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iTRAQ联用串联质谱鉴定食管鳞状细胞癌差异表达蛋白质及蛋白质相互作用网络 被引量:3
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作者 赵云岗 张天 +9 位作者 谷娟 王广超 向慧妮 刘瑞敏 晁玮霞 贾彩云 韩大正 杨文义 马远方 齐义军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期85-92,共8页
基于质谱的蛋白质组学结果不仅具有重复性差和覆盖率低等缺陷,并且针对数十至百个差异表达蛋白质分子的分析非常具有挑战性,而蛋白质与蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction network,PPIN)分析能够在一定程度上弥补上述不足... 基于质谱的蛋白质组学结果不仅具有重复性差和覆盖率低等缺陷,并且针对数十至百个差异表达蛋白质分子的分析非常具有挑战性,而蛋白质与蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction network,PPIN)分析能够在一定程度上弥补上述不足,使各种组学研究结果具有一致性和可比性。本研究应用同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)联用串联质谱技术鉴定了与食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)相关的差异表达蛋白质244个(ESCC中,升高和降低的蛋白质分别为119个和125个),基因本体论(gene ontology,GO)富集与肿瘤十大特征相关的17个GO条目;以该17个条目包含的117个蛋白质为种子蛋白搜索STRING(http://www.string-db.org)数据库,构建包含96个存在相互作用的PPIN和21个离散蛋白质。用Cyto Hubba算法确定34个中心节点蛋白质和36个瓶颈蛋白质,非重复49个中心节点和/或瓶颈蛋白质中含7个目前已报道的癌基因表达蛋白(PPP2R1A、CTNNB1、ENO1、EZR、TPM4、COL1A1、TPM3),确定与该7个癌蛋白直接相互作用的4个蛋白质(FN1、ITGB1、TAGLN和YWHAZ)可能为参与食管癌变的关键蛋白质,并应用Western印迹实验验证了FN1、ITGB1、TAGLN和YWHAZ等4个关键蛋白质在ESCC中具有显著的表达差异,表明PPIN分析是确定具有重要生物学意义分子的有效途经之一。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ) 蛋白质-蛋白质相互作用网络 中心节点蛋白质 瓶颈蛋白质
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复方珍珠虫草胶囊治疗慢性乙型肝炎75例
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作者 韩大正 刘春霞 王运杰 《医药导报》 CAS 2003年第4期240-241,共2页
目的 :观察复方珍珠虫草胶囊治疗慢性乙型肝炎 (乙肝 )肝纤维化的疗效。方法 :将 12 4例慢性乙肝患者分为两组 ,治疗组 75例 ,对照组 49例。治疗组服用复方珍珠虫草胶囊每次 4粒 ,bid ;对照组服用乙肝宁冲剂 6g ,tid。疗程均为 6个月。... 目的 :观察复方珍珠虫草胶囊治疗慢性乙型肝炎 (乙肝 )肝纤维化的疗效。方法 :将 12 4例慢性乙肝患者分为两组 ,治疗组 75例 ,对照组 49例。治疗组服用复方珍珠虫草胶囊每次 4粒 ,bid ;对照组服用乙肝宁冲剂 6g ,tid。疗程均为 6个月。观察临床症状、肝功能、肝脏病理组织学及血清 4项纤维化指标变化情况。结果 :治疗组临床症状明显改善率及ALT复常率分别为 64 .3 %和 91.0 % ,对照组分别为 3 4.2 %和 2 0 .1% (P <0 .0 5 ) ;4项纤维化指标治疗组均显著降低 (P <0 .0 1) ,对照组无显著改善 (P >0 .0 5 ) ;肝脏组织学方面 ,治疗组炎症及纤维化均获显著改善 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,对照组无显著改善。结论 :复方珍珠虫草胶囊可使慢性乙肝炎症改善 ,纤维化程度减轻 。 展开更多
关键词 复方珍珠虫草胶囊 慢性乙型肝炎 纤维化 中医药治疗
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TGF-β通过TAGLN2诱导食管鳞癌EC9706细胞迁移和浸润 被引量:1
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作者 谷娟 赵云岗 +8 位作者 晁玮霞 韩大正 杨文义 刘瑞敏 贾彩云 郭二涛 崔纪丽 马远方 齐义军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期312-318,共7页
