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FoxA3和Hnf4α对原代大鼠肝细胞体外增殖的促进效应
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作者 王巧燕 李丽丽 徐存拴 《湖北农业科学》 2015年第7期1648-1651,1654,共5页
为研究Fox A3和Hnf4α组合对原代大鼠肝细胞体外增殖的作用,构建了Fox A3和Hnf4α基因的慢病毒载体,共转染体外培养的原代大鼠肝细胞;倒置荧光显微镜下观察转染细胞是否增殖;反转录PCR(Reverse transcription PCR,RT-PCR)检测外源基因... 为研究Fox A3和Hnf4α组合对原代大鼠肝细胞体外增殖的作用,构建了Fox A3和Hnf4α基因的慢病毒载体,共转染体外培养的原代大鼠肝细胞;倒置荧光显微镜下观察转染细胞是否增殖;反转录PCR(Reverse transcription PCR,RT-PCR)检测外源基因和肝细胞特异基因的表达情况;PAS(Periodic acidschiff)染色和吲哚菁绿(Indocyanine green,ICG)摄取检测转染细胞功能。结果表明,慢病毒转染4 d后表达绿色荧光蛋白的部分肝细胞呈现上皮样形态并增殖成簇,与正常培养的肝细胞相比增殖能力明显增强;PCR分析表明增殖的肝细胞除表达外源Fox A3和Hnf4α外,还表达肝细胞的标志基因Alb、CK18和G6p;功能检测结果表明增殖的肝细胞具有成熟肝细胞糖原合成和吲哚菁绿摄取的能力。以上结果表明,Fox A3和Hnf4α能促使体外培养的原代大鼠肝细胞进行增殖,并维持肝细胞的基本生物学特性。 展开更多
关键词 FOX A3 Hnf4α 大鼠肝细胞 细胞增殖
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