三氮唑席夫碱衍生物对人肝癌细胞分化和凋亡的影响 被引量：6

1

作者 皇甫超申 马永超 +4 位作者 房娜 康玉华 胡国强 杨锐生 刘彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期498-503,共6页

目的探讨三氮唑席夫碱衍生物对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化和凋亡作用。方法用不同剂量的3-吡啶-3-基-4[（4-羟基-3-甲氧基-苯亚甲基）氨基]-5-甲硫基-1，2，4-三唑（LH-37）与BEL-7402细胞共同培养，以MTT法检测细胞增殖和LH-37对细... 目的探讨三氮唑席夫碱衍生物对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化和凋亡作用。方法用不同剂量的3-吡啶-3-基-4[（4-羟基-3-甲氧基-苯亚甲基）氨基]-5-甲硫基-1，2，4-三唑（LH-37）与BEL-7402细胞共同培养，以MTT法检测细胞增殖和LH-37对细胞增殖的抑制作用；RT-PCR方法检测细胞甲胎蛋白（α-FP）和白蛋白（Alb）mRNA表达；ELISA法测定细胞仅．FP含量；免疫组织化学检测细胞内激活型Caspase-3表达；Westernblot检测Caspase-3和Caspase-9蛋白表达；可见光法测定超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活力；荧光显微镜观察凋亡细胞形态；Annexin—V和PI双染流式细胞术测定凋亡细胞数。结果LH-37在10μmol·L^-1mmol·L^-1的浓度范围能抑制细胞增殖，且抑制率随浓度的增加而增高（P〈0．05或P〈0．01），10μmol·L^-1和1．0μmol·L^-1的LH-37使细胞AlbmRNA表达量增高，α-FPmRNA和蛋白质表达量明显下降，Caspase-3和Caspase-9表达量明显增加，Caspase-3阳性细胞明显增加；药物浓度达100μmol·L^-1作用48h后，BEL-7402细胞皱缩，呈现凋亡各期改变，细胞凋亡率高于对照组（P〈0．05）。结论三氮唑席夫碱衍生物对人肝癌BEL-7402细胞具有抗增殖、促分化和凋亡作用，作用可能与过氧化氢的氧化损伤作用有关。 展开更多

关键词 三氮唑席夫碱衍生物 肝细胞癌 细胞分化 细胞凋亡

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妊娠期接触酒精对子鼠视皮质神经元数量的影响 被引量：2

2

作者 蒋杞英 胡艳秋 +2 位作者 吴萍 程相树 邓锦波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期878-882,共5页

目的探讨酒精对C57BL/6小鼠胚胎发育和视皮质神经元数量的的影响。方法妊娠母鼠酒精灌胃直至小鼠出生;采用苏木精-伊红和Nissl染色法观察P0、P7和P14小鼠视皮质神经元密度(ND)和皮层的厚度(CCT)。结果酒精组出现死胎和畸形。晚期胚胎和... 目的探讨酒精对C57BL/6小鼠胚胎发育和视皮质神经元数量的的影响。方法妊娠母鼠酒精灌胃直至小鼠出生;采用苏木精-伊红和Nissl染色法观察P0、P7和P14小鼠视皮质神经元密度(ND)和皮层的厚度(CCT)。结果酒精组出现死胎和畸形。晚期胚胎和新生鼠发现多种畸形,如:小头畸形、无脑儿、脊柱脊髓裂等,畸形的出现率为12%。酒精组视皮质的发育明显滞后于对照组,皮质的分层和神经元的极性紊乱。在酒精实验组出现神经元的缺失。在各年龄组,酒精组视皮质神经元的密度均明显低于对照组(P<0.01),而酒精实验组应见皮质的厚度明显比对照组薄(P<0.01)。结论出生前酒精处理诱导视皮质神经元的缺失,此作用具有剂量依赖性和长时程性效应。 展开更多

关键词 酒精 胎儿酒精综合症 神经元密度 视皮质 小鼠

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高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及bcl-2蛋白表达的影响 被引量：1

3

作者 蒋杞英 胡艳秋 刘胜洪 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第4期733-735,共3页

