对照组)分别与种植体共移植。E... 目的:探索雪旺细胞移植治疗是否对种植体周围牙龈组织具有修复作用。方法:体外培养比格犬坐骨神经雪旺氏细胞,免疫荧光染色鉴定。6只比格犬双侧下颌后牙拔出后2月,自体坐骨神经雪旺细胞(实验组)或生理盐水(对照组)分别与种植体共移植。ELISA试剂盒观察龈沟液中炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和神经营养因子(BDNF、NGF)表达,免疫组织化学染色观察牙龈组织NF-200表达。应用SPSS17.0进行数据统计分析。结果:体外培养的细胞为S-100阳性。实验组神经元轴突长于对照组(P<0.05)。龈沟液中TNF-α、IL-1β和IL-6的表达低于对照组(P<0.05),BDNF和NGF的表达高于对照组(P<0.05),NF-200(+)神经纤维更多。结论:雪旺细胞可以促进种植体周围组织修复。 展开更多
关键词 种植体 雪旺细胞 炎症因子 神经营养因子
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VPS4B调控Notch通路对促进牙髓干细胞成牙本质分化的机制研究 被引量:1
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作者 李坤阳 陈栋 +3 位作者 左春然 刘爱群 朱兰省 牛兵 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期36-41,共6页
目的探讨细胞液泡分选蛋白4B(VPS4B)对人牙髓干细胞(hDPSCs)成牙本质分化及Notch通路的影响。方法hDPSCs分正常组、矿化组、阴性对照组、VPS4B-siRNA组,除正常组(正常培养,不做任何处理)外,其余各组添加矿化液(0.785 g/L地塞米松、0.05 ... 目的探讨细胞液泡分选蛋白4B(VPS4B)对人牙髓干细胞(hDPSCs)成牙本质分化及Notch通路的影响。方法hDPSCs分正常组、矿化组、阴性对照组、VPS4B-siRNA组,除正常组(正常培养,不做任何处理)外,其余各组添加矿化液(0.785 g/L地塞米松、0.05 g/L维生素、2.16 g/Lβ-甘油磷酸钠),同时阴性对照组和VPS4BsiRNA组均用脂质体Lipofectamine 2000分别和阴性对照siRNA、VPS4B-siRNA共转染。CCK8检测细胞增殖情况;蛋白免疫印迹检测细胞中VPS4B、Notch受体释放其胞内结构域(NICD)、hairy相关转录因子1(Hey1)蛋白水平;茜素红染色观察细胞矿化情况;钙浓度检测试剂盒检测细胞钙浓度;实时荧光定量PCR检测细胞Runx2、骨桥蛋白(OPN)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)mRNA水平。结果正常组茜素红染色较浅,面积较小;矿化组、阴性对照组染色较深,且面积较大;VPS4B-siRNA组染色颜色有所减轻,面积减少。与正常组相比,矿化组、阴性对照组OD450水平,NICD、Hey1蛋白水平降低(P<0.05),矿化结节相对数量,VPS4B蛋白水平,钙浓度,Runx2、OPN、DSPP mRNA水平升高(P<0.05);VPS4B-siRNA组矿化结节相对数量,OPN、DSPP mRNA水平升高(P<0.05);OD450水平,NICD、Hey1蛋白水平降低(P<0.05)。分别与矿化组、阴性对照组相比,VPS4B-siRNA组NICD、Hey1蛋白水平升高(P<0.05);OD450水平,VPS4B蛋白水平,矿化结节相对数量,钙浓度,Runx2、OPN、DSPP mRNA水平降低(P<0.05)。结论干扰VPS4B后可抑制hDPSCs牙本质分化,并初步探究可能是通过激活Notch通路实现的。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 成牙本质分化 细胞液泡分选蛋白4B NOTCH通路
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