免疫沉淀分析抗人DR5单克隆抗体激活白血病细胞caspase8/10 被引量：1

1

作者 都景芳 张舒曼 +2 位作者 刘广超 李淑莲 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1299-1305,共7页

目的:分析抗人死亡受体5(death receptor 5,DR5)单克隆抗体mDRA-6对白血病细胞系Jurkat及U937细胞caspase8、caspase10激活变化。方法:采用Western blot方法检测mDRA-6对Jurkat及U937细胞caspase-8、caspase-10、caspase-3的激活改变;... 目的:分析抗人死亡受体5(death receptor 5,DR5)单克隆抗体mDRA-6对白血病细胞系Jurkat及U937细胞caspase8、caspase10激活变化。方法:采用Western blot方法检测mDRA-6对Jurkat及U937细胞caspase-8、caspase-10、caspase-3的激活改变;免疫沉淀方法分析mDRA-6诱导的Jurkat及U937细胞DISC的caspase-8、caspase-10分子;定量-PCR检测Jurkat、U937细胞caspase-8、caspase-10 mRNA表达。MTT法检测caspase-8、caspase-10和caspase-3抑制剂对mDRA-6抑制Jurkat及U937细胞生长增殖的影响;AnnexinⅤ/PI双染流式细胞术检测caspase-8、caspase-10抑制剂对mDRA-6诱导细胞凋亡作用的影响;结果:Western blot检测显示,mDRA-6作用Jurkat细胞,导致细胞caspase-8分子激活降解,但对caspase-10无激活改变;mDRA-6作用U937细胞,激活细胞caspase-10分子,但对caspase-8无激活表现;mDRA-6作用Jurkat和U937细胞,caspase-3及PARP均表现出激活降解。免疫沉淀检测发现,mDRA-6作用白血病细胞4h,Jurkat细胞DISC的caspase-8条带明显,caspase-10条带无明显显示;相反,U937细胞DISC的caspase-10条带出现,而caspase-8无明显条带显示。定量-PCR检测发现,Jurkat和U937细胞caspase-8 mRNA表达无明显差异,但U937细胞caspase-10 mRNA表达水平明显高于Jurkat细胞(P<0.01)。预先使用caspase-8、caspase-10、caspase-3抑制剂孵育细胞1小时,mDRA-6所致的Jurkat细胞生长抑制率分别降低了72.94%(t=20.27,P<0.01)、8.09%(t=1.82,P>0.05)和31.20%(t=8.06,P<0.01);mDRA-6所致U937细胞生长抑制率分别降低了4.53%(t=0.90,P>0.05)、69.09%(t=17.25,P<0.01)和50.20%(t=13.06,P<0.01)。AnnexinⅤ/PI双染流式细胞术检测发现,预先使用caspase-8、10抑制剂孵育细胞1小时,mDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡率分别降低了80.82%和8.34%;mDRA-6诱导的U937细胞凋亡率分别降低2.50%和48.47%。结论:mDRA-6激活不同起始caspase诱导细胞凋亡,激活caspase-8启动Jurkat细胞凋亡,激活caspase-10启动U937细胞凋亡;U937细胞caspase-10激活可能与细胞caspase-10mRNA高表达有关。 展开更多

关键词 凋亡 死亡受体5 单克隆抗体 半胱天冬酶 JURKAT细胞 U937细胞

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交联抗人DR5单抗-YM366EC诱导Jurkat细胞凋亡机制研究 被引量：6

2

作者 白慧玲 杜耀武 +4 位作者 王雪垠 李淑莲 王靖 刘广超 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期789-792,797,共5页

