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CXCR4在溃疡性结肠炎小鼠蛋白C系统变化中的作用 被引量:5
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作者 林旭红 王丹丹 +2 位作者 王慧超 李玉霞 杨瑞林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1854-1862,共9页
目的:蛋白C系统(PCS)是血管内皮功能重要的介导者,而微血管内皮细胞是参与溃疡性结肠炎(UC)最重要的非免疫细胞,本研究旨在探讨趋化因子受体CXCR4在UC病理过程中PCS变化的作用。方法:动物实验分为对照组和UC模型组,进行大体积分、组织... 目的:蛋白C系统(PCS)是血管内皮功能重要的介导者,而微血管内皮细胞是参与溃疡性结肠炎(UC)最重要的非免疫细胞,本研究旨在探讨趋化因子受体CXCR4在UC病理过程中PCS变化的作用。方法:动物实验分为对照组和UC模型组,进行大体积分、组织病理学积分及溃疡指数评估;测定各组结肠组织和血浆中髓过氧化物酶(MPO)、环氧合酶-2(COX-2)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA水平及活性;检测各组结肠CXCR4、β-arrestin、p-JNK、内皮细胞蛋白C受体(EPCR)和血栓调节蛋白(TM)的水平及分布;观察蛋白C(PC)和蛋白S(PS)的活性。分离、培养、鉴定结肠微血管内皮细胞,分为对照组、SDF-1α组、CXCR4沉默组和CXCR4过表达组,观察各组细胞EPCR、TM、β-arrestin和p-JNK的蛋白水平,以及PC、PS和激活的蛋白C(APC)活性。结果:与对照组比,模型组小鼠大体积分、组织病理学积分及溃疡指数升高(P<0.05)。结肠组织和血浆MPO、COX-2、SDF-1α和MCP-1 mRNA水平和活性显著升高(P<0.01)。结肠组织CXCR4、β-arrestin和p-JNK的蛋白水平上调,EPCR表达下调,血浆PC和PS活性明显降低(P<0.05或P<0.01)。CXCR4过表达进一步加重SDF-1α对结肠黏膜微血管内皮细胞PCS的抑制,同时进一步升高β-arrestin和p-JNK的蛋白水平(P<0.05)。结论:UC时PCS被抑制,CXCR4参与其中,其可能的机制是CXCR4在UC病理过程中介导趋化因子通过β-arrestin-JNK信号通路进一步影响血管内皮细胞功能,从而抑制PCS。 展开更多
关键词 CXCR4 溃疡性结肠炎 蛋白C系统 血栓形成
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ATP介导的嘌呤能信号在阿尔茨海默病相关结肠运动障碍中的作用 被引量:3
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作者 林旭红 王慧超 +7 位作者 郭俊玲 房晓鹏 张俊士 郭俊楠 李玉霞 杨瑞林 李铁军 刘建林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2113-2124,共12页
目的:探讨ATP介导的嘌呤能信号在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)相关结肠运动障碍中的作用及其相关的分子机制。方法:(1)临床试验:收集我院20例AD患者进行研究,放射免疫法测定血浆中胃动素(motilin,MTL)、胆囊收缩素(... 目的:探讨ATP介导的嘌呤能信号在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)相关结肠运动障碍中的作用及其相关的分子机制。方法:(1)临床试验:收集我院20例AD患者进行研究,放射免疫法测定血浆中胃动素(motilin,MTL)、胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)和一氧化氮(nitric oxide,NO)水平;高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测血浆三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平,同时对患者进行神经心理学检查并积分。(2)动物实验:利用AD小鼠进行Morris水迷宫实验,评估空间学习记忆功能;放射免疫法测定血浆中MTL、CCK、VIP和NO水平,HPLC法检测血浆ATP水平;免疫组织化学法检测乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)、VIP、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和ATP合酶的变化;Western blot和免疫组化法检测P2Y受体表达水平的变化。