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一株降解呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的筛选与鉴定 被引量:17
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作者 余祖华 丁轲 +6 位作者 刘赛宝 李亚菲 李旺 李元晓 曹平华 刘一尘 孙二刚 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期121-125,共5页
目的:分离筛选能够降解呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)的芽孢杆菌,以用于该毒素的生物降解。方法:采集霉变秸秆、土壤和粪便样品,先将样品加热80℃后,取上清液接种到以DON为唯一碳源的分离培养基富集DON降解菌。以LB培养基分离纯化富集菌... 目的:分离筛选能够降解呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)的芽孢杆菌,以用于该毒素的生物降解。方法:采集霉变秸秆、土壤和粪便样品,先将样品加热80℃后,取上清液接种到以DON为唯一碳源的分离培养基富集DON降解菌。以LB培养基分离纯化富集菌,然后对分离到的菌株进行DON毒素降解能力检测。对降解能力最强的菌株进行形态学观察、生理生化实验和16S r DNA序列鉴定。结果:从16株分离菌中筛选得到一株对DON降解能力最强的菌株B.JG05,降解率最高可达80.61%,且对含DON饲料的降解率为82.68%。该菌株呈短杆状,能形成芽孢;生理生化特性符合蜡样芽孢杆菌的基本特征;16S r DNA序列进化树分析表明该菌株与蜡样芽孢杆菌的亲缘关系最近。结论:筛选获得了一株高效降解DON的蜡样芽孢杆菌B.JG05,为饲料和食品中DON毒素的生物降解提供了可能。 展开更多
关键词 呕吐毒素 蜡样芽孢杆菌 降解 筛选 鉴定
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鸡源高产淀粉酶丁酸梭菌的分离鉴定 被引量:8
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作者 李圣杰 丁轲 +4 位作者 姜芳芳 魏嘉敏 李旺 李元晓 孙二刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第11期3073-3079,共7页
为了获得产淀粉酶的丁酸梭菌,本研究从鸡小肠表面黏液中进行丁酸梭菌的分离与筛选,首先对样品进行80℃水浴10min除去非芽孢菌后,然后接种到TSN培养基进行菌株的分离与筛选。对分离到的菌株进行菌落形态、显微形态初步观察,然后对疑似丁... 为了获得产淀粉酶的丁酸梭菌,本研究从鸡小肠表面黏液中进行丁酸梭菌的分离与筛选,首先对样品进行80℃水浴10min除去非芽孢菌后,然后接种到TSN培养基进行菌株的分离与筛选。对分离到的菌株进行菌落形态、显微形态初步观察,然后对疑似丁酸梭菌的菌株进行产酸能力和淀粉酶酶活检测,最后对既产酸又高产淀粉酶的菌株进行生理生化鉴定和16SrDNA序列分析。结果表明分离到一株革兰氏阳性厌氧菌C.B1,菌体呈短杆状,能形成圆形或椭圆形芽孢,生理生化结果也符合丁酸梭菌的基本特征,16SrDNA序列长度为1 450bp,与丁酸梭菌的同源性高达99%以上,因此确定该分离菌株为丁酸梭菌,为进一步开发新的微生态制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 丁酸梭菌 鸡源 淀粉酶 分离 鉴定
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丁酸梭菌C.L24蛋白酶产酶条件的优化 被引量:8
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作者 姜芳芳 李圣杰 +4 位作者 丁轲 李旺 李元晓 孙二刚 程相朝 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第1期63-67,共5页
为了提高丁酸梭菌(Clostridium butyricum L24,C.L24)产蛋白酶的活性,试验对其产蛋白酶条件进行了探索。采用Folin酚法测定酶活,分别对碳源、氮源、pH、温度、接种量、培养时间等进行了筛选。结果表明丁酸梭菌C.L24产蛋白酶的最佳碳源... 为了提高丁酸梭菌(Clostridium butyricum L24,C.L24)产蛋白酶的活性,试验对其产蛋白酶条件进行了探索。采用Folin酚法测定酶活,分别对碳源、氮源、pH、温度、接种量、培养时间等进行了筛选。结果表明丁酸梭菌C.L24产蛋白酶的最佳碳源是可溶性淀粉,最佳氮源是酵母膏,最佳培养液起始pH值是7.0,最佳培养温度是37℃,最佳接种量是2%,最佳培养时间是48h。在此条件下,C.L24产蛋白酶的酶活最高可达68.35U/mL,比优化前蛋白酶活提高了39.92%。 展开更多