目的:探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单抗-YM366EC引起Jurkat细胞凋亡信号传导通路,阐明抗DR5抗体的抗肿瘤效应机制,为相关肿瘤治疗提供依据。方法:光镜下观察交联366EC作用下Jurkat细胞形态变化,并利用MT... 目的:探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单抗-YM366EC引起Jurkat细胞凋亡信号传导通路,阐明抗DR5抗体的抗肿瘤效应机制,为相关肿瘤治疗提供依据。方法:光镜下观察交联366EC作用下Jurkat细胞形态变化,并利用MTT法检测Jurkat细胞的增殖,利用FITC-AnnexinV及PI标记流式细胞仪检测交联YM366EC对Jurkat细胞凋亡率影响。进一步用Western blot法检测交联YM366EC作用于Jurkat细胞2、4、6、8、10、12小时时Bcl-2、Cyt-C、Bax、caspase3、caspase9的表达变化。结果:DR5抗体YM366EC单独应用无凋亡作用,但应用抗小鼠IgG交联366EC后可致Jurkat细胞染色质边集、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成,并可直接诱导TRAIL敏感的Jurkat细胞凋亡改变。Western blot检测到随着抗体诱导时间的延长Jurkat细胞Bcl-2蛋白表达减少;Cyt-C、Bax、有活性的caspase3和caspase9蛋白的表达增加。结论:交联抗DR5抗体YM366EC对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,诱导的Jurkat细胞凋亡的分子机制涉及到Cyt-C、Bax、caspase3、caspase9。 展开更多

关键词 交联 JURKAT细胞 抗DR5抗体 凋亡 流式细胞术 免疫印迹

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抗人DR5抗体mDRA-6细胞毒作用机制分析 被引量：7

3

作者 刘广超 马远方 +4 位作者 张军 李淑莲 卢峰 白慧玲 赵粤萍 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期790-793,共4页

目的:探讨鼠抗人DR5单克隆抗体(mAb)mDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用及其机制。方法:以流式细胞术测定mAbmDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用和细胞凋亡作用,以及caspase8、9的抑制剂对mAbmDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡的影响。在荧光显微镜... 目的:探讨鼠抗人DR5单克隆抗体(mAb)mDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用及其机制。方法:以流式细胞术测定mAbmDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用和细胞凋亡作用,以及caspase8、9的抑制剂对mAbmDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡的影响。在荧光显微镜下,观察mAbmDRA-6对Jurkat细胞形态的影响。以琼脂糖凝胶电泳检测Jurkat细胞中的DNA片段化。结果:mAbmDRA-6对Jurkat细胞具有显著的细胞毒作用,并呈剂量和时间依赖性。经mAbmDRA-6处理后,Jurkat细胞可出现典型的细胞凋亡的形态特征:细胞膜皱缩,出泡,染色质浓缩,形成凋亡小体等。经mAbmDRA-6处理后,Jurkat细胞膜表面高表达丝氨酸磷脂,并可导致Jurkat细胞中的DNA片段化。caspase8的抑制剂可明显抑制mAbmDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡,caspase9的抑制剂的影响很小。结论:mAbmDRA-6可通过死亡受体信号传导途径诱导Jurakt细胞凋亡,对Jurkat细胞产生细胞毒作用,其在以TRAIL/DR5系统进行的肿瘤治疗和探讨DR5功能结构域方面具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 死亡受体 细胞凋亡 单克隆抗体

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抗人DR5单抗与阿霉素联合对人肝癌细胞SMMC-7721协同杀伤效应 被引量：5

4

作者 张军 马远方 +2 位作者 刘广超 李淑莲 卢锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期133-136,共4页

目的:探讨mDRA-6对肝癌细胞系SMMC-7721致凋亡作用,及阿霉素与mDRA-6联合协同杀伤效应与机制。方法:常规培养肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率。Hoechst 33258染色观察SMMC-7721细胞形态变化;MTT法检测细胞毒性作用... 目的:探讨mDRA-6对肝癌细胞系SMMC-7721致凋亡作用,及阿霉素与mDRA-6联合协同杀伤效应与机制。方法:常规培养肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率。Hoechst 33258染色观察SMMC-7721细胞形态变化;MTT法检测细胞毒性作用;流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果:(1)mDRA-6能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,在1.89μg/m l浓度下可杀伤36%的细胞,增加mDRA-6浓度,凋亡作用无明显增加;(2)SMMC-7721细胞对阿霉素敏感,存在浓度依赖性;(3)阿霉素与mDRA-6联合对SMMC-7721细胞具有协同杀伤作用,2μg/m l的mDRA-6与40 ng/m l的阿霉素联合杀伤60%SMMC-7721,Hoechst 33258染色和Annexin V/PI染色证实杀伤作用是通过细胞凋亡实现的。结论:mDRA-6能够诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,阿霉素与mDRA-6联合具有协同作用。 展开更多

关键词 抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6) 阿霉素 协同杀伤作用 细胞凋亡

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Foxp3对肺癌细胞增殖及成瘤的影响 被引量：5

5

作者 刘瑞敏 晁玮霞 +4 位作者 王少龙 王明丽 贾彩云 白慧玲 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1481-1484,共4页