(3)离体实验:离体器官浴槽系统观察P2Y受体激动剂α,β-亚甲基ATP(α,β-methylene ATP,α,β-MeATP)对自发性及电刺激诱导的结肠平滑肌收缩的影响,细胞内微电极技术观察α,β-MeATP对结肠平滑肌细胞膜电位的影响。结果:与对照组比较,AD患者血浆的MTL和CCK水平明显降低(P〈0.01),NO和ATP水平显著升高(P〈0.05或P〈0.01),VIP无明显变化。患者简明精神状态检查积分(MMSE)降低(P〈0.05),AD评定量表-认知分量表(ADAS-Cog)积分、神经精神问卷(NPI)积分和AD协作研究日常能力量表(ADCS-ADL)积分均明显高于对照组(P〈0.01)。AD小鼠4-6 d逃逸潜伏期明显延长(P〈0.05),空间探索能力明显降低(P〈0.05),AD小鼠血浆中MTL和CCK水平明显降低(P〈0.01),NO和ATP水平显著升高(P〈0.05或P〈0.01),VIP无明显变化,AD小鼠结肠表达ATP合酶的水平明显上调(P〈0.05),但ChAT、VIP和NOS无明显改变,同时P2Y受体表达水平升高(P〈0.01)。体外实验表明,α,β-MeATP呈浓度依赖性抑制对照组和AD组小鼠结肠平滑肌自发性收缩(P〈0.05或P〈0.01),且这种抑制作用可被Na+通道阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)逆转(P〈0.05或P〈0.01),α,β-MeATP在100μmol/L时对AD小鼠自发性收缩的抑制作用更明显(P〈0.05),AD小鼠与正常小鼠比较,TTX对100μmol/L的α,β-MeATP的拮抗作用差异也有统计学显著性(P〈0.05)。在10 Hz电刺激诱导的结肠平滑肌收缩中,α,β-MeATP抑制正常小鼠和AD组小鼠的收缩(P〈0.05或P〈0.01),且40μmol/L和100μmol/L时对AD小鼠的抑制作用比正常小鼠明显(P〈0.05或P〈0.01)。平滑肌细胞膜电位实验显示,α,β-MeATP不影响结肠平滑肌膜电位(P〉0.05)。结论:AD患者和AD小鼠血浆中促进胃肠运动的激素MTL和CCK水平降低,抑制胃肠运动的激素NO水平升高,胃肠总体运动功能被抑制;AD小鼠血浆ATP水平升高,同时ATP嘌呤能神经元增加,P2Y受体表达上调;在AD发病中,ATP介导的嘌呤能信号可能通过抑制结肠平滑肌收缩,从而导致结肠运动功能障碍。 展开更多
关键词 P2Y受体 阿尔茨海默病 肠神经系统 结肠运动障碍
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溃疡性结肠炎患者肠道菌群的变化及其与IL-23/IL-17轴的关系 被引量:56
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作者 马旭园 代志峰 +7 位作者 王慧超 杨静楠 唐向阳 康玉华 丁春生 李玉霞 杨瑞林 林旭红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期884-892,共9页
目的:探讨溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群分布和种类的变化及其与白细胞介素23(IL-23)/IL-17轴的关系。方法 :收集20例UC活动期患者和20例健康对照者的新鲜粪便标本,采用直接涂片镜检和传统细菌培养鉴定法分析菌群分布;利用real-time PC... 目的:探讨溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群分布和种类的变化及其与白细胞介素23(IL-23)/IL-17轴的关系。方法 :收集20例UC活动期患者和20例健康对照者的新鲜粪便标本,采用直接涂片镜检和传统细菌培养鉴定法分析菌群分布;利用real-time PCR检测菌群种类的变化;常规检测血红蛋白、白蛋白、血沉和C反应蛋白水平;经结肠镜活检取UC患者正常及病变肠黏膜组织,进行Mayo评分和Baron分级,HE染色观察组织病理变化;免疫组化及Western Blot观察IL-17和IL-23表达的改变。结果:(1)与对照组比,活动期UC患者菌群失调程度明显升高(P<0.05);(2)需氧培养结果表明,活动期UC患者的大肠杆菌数量较正常人显著降低(P<0.01),肠球菌数量明显增加(P<0.01);厌氧培养结果发现,活动期UC患者的拟杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量较正常人显著减少(P<0.01);(3)目标菌属定量分析表明,UC患者粪便中大肠杆菌、拟杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌相对定量较正常人显著降低,肠球菌数量明显升高(P<0.01);(4)与对照组相比,UC患者血红蛋白无明显改变,白蛋白明显降低(P<0.05),血沉和C反应蛋白明显增高(P<0.01);(5)UC患者Mayo评分显著升高(P<0.01),Baron分级显著增加(P<0.01),结肠组织病理改变明显(P<0.01);(6)与对照组比较,UC患者表达丰富的IL-17和IL-23(P<0.01);(7)相关性分析表明,IL-17和IL-23表达的平均吸光度与Baron分级(r=0.717,P=0.02;r=0.849,P=0.016)和病理组织学评分(r=0.660,P=0.030;r=0.675,P=0.032)呈正相关;同时,IL-23表达的平均吸光度与大肠杆菌数量呈明显负相关(r=-0.669,P=0.025),与肠球菌数量呈正相关(r=0.872,P=0.010),IL-17表达的平均灰度值与肠球菌数量呈正相关(r=0.764,P=0.046),但二者与其它目标菌属的数量无明显相关性。