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烟草新驱动蛋白基因NtTKR原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化
被引量：
1
1
作者
乔慧聪
任向波
+1 位作者
吴秀丽
李芬
《江苏农业科学》
北大核心
2017年第14期24-26,共3页
通过对烟草驱动蛋白家族新成员Nt Tkr尾部的酵母双杂交筛选,得到多个与Nt Tkr互作的候选蛋白。为进一步验证NtTkr与候选蛋白之间的相互作用,以p GBKT7-Nt Tkr质粒为模板,PCR扩增烟草NtTKR全长,将其克隆入原核表达载体pMXB10,重组质粒pMX...
通过对烟草驱动蛋白家族新成员Nt Tkr尾部的酵母双杂交筛选,得到多个与Nt Tkr互作的候选蛋白。为进一步验证NtTkr与候选蛋白之间的相互作用,以p GBKT7-Nt Tkr质粒为模板,PCR扩增烟草NtTKR全长,将其克隆入原核表达载体pMXB10,重组质粒pMXB10-NtTkr-3582经生物公司测序,结果正确。将其转化为BL21(DE3),IPTG诱导其表达目的蛋白,经几丁质法纯化及SDS-PAGE检测,结果表明笔者得到了高纯度的目的蛋白。该试验为进一步运用Pull Down确定Nt Tkr与候选蛋白之间的体外互作及深入研究该蛋白的其他生物学功能奠定了基础。
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关键词
烟草
新驱动蛋白
NtTkr
诱导表达
纯化
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职称材料
题名
烟草新驱动蛋白基因NtTKR原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化
被引量：
1
1
作者
乔慧聪
任向波
吴秀丽
李芬
机构
河南师范大学生命科学学院/资源微生物与功能分子河南省高校重点实验室培育基地
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2017年第14期24-26,共3页
基金
教育部留学回国人员启动基金
河南省高校科技创新团队支持计划(编号:13IRTSTHN009)
文摘
通过对烟草驱动蛋白家族新成员Nt Tkr尾部的酵母双杂交筛选,得到多个与Nt Tkr互作的候选蛋白。为进一步验证NtTkr与候选蛋白之间的相互作用,以p GBKT7-Nt Tkr质粒为模板,PCR扩增烟草NtTKR全长,将其克隆入原核表达载体pMXB10,重组质粒pMXB10-NtTkr-3582经生物公司测序,结果正确。将其转化为BL21(DE3),IPTG诱导其表达目的蛋白,经几丁质法纯化及SDS-PAGE检测,结果表明笔者得到了高纯度的目的蛋白。该试验为进一步运用Pull Down确定Nt Tkr与候选蛋白之间的体外互作及深入研究该蛋白的其他生物学功能奠定了基础。
关键词
烟草
新驱动蛋白
NtTkr
诱导表达
纯化
分类号
S572.01 [农业科学—烟草工业]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
烟草新驱动蛋白基因NtTKR原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化
乔慧聪
任向波
吴秀丽
李芬
《江苏农业科学》
北大核心
2017
1
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