目的:研究转录因子Foxp3在肺癌细胞中的高表达对肺癌细胞增殖及成瘤的影响。方法:利用脂质体转染法建立稳定高表达Foxp3的NCIH-h Foxp3肺癌细胞株。MTT法观测NCIH-h Foxp3及对照细胞的增殖。ELISA法检测NCIHh Foxp3及对照细胞IL-8、IL-1... 目的:研究转录因子Foxp3在肺癌细胞中的高表达对肺癌细胞增殖及成瘤的影响。方法:利用脂质体转染法建立稳定高表达Foxp3的NCIH-h Foxp3肺癌细胞株。MTT法观测NCIH-h Foxp3及对照细胞的增殖。ELISA法检测NCIHh Foxp3及对照细胞IL-8、IL-10的分泌。建立移植瘤小鼠模型,观察成瘤情况。结果:成功建立高表达Foxp3的NCIH-h Foxp3肺癌细胞株;与阴性对照相比,NCIH-h Foxp3细胞增殖减慢,但成瘤能力强。NCIH-h Foxp3细胞培养上清IL-8表达量减低,IL-10表达量升高。结论:高表达Foxp3的肺癌细胞可能通过表达细胞因子改变局部生长的微环境,逃逸免疫监视,而促进肿瘤细胞的成瘤和发展。 展开更多

关键词 FOXP3 高表达 增殖 成瘤

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食管癌细胞表面DR5的表达分布与细胞铺展状态的关系 被引量：4

6

作者 刘广超 都景芳 +4 位作者 马远方 王秀英 高荣 高萍 刘世贵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期817-821,共5页

目的:探讨食管癌鳞癌EC9706细胞系细胞表面DR5的表达分布与细胞铺展状态的关系。方法:免疫细胞化学技术分析食管癌EC9706细胞的DR5表达分布;流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5的表达及细胞的凋亡率。结果:DR5分布在食管癌EC9706细胞的细... 目的:探讨食管癌鳞癌EC9706细胞系细胞表面DR5的表达分布与细胞铺展状态的关系。方法:免疫细胞化学技术分析食管癌EC9706细胞的DR5表达分布;流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5的表达及细胞的凋亡率。结果:DR5分布在食管癌EC9706细胞的细胞质和细胞膜表面,主要在细胞质,但在细胞核没有DR5分布,而且在悬浮的食管癌细胞表面DR5表达高于铺展者。悬浮的食管癌细胞对抗DR5功能性抗体诱导的细胞凋亡敏感性高于铺展者。结论:食管癌细胞表面DR5的表达与细胞铺展状态具有密切的关系,细胞铺展状态的变化直接影响细胞表面DR5的表达分布以及对抗DR5功能性抗体诱导的细胞凋亡敏感性。该研究结果对进一步探讨DR5表达分布的机制以及TRAIL和DR5的功能性抗体的抗肿瘤临床应用有一定的指导意义。 展开更多

关键词 DR5 功能性抗体 TRAIL 细胞凋亡

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死亡受体5在肝癌细胞系及肝细胞系表面的表达 被引量：5

7

作者 张军 马远方 +1 位作者 刘广超 吴雄文 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期287-289,共3页

目的:利用抗死亡受体5(DeathReceptor5)单克隆抗体(mAb),检测DR5在肝癌细胞系的表达。方法:sDR5免疫BALB/c小鼠,小鼠脾细胞与SP2/0-Ag14细胞在50%PEG条件下融合,获得能够分泌抗DR5单克隆抗体的杂交瘤细胞株,利用杂交瘤细胞株分泌的抗DR... 目的:利用抗死亡受体5(DeathReceptor5)单克隆抗体(mAb),检测DR5在肝癌细胞系的表达。方法:sDR5免疫BALB/c小鼠,小鼠脾细胞与SP2/0-Ag14细胞在50%PEG条件下融合,获得能够分泌抗DR5单克隆抗体的杂交瘤细胞株,利用杂交瘤细胞株分泌的抗DR5特异性单克隆抗体,采用流式细胞仪技术测定抗DR5mAb结合至细胞表面的量来分析死亡受体DR5在肝癌细胞系及肝细胞表面的表达情况。结果:不同细胞表面DR5的表达水平分别为:人肝癌SMMC7721细胞95%、人肝细胞癌HepG2细胞40%,人正常肝细胞HL-770220.3%。结论:抗DR5mAb能够特异性与DR5结合。DR5在人肝癌SMMC7721细胞高水平表达,人肝细胞癌HepG2细胞中度表达,人正常肝细胞HL-7702细胞低表达。该特异性mAb在研究TRAIL受体的生物功能上是一种有用的工具,对研究DR5在组织和细胞系表达十分有价值。 展开更多