结论:活动期UC患者存在明显的肠道菌群失调,改变的细菌与患者炎症程度密切相关。IL-23/IL-17轴作为UC发生发展的关键因子,与肠道菌群含量的变化可能存在一定关联,其相互作用在UC的病理过程中起到重要作用。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 菌群失调 白细胞介素23 白细胞介素17
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粪便菌群移植在慢性乙肝治疗中的作用及机制 被引量:8
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作者 魏琦 杨静楠 +6 位作者 何学良 何巧灵 司会方 胡鸿 白春洋 王慧超 林旭红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1833-1843,共11页
目的:研究粪便菌群移植(FMT)在慢性乙型肝炎(CHB)中的作用及其机制。方法:取50只6~8周龄的C57BL/6J小鼠随机分为对照组、CHB组、恩替卡韦(ETV)组、综合治疗(ETV+FMT,EFMT)组和阻断剂(TAK-242+ETV+FMT,EFMT-TAK)组,每组10只,各组给予相... 目的:研究粪便菌群移植(FMT)在慢性乙型肝炎(CHB)中的作用及其机制。方法:取50只6~8周龄的C57BL/6J小鼠随机分为对照组、CHB组、恩替卡韦(ETV)组、综合治疗(ETV+FMT,EFMT)组和阻断剂(TAK-242+ETV+FMT,EFMT-TAK)组,每组10只,各组给予相应处理。每日观察小鼠一般情况,每隔10 d留取5组小鼠粪便标本,12周后处死小鼠,取小鼠肝脏组织及血液标本。采用HE染色观察组织学损伤并评分,ELISA法检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和白细胞介素18(IL-18)水平,流式细胞术检测Toll样受体4(TLR4)的表达,高通量测序进行肠道菌群多样性分析。结果:(1)与对照组相比,CHB组小鼠体重显著减轻(P<0.05),ETV组、EFMT组及EFMT-TAK组小鼠体重与CHB组比较有不同程度的回升(P<0.05)。(2)CHB组小鼠组织学评分较对照组显著升高(P<0.05),ETV组评分较CHB组降低(P<0.05),EFMT组及EFMT-TAK组评分均较ETV组降低更显著(P<0.05),EFMT-TAK组比EFMT组有进一步降低的趋势(P<0.05)。(3)与对照组比较,CHB组小鼠血清HBsAg水平显著升高(P<0.05),经过ETV治疗后下降(P<0.05),EFMT组及EFMT-TAK组均比ETV组降低更为显著(P<0.05)。(4)CHB组较对照组的IL-18水平显著升高(P<0.05),ETV组的IL-18水平比CHB组下降(P<0.05),EFMT组及EFMT-TAK组均较ETV组下降更显著(P<0.05)。(5)CHB组的TLR4表达水平较对照组升高(P<0.05),ETV组较CHB组降低(P<0.05),EFMT组进一步下降(P<0.05)。(6)纲水平的热图分析表明,CHB组小鼠肠道中γ-变形菌(Gammaproteo⁃bacteria)、δ-变形菌(Deltaproteobacteria)和Negativicutes丰度显著高于对照组,而脱铁杆菌(Deferribacteres)和Sac⁃charimonadia含量均较对照组减少;EFMT组Deltaproteobacteria和Negativicutes丰度与对照组更为接近。科水平的热图分析表明,CHB组伯克氏菌科(Burkholderiaceae)、脱硫弧菌科(Desulfovibrionaceae)和韦荣氏菌科(Veillonellace⁃ae)丰度显著高于对照组,而ETV组及EFMT组上述菌群均逐渐接近正常。CHB组的α多样性指数较对照组显著下降,ETV组多样性回升,EFMT组进一步增高,而EFMT-TAK组的多样性则最高。结论:FMT在CHB的治疗中发挥积极作用,其机制可能与降低IL-18水平、改善肠道菌群结构和多样性有关,TLR4信号通路参与其中。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 粪便菌群移植 白细胞介素18 TOLL样受体4
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