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Fbxw7在急性T淋巴细胞白血病中的表达及其对细胞生长的抑制作用 被引量:1
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作者 黄文强 胡松元 +3 位作者 靳松 龙思方 邹路红 严匡华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期257-262,共6页
目的:观察F框/WD40域蛋白7(Fbxw7)在急性T淋巴细胞白血病中的表达,探讨其对细胞生长的影响及其机制。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测62例急性T淋巴细胞白血病患者中的Fbxw7 mRNA表达情况,将携带Fbxw7的过表达慢病毒载体转至... 目的:观察F框/WD40域蛋白7(Fbxw7)在急性T淋巴细胞白血病中的表达,探讨其对细胞生长的影响及其机制。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测62例急性T淋巴细胞白血病患者中的Fbxw7 mRNA表达情况,将携带Fbxw7的过表达慢病毒载体转至白血病Jurkat细胞后,采用RT-PCR和Western blot检测其转染效果,MTT法检测Jurkat细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡情况,Western blot检测c-Myc蛋白和周期蛋白E(Cyclin E)的表达。结果:急性T淋巴细胞白血病复发组患者和初发组患者中Fbxw7 mRNA表达水平较正常健康人明显降低(P<0.05);病毒转染后,Fbxw7组(转染携带Fbxw7过表达慢病毒载体)中Fbxw7 mRNA和蛋白质的相对表达水平较对照组(未转染的细胞)、阴性组(转染对照慢病毒载体)明显升高(P<0.05);转染24 h后,细胞增殖受影响不明显(P>0.05),而转染48 h和72 h后,细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);转染48 h后,与对照组相比,Fbxw7组Jurka细胞中G0/G1期细胞所占比例和细胞凋亡率明显升高,S期和G2/M期细胞所占百分比、c-Myc和Cyclin E蛋白的相对表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Fbxw7在急性T淋巴细胞白血病中低表达,上调其表达可抑制白血病Jurkat细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调c-Myc和Cyclin E蛋白表达有关。 展开更多
关键词 急性T淋巴细胞白血病 Fbxw7 细胞生长 抑制作用
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下调miR-21抑制PI3K/AKT信号通路对白血病细胞增殖凋亡的影响 被引量:20
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作者 严匡华 陈龙 严风梦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期441-445,共5页
目的:探讨miR-21对白血病K562细胞增殖凋亡的影响及对PI3K/AKT信号通路的调控作用。方法:将K562细胞分为对照组、miR-21 NC组和miR-21干扰组,对照组不做处理,后两组采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000转染miR-21 inhibitor和miR-21 ne... 目的:探讨miR-21对白血病K562细胞增殖凋亡的影响及对PI3K/AKT信号通路的调控作用。方法:将K562细胞分为对照组、miR-21 NC组和miR-21干扰组,对照组不做处理,后两组采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000转染miR-21 inhibitor和miR-21 negative control。转染48 h后,利用实时荧光定量(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-21 mRNA的表达情况,采用MTT比色法检测miR-21对细胞增殖率的影响,流式细胞仪检测miR-21对细胞周期和凋亡率的影响,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测miR-21对各组细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、AKT和p-AKT表达的影响。结果:miR-21干扰组中细胞的miR-21 mRNA表达水平和细胞的存活率较对照组和miR-21 NC组均明显降低;与对照组和miR-21 NC组比较,流式细胞仪检测miR-3干扰组中G0/G1期所占细胞比例明显升高,S期细胞所占比例明显下降,细胞的凋亡率明显升高。Western blot检测p-AKT的表达水平较对照组和miR-21 NC组明显下降,但PI3K和AKT蛋白的表达水平变化不大。结论:下调miR-21能够抑制白血病K562细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可以与抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 MIR-21 白血病 细胞增殖 细胞凋亡 PI3K/AKT信号通路
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