关键词 死亡受体5 单克隆抗体 表达

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抗人DR5单克隆抗体诱导Jurkat和U937细胞凋亡的线粒体信号通路 被引量：2

8

作者 李淑莲 蔡静 +2 位作者 张舒曼 刘广超 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1068-1072,共5页

目的:探讨抗人死亡受体5(Death receptor 5,DR5)单克隆抗体mDRA-6诱导Jurkat和U937细胞凋亡的线粒体信号通路。方法:MTT法检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞生长增殖的影响,以及caspase-9、3抑制剂对mDRA-6抑制Jur-kat和U937细胞生长增殖的... 目的:探讨抗人死亡受体5(Death receptor 5,DR5)单克隆抗体mDRA-6诱导Jurkat和U937细胞凋亡的线粒体信号通路。方法:MTT法检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞生长增殖的影响,以及caspase-9、3抑制剂对mDRA-6抑制Jur-kat和U937细胞生长增殖的影响;琼脂糖凝胶电泳检测Jurkat和U937细胞DNA片段化降解;Western blot检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞bax、bcl-2、bcl-xl、Cyt c及caspase-9、3的激活改变。结果:mDRA-6呈时间、浓度依赖性地抑制Jurkat和U937细胞的生长增殖,10 mg/L的mDRA-6作用6、8和10小时,Jurkat细胞增殖抑制率分别达59.38%、72.56%和76.28%,U937细胞增殖抑制率分别达38.67%、47.54%和50.59%。琼脂糖凝胶电泳显示,10 mg/L的mDRA-6作用6小时,Jurkat和U937细胞均呈现凋亡细胞特有的DNA梯形条带;Western blot检测结果发现,随着mDRA-6作用时间延长,Jurkat和U937细胞内促凋亡分子bax增多,抗凋亡分子bcl-2及bcl-xl减少,Cyt c释放明显增多,同时caspase-9、caspase-3也显示明显的激活表现。预先使用caspase-9抑制剂孵育细胞1小时,mDRA-6所致Jurkat和U937细胞生长抑制率分别降低了24.36%(t=5.44,P﹤0.01)和20.82%(t=4.29,P﹤0.01),mDRA-6所致Jurkat和U937细胞凋亡率分别降低了32.89%和23.97%。结论:线粒体信号通路激活是抗人死亡受体5(Death receptor 5,DR5)单克隆抗体mDRA-6诱导Jurkat和U937细胞凋亡的途径之一。 展开更多

关键词 死亡受体5 单克隆抗体 凋亡 线粒体

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去黏附化增强抗DR5抗体介导食管癌细胞凋亡及其作用机制 被引量：1

9

作者 刘广超 马远方 +3 位作者 都景芳 张军 李淑莲 白慧玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期961-963,共3页

目的:探讨去黏附化对抗死亡受体5(DR5)抗体诱导的食管癌鳞癌EC9706细胞系凋亡的影响及作用机制。方法:用EDTA消化对蓝菌素A预处理或未处理的贴壁生长的食管癌细胞,制备悬浮细胞;利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达及人抗DR5功能... 目的:探讨去黏附化对抗死亡受体5(DR5)抗体诱导的食管癌鳞癌EC9706细胞系凋亡的影响及作用机制。方法:用EDTA消化对蓝菌素A预处理或未处理的贴壁生长的食管癌细胞,制备悬浮细胞;利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达及人抗DR5功能抗体诱导的细胞凋亡;利用免疫荧光技术观察食管癌EC9706细胞DR5表达分布。结果:悬浮食管癌细胞对抗DR5的功能性抗体诱导的细胞凋亡的敏感性明显高于铺展者;未经蓝菌素A预处理制备的悬浮食管癌细胞的表面DR5表达明显高于经蓝菌素A处理制备的悬浮者。在铺展的食管癌EC9706细胞,DR5分布于细胞质和细胞膜表面,主要在细胞质,在细胞核没有DR5分布,但在悬浮的食管癌细胞表面DR5表达明显增强。结论:去黏附化增强食管癌细胞对抗DR5功能性抗体诱导细胞凋亡的敏感性,该作用是通过去黏附化增强DR5向细胞表面转运实现的,DR5的膜转运与高尔基体有关。该研究结果对进一步探讨DR5表达分布的机制以及TRAIL和DR5的功能性抗体的抗肿瘤临床应用有一定的指导意义。 展开更多