关键词 丁酸梭菌 蛋白酶 产酶条件 优化
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猪源高产蛋白酶芽胞杆菌的分离与鉴定 被引量:1
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作者 李三栋 丁轲 +3 位作者 罗伟光 彭春平 孙二刚 刘永垒 《饲料博览》 2013年第9期34-37,共4页
利用酪蛋白培养基从猪粪便样品中分离产蛋白酶的芽胞杆菌,采用福林酚法测定其酶活力,对筛选到的高酶活菌株进行形态学、生理生化和分子鉴定。结果表明,从86株分离菌中筛选了一株酶活较大的菌株B.A464,革兰氏阳性菌,呈粗杆状,能形成卵圆... 利用酪蛋白培养基从猪粪便样品中分离产蛋白酶的芽胞杆菌,采用福林酚法测定其酶活力,对筛选到的高酶活菌株进行形态学、生理生化和分子鉴定。结果表明,从86株分离菌中筛选了一株酶活较大的菌株B.A464,革兰氏阳性菌,呈粗杆状,能形成卵圆形芽孢,16S rDNA序列长度是1 463 bp,与蜡样芽孢杆菌的同源性高达99%,鉴定为蜡样芽孢杆菌,所产蛋白酶活力为2.19×103U·mL-1。 展开更多
关键词 蛋白酶 芽孢杆菌 16S RDNA 分离 鉴定
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饲料中添加乳酸菌对肉鸡免疫器官的影响 被引量:7
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作者 李旺 刘永磊 +1 位作者 孙二刚 程传红 《饲料博览》 2013年第6期1-3,共3页
乳酸菌是微生态制剂中的主要菌种,作为饲料添加剂具有促进动物生长、减少动物发病率和死亡率、增加动物抗应激能力等作用。试验采用单因素随机分组设计,将1日龄AA肉仔鸡96只随机分为4组,试验1组为对照组,试验2、3、4组为试验组,每组设3... 乳酸菌是微生态制剂中的主要菌种,作为饲料添加剂具有促进动物生长、减少动物发病率和死亡率、增加动物抗应激能力等作用。试验采用单因素随机分组设计,将1日龄AA肉仔鸡96只随机分为4组,试验1组为对照组,试验2、3、4组为试验组,每组设3个重复,每个重复8只鸡。每隔10d分别灌服乳酸菌培养液0、200、300、400μL.只-1。对照组和试验组采用完全相同的日粮,自由采食和饮水。饲养至20和40d时分别宰杀。通过对免疫器官胸腺、脾脏和法氏囊重量、尺寸和发育情况判断添加重组乳酸菌对肉仔鸡免疫功能的影响。结果表明,20日龄时试验组免疫器官指标有所增加,但各免疫器官指标组间差异不显著(P>0.05)。而40d时第2组法氏囊重与其他各组间差异显著(P<0.05),第2组法氏囊指数与第3、4组相比差异显著(P<0.05)。第3、4组脾脏直径与第1组间差异显著(P<0.05)。试验结果表明,添加乳酸菌能够促进肉鸡后期的免疫器官发育。 展开更多
关键词 乳酸菌 肉鸡 免疫器官
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添加纤维素酶产生菌对鸡饲料养分消化率的影响 被引量:3
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作者 李旺 孙二刚 +1 位作者 刘永磊 程传红 《饲料博览》 2013年第5期1-4,共4页
试验研究枯草芽孢杆菌对肉鸡日粮粗纤维消化率的影响。选用1日龄AA肉仔鸡96只,随机分为4组(对照组和试验1、2、3组),每组3个重复,每个重复8只鸡。对照组每10日灌服乳杆菌培养液400μL,试验组每10日分别口腔灌服乳杆菌和枯草芽孢杆菌菌液... 试验研究枯草芽孢杆菌对肉鸡日粮粗纤维消化率的影响。选用1日龄AA肉仔鸡96只,随机分为4组(对照组和试验1、2、3组),每组3个重复,每个重复8只鸡。对照组每10日灌服乳杆菌培养液400μL,试验组每10日分别口腔灌服乳杆菌和枯草芽孢杆菌菌液200、300、400μL。结果表明,产纤维素酶枯草芽孢杆菌对鸡前期(1~20d)和后期(21~40d)饲料粗纤维的消化率均有显著影响(P<0.05)。试验结果表明,口腔灌服400μL菌液效果最好,产纤维素酶枯草芽孢杆菌既能表达纤维素酶,又对动物有益生菌的作用,所产的纤维素酶特异性地降解纤维素,从而对饲料粗纤维的消化率具有显著提高作用。 展开更多