上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)使上皮细胞极性和细胞间紧密连接消失,并赋予肿瘤细胞侵袭和转移的能力。本研究应用携带TAGLN2特异性沉默序列或无关序列的慢病毒载体感染食管鳞癌细胞系EC9706,建立EC9706 sh TA... 上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)使上皮细胞极性和细胞间紧密连接消失,并赋予肿瘤细胞侵袭和转移的能力。本研究应用携带TAGLN2特异性沉默序列或无关序列的慢病毒载体感染食管鳞癌细胞系EC9706,建立EC9706 sh TAGLN2及阴性对照EC9706 sh Control亚细胞系。以5~80 ng/m L不同浓度或40 ng/m L TGF-β刺激EC9706 sh TAGLN2和EC9706sh Control细胞,发现与EC9706 sh Control细胞比较,EC9706 sh TAGLN2细胞中TAGLN2的表达无明显增加,同时TGF-β诱导的间质标志物如N-cadherin、Vimentin等蛋白质表达无明显升高;上皮标志物如E-cadherin表达无明显降低;TAGLN2的沉默不仅阻断了TGF-β诱导EC9706 sh TAGLN2细胞体外迁移和侵袭能力的增加,并抑制TGF-β信号通路下游分子p-Smad2/3的激活。本研究结果提示,TGF-β可能通过TAGLN2促进食管鳞癌的恶性演进,TAGLN2是潜在的食管鳞癌治疗的分子靶点之一。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 TGF-Β TAGLN2 上皮间质转化 侵袭 转移
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巨噬细胞外泌体lncRNA HULC对肝癌细胞迁移、侵袭和转移的影响及其机制 被引量:4
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作者 董勇 徐菱遥 +6 位作者 华静 梁晗 刘东亚 赵俊波 孙正路 程序 魏书堂 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1217-1226,共10页
目的:探讨巨噬细胞外泌体长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)在肝细胞癌(HCC)转移中的作用,并阐明其作用机制。方法:分离小鼠骨髓单核细胞,采用佛波酯诱导分化为骨髓源巨噬细胞(BMDM),并用白细胞介素4(IL-4)将BMDM诱导分化为M... 目的:探讨巨噬细胞外泌体长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)在肝细胞癌(HCC)转移中的作用,并阐明其作用机制。方法:分离小鼠骨髓单核细胞,采用佛波酯诱导分化为骨髓源巨噬细胞(BMDM),并用白细胞介素4(IL-4)将BMDM诱导分化为M2巨噬细胞,即肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。差速离心法收集M2巨噬细胞外泌体(TAM-exos)。在TAM中分别转染lncRNA HULC-siRNA或NC质粒后提取各组TAM分泌的外泌体(lncRNA HULC-siRNA-exos或NC-exos)。将HepG2细胞按照实验目的分为对照组和TAM-exos组;NC-exos组和lncRNA HULCsiRNA-exos组;lncRNA HULC-siRNA-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos+SKL2001组。给予相应处理后,Transwell小室实验检测HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数,实时荧光定量PCR(RTqPCR)法检测HepG2细胞中lncRNAHULC表达水平,Westernblotting法检测HepG2细胞中Wnt3A、β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平。构建裸鼠原位肝癌移植模型,分为对照组、NC-exos组、TAM-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos组,检测M2巨噬细胞外泌体lncRNA HULC作用后裸鼠原位移植瘤肺转移灶数。结果:TAM-exos符合外泌体的形态和生物学特征。与对照组比较,TAM-exos组HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数及细胞中lncRNA HULC、Wnt3A、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与NC-exos组比较,lncRNA HULC-siRNA-exos组HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数及细胞中lncRNA HULC、Wnt3A、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平降低(P<0.05)。与lncRNA HULC-siRNA-exos组比较,lncRNA HULC-siRNA-exos+SKL2001组HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数及细胞中Wnt3A、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.05)。裸鼠实验,M2巨噬细胞外泌体lncRNA HULC作用后,TAM-exos组裸鼠原位移植瘤肺转移灶数较对照组增多(P<0.05);M2巨噬细胞外泌体lncRNA HULC作用后,lncRNA HULC-siRNA-exos组裸鼠原位移植瘤肺转移灶数较TAM-exos组和NCexos组减少(P<0.05)。结论:TAM外泌体lncRNA HULC具有促进HCC细胞侵袭和转移的作用,其作用机制可能与激活Wnt信号通路有关。 展开更多
关键词 肝细胞肿瘤 外泌体 肿瘤相关巨噬细胞 细胞迁移 细胞侵袭
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