关键词 DR5 功能性抗体 TRAIL 细胞凋亡 细胞黏附

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抗人DR5单克隆抗体对白血病U937细胞凋亡的作用 被引量：1

10

作者 王靖 李淑莲 +3 位作者 马远方 刘广超 杜耀武 王雪银 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期417-420,共4页

目的:研究鼠抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)对白血病细胞U937的凋亡诱导作用。方法:光镜下观察mDRA-6作用后U937细胞的形态变化;流式细胞术检测U937细胞表面DR5表达率;MTT法检测mDRA-6对U937细胞生长的影响;An-nexinV-FITC/PI双染法流式细... 目的:研究鼠抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)对白血病细胞U937的凋亡诱导作用。方法:光镜下观察mDRA-6作用后U937细胞的形态变化;流式细胞术检测U937细胞表面DR5表达率;MTT法检测mDRA-6对U937细胞生长的影响;An-nexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳检测U937细胞DNA的片段化降解;JC-1单染流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位改变。结果:mDRA-6作用U937细胞后呈现典型的细胞凋亡特征;MTT法检测显示mDRA-6作用U937细胞24小时死亡率为61·09%,并呈时间、浓度依赖性;流式细胞仪检测显示10mg/L的mDRA-6作用4小时,U937细胞凋亡率为79·12%;琼脂糖凝胶电泳显示DNA呈现明显梯状带型;mDRA-6作用U937细胞后线粒体膜电位明显下降。结论:mDRA-6能够诱导白血病U937细胞凋亡,是具有诱导细胞凋亡活性的功能性抗体。 展开更多

关键词 DR5 单克隆抗体 白血病细胞 凋亡

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抗人DR5抗体mDRA-6诱导EC109细胞自噬和凋亡 被引量：1

11

作者 贾彩云 赵粤萍 +1 位作者 刘广超 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期303-306,322,共5页

目的：探讨鼠抗人D1L5单克隆抗体（mAb）mDRA-6对ECl09细胞自噬和凋亡诱导作用。方法：MTY法检测mDRA-6细胞毒性；MDC染色和Hoechst33258染色，观察mDRA-6诱导细胞自噬、凋亡形态学变化；流式细胞术定量分析mDRA-6诱导细胞自噬率和凋亡... 目的：探讨鼠抗人D1L5单克隆抗体（mAb）mDRA-6对ECl09细胞自噬和凋亡诱导作用。方法：MTY法检测mDRA-6细胞毒性；MDC染色和Hoechst33258染色，观察mDRA-6诱导细胞自噬、凋亡形态学变化；流式细胞术定量分析mDRA-6诱导细胞自噬率和凋亡率。结果：mDRA-6具有细胞毒性，0．024～25mg／LmDRA-6作用细胞呈时间剂量依赖性．各组间差异具有统计学意义（P〈0．01），10h的IC50值为0．78mg／L；经mDRA-6处理ECl09细胞出现核固缩、染色质边缘化和形成凋亡小体等；同时细胞浆中出现自噬体；流式细胞术测定结果显示，2．0mg／LmDRA-6作用细胞10h，细胞自噬率和凋亡率分别为19．44％和54．88％。结论：mDRA-6可引起ECl09细胞自噬和凋亡；mDRA-6通过诱导ECl09细胞自噬和凋亡抑制细胞生长。 展开更多

关键词 抗DR5单克隆抗体(mDRA6) EC109细胞 自噬 凋亡

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mDRA-6与尼美舒利对Jurkat细胞的杀伤效应

12

作者 刘英杰 马远方 +4 位作者 张军 赵粤萍 李淑莲 刘广超 白慧玲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期522-525,共4页