关键词 纤维素酶 枯草芽孢杆菌 纤维素 消化率
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鸭源高产L-乳酸凝结芽孢杆菌的分离与鉴定 被引量:9
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作者 孟长纪 丁轲 +2 位作者 李旺 李元晓 孙二刚 《河南科技大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第6期67-70,8-9,共4页
为了获得高产L-乳酸的凝结芽孢杆菌,从河南省汝州市的肉鸭养殖场采集50份鸭肠道黏液样品。利用分离培养基对细菌进行分离和纯化,用试剂盒检测L-乳酸产量,结合菌落形态、显微形态、生理生化试验和16S r DNA序列鉴定其种属。鉴定结果表明:... 为了获得高产L-乳酸的凝结芽孢杆菌,从河南省汝州市的肉鸭养殖场采集50份鸭肠道黏液样品。利用分离培养基对细菌进行分离和纯化,用试剂盒检测L-乳酸产量,结合菌落形态、显微形态、生理生化试验和16S r DNA序列鉴定其种属。鉴定结果表明:从50株细菌中分离得到一株高产L-乳酸的菌株BC07,L-乳酸产量为43.2 g/L。经鉴定为凝结芽孢杆菌,能形成芽孢,而且该菌株能够耐受较强的酸、胆盐和高温。 展开更多
关键词 鸭源 凝结芽孢杆菌 L-乳酸 分离 鉴定
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纤维素酶系基因的克隆与序列分析 被引量:3
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作者 李青青 王旭歌 +1 位作者 钟甲丽 李旺 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第3期40-43,共4页
根据Gen Bank已报道的枯草芽孢杆菌的基因序列,设计特异性引物,经PCR分别从B.subtilis L、B.subtilis K基因组中扩增得到3个纤维素酶基因序列,基因片段分别长约700、1 500、1 700 bp。连接到T载体上进行测序,获得该3个纤维素酶基因片段... 根据Gen Bank已报道的枯草芽孢杆菌的基因序列,设计特异性引物,经PCR分别从B.subtilis L、B.subtilis K基因组中扩增得到3个纤维素酶基因序列,基因片段分别长约700、1 500、1 700 bp。连接到T载体上进行测序,获得该3个纤维素酶基因片段的DNA序列,在线比对分析表明3个基因的部分碱基序列与已报道的纤维素酶基因的序列同源性达99%。这3个基因的全序列在Gen Bank中未见报道,且通过软件对比,三者没有任何相似性。根据3个纤维素酶基因的来源分别命名为Lcen、Ken、Kkg。借助软件分析确定Lcen基因全长699 bp,基因序列为1个完整的阅读框,连续编码232个氨基酸。Ken基因全长1 500 bp,连续编码499个氨基酸。Kkg基因全长1 686 bp,基因序列为1个完整的阅读框,连续编码561个氨基酸。3个基因均属于纤维素酶家族大类。 展开更多
关键词 纤维素酶 基因 克隆 序列分析
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酿酒酵母培养物对奶牛泌乳量和乳品质的影响 被引量:5
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作者 柴鸿勋 韩蕴琦 +2 位作者 李旺 李元晓 刘亮 《饲料研究》 CAS 北大核心 2018年第3期48-51,共4页
为研究酿酒酵母培养物在高产奶牛上的作用效果。试验在研究过程中选取124头泌乳量、泌乳期及产犊胎次接近的健康奶牛,随机将其平均分为2组,对照组饲喂食原厂普通日粮,试验组在普通日粮基础上加入酿酒酵母培养物,添加量为每天每头奶牛200... 为研究酿酒酵母培养物在高产奶牛上的作用效果。试验在研究过程中选取124头泌乳量、泌乳期及产犊胎次接近的健康奶牛,随机将其平均分为2组,对照组饲喂食原厂普通日粮,试验组在普通日粮基础上加入酿酒酵母培养物,添加量为每天每头奶牛200 g,预试期5 d,正饲期15 d,试验过程中随机抽取2组泌乳牛的牛奶进行乳品质检测。结果表明:试验结束后,试验组产奶量提升4.8%,乳脂和干物质分别显著升高25.8%、4.8%(P<0.05),其他乳成分(乳糖、体细胞和乳蛋白)略微下降,但差异不显著(P>0.05)。综上可得,在奶牛饲粮中添加一定量的酿酒酵母物有利于奶牛泌乳量的提升,也可改善乳品质。 展开更多
关键词 酿酒酵母培养物 奶牛 泌乳量 乳成分
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