目的:探讨mDRA-6与尼美舒利对Jurkat细胞有无杀伤作用及二者有无协同效应。方法:常规培养Jurkat细胞,流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率,MTT法检测细胞毒性作用,Hoechst33258染色观察Jurkat细胞核形态变化,流式细胞术定量分析凋亡细胞... 目的:探讨mDRA-6与尼美舒利对Jurkat细胞有无杀伤作用及二者有无协同效应。方法:常规培养Jurkat细胞,流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率,MTT法检测细胞毒性作用,Hoechst33258染色观察Jurkat细胞核形态变化,流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果:①Jurkat细胞表面DR5的表达率为84.83%。②mDRA-6与尼美舒利均能杀伤Jurkat细胞,存在浓度依赖性。400μmol/L的尼美舒利作用细胞10小时,细胞凋亡率为11.51%;0.5ng/ml与1ng/ml的mDRA-6作用细胞10小时,细胞凋亡率分别为3.67%和6.3%;③二者联合具有较好的协同促凋亡作用,400μmol/L的尼美舒利联合0.5ng/ml与1ng/ml的mDRA-6作用细胞10小时,细胞凋亡率分别为50.38%和63.79%。结论:mDRA-6与尼美舒利均有杀伤Jurkat细胞的作用,二者具有较强的协同作用,杀伤作用是通过诱导凋亡实现的。 展开更多

关键词 抗人DR5单克隆抗体 MDRA-6 尼美舒利 凋亡 JURKAT细胞

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人精子膜抗原的制备及其在人精子抗体检测中的应用 被引量：3

13

作者 黄红莹 马远方 +1 位作者 刘广超 许国强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期772-773,共2页

关键词 人精子膜抗原 制备方法 人精子抗体检测 胶体金免疫渗滤法

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可溶性死亡受体5在化疗前后肺癌患者外周血中的检测 被引量：1

14

作者 朱诗白 杨永杰 +3 位作者 刘瑞敏 张爱红 孙颍川 白慧玲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1028-1031,共4页

目的:探讨正常人群外周血清中sDR5及与肺癌患者的差异。方法:采用ELISA夹心法检测106例正常人群、79例肺癌患者与肺癌化疗以后血清中死亡受体5的含量,并运用SPSS软件对其结果进行统计学分析。结果:正常人群外周血清中sDR5平均值为(6.25&... 目的:探讨正常人群外周血清中sDR5及与肺癌患者的差异。方法:采用ELISA夹心法检测106例正常人群、79例肺癌患者与肺癌化疗以后血清中死亡受体5的含量,并运用SPSS软件对其结果进行统计学分析。结果:正常人群外周血清中sDR5平均值为(6.25±3.09)μg/L,肺癌患者的sDR5含量为(53.91±13.42)μg/ml明显高于正常人群,P<0.001。肺癌病人化疗后外周血sDR5水平为(23.99±14.23)μg/ml较治疗前明显下降,P<0.001。结论:外周血中sDR5的消退水平有可能与肿瘤病人发病、发展及预后密切相关。 展开更多

关键词 死亡受体5 夹心ELISA 肺癌

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新型抗ErbB2、抗CD16三价双特异性抗体的构建及功能鉴定

15

作者 陆寒 解志刚 +6 位作者 王明丽 施明 胡美茹 于鸣 马远方 沈倍奋 郭宁 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期489-495,共7页

目的构建一种新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb。方法构建重组载体pET22b(+)/BsAb;转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组蛋白的表达,通过包涵体复性纯化蛋白。应用悬浮培养系统扩增稳定表达抗人CD16 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株(CG5细胞)和稳定... 目的构建一种新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb。方法构建重组载体pET22b(+)/BsAb;转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组蛋白的表达,通过包涵体复性纯化蛋白。应用悬浮培养系统扩增稳定表达抗人CD16 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株(CG5细胞)和稳定表达抗人ErbB2 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株(HG2细胞),通过rProtein A Sepharose Fast Flow亲和层析柱纯化融合蛋白,应用流式细胞术分析BsAb的结合能力。结果该BsAb可在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式高效表达,通过对重组蛋白的复性可获得高纯度的蛋白;复性后的BsAb具有与其亲本抗体相似性的结合靶抗原的能力。结论新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb能与高表达ErbB2的乳腺癌细胞系SKBR3细胞高亲和力结合和表达CD16的人外周血单个核细胞低亲和力结合。 展开更多

关键词 双特异性抗体 ERBB2 CD16 肿瘤免疫治疗

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