目的:探讨高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及bcl2蛋白表达的影响。方法:选取健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组(10只)、缺血对照组(25只)及缺血再灌注加高压氧治疗组(HBO组,25只)。采用动脉线栓法制成大脑中动脉(M... 目的:探讨高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及bcl2蛋白表达的影响。方法:选取健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组(10只)、缺血对照组(25只)及缺血再灌注加高压氧治疗组(HBO组,25只)。采用动脉线栓法制成大脑中动脉(MCA)局灶性脑缺血再灌注模型。用四氮唑染色观察局灶性脑缺血再灌注后120h各组大鼠脑梗死灶的大小,应用TUNEL法及免疫组化方法检测缺血3h再灌注6h、24h、48h、72h、120h大鼠脑组织神经细胞凋亡及bcl2蛋白的表达。结果:假手术组未发现脑梗死灶,凋亡细胞及bcl2蛋白表达阴性。HBO组缺血再灌注后120h大鼠梗死灶体积(15.9±4.2)明显小于缺血对照组(26.8±4.9)(P<0.01);HBO组大鼠再灌注24h,48h,72h各时点凋亡指数均低于缺血对照组,bcl2蛋白表达均高于缺血对照组(P<0.05)。结论:脑缺血再灌注后凋亡细胞增多,bcl2蛋白表达增强,高压氧治疗可以上调bcl2蛋白的表达,抑制脑神经细胞凋亡,具有脑神经保护作用。 展开更多

关键词 高压氧 脑缺血 bcl-2 大鼠 梗死灶 凋亡

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炎性小体在阿尔茨海默病发病中作用的研究进展 被引量：2

4

作者 张丽丽 楚方旋 +1 位作者 邓锦波 王来 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期203-206,共4页

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种神经退行性疾病,严重威胁老年人的身体健康。近年研究发现,脑内炎性小体的活化参与该病的发生、发展过程。炎性小体作为一种大分子蛋白复合物,激活Caspase-1前体蛋白,导致炎性因子如IL-... 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种神经退行性疾病,严重威胁老年人的身体健康。近年研究发现,脑内炎性小体的活化参与该病的发生、发展过程。炎性小体作为一种大分子蛋白复合物,激活Caspase-1前体蛋白,导致炎性因子如IL-1β、IL-18等的成熟与释放,从而引起炎症反应。目前炎性小体与AD的关系仍需进一步研究,本文就炎性小体与AD的研究现状进行综述。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 炎性小体 白细胞介素

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孕期酒精暴露对子鼠海马神经元凋亡的影响

5

作者 胡艳秋 蒋杞英 +1 位作者 程相树 邓锦波 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第5期851-853,共3页

目的:研究孕期酒精暴露对子鼠海马神经元凋亡的影响。方法:采用健康C57BL/6J小鼠,用胃饲酒精法建立孕期酒精暴露模型。90只孕鼠随机分为3组:对照组、低剂量酒精组和高剂量酒精组。低、高剂量酒精组分别按2.0g/kg与4.0g/kg的剂量给予体... 目的:研究孕期酒精暴露对子鼠海马神经元凋亡的影响。方法:采用健康C57BL/6J小鼠,用胃饲酒精法建立孕期酒精暴露模型。90只孕鼠随机分为3组:对照组、低剂量酒精组和高剂量酒精组。低、高剂量酒精组分别按2.0g/kg与4.0g/kg的剂量给予体积分数为25%的乙醇,1次/d,直至子鼠出生,对照组自由饮食。3组取新生鼠、生后7d与生后14d的小鼠各10只,取海马组织进行caspase-3免疫组化染色,以观察海马神经元的凋亡。结果:低剂量酒精组和高剂量酒精组各年龄子鼠海马神经元caspase-3阳性率明显高于对照组(P<0.01);高剂量酒精组海马神经元caspase-3阳性率明显高于低剂量酒精组(P<0.01)。结论:孕期酒精暴露可激活发育期海马神经元caspase-3,诱发神经元凋亡,可能与出生子鼠智力障碍密切相关。 展开更多

关键词 酒精 海马 CASPASE-3 凋亡 小鼠

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SMS高表达对细胞内和培养基中SM水平的影响 被引量：3

6

作者 石渊渊 王玉兰 李志强 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1982-1985,共4页

为了研究神经鞘磷脂合成酶(SMS)活性与神经鞘磷脂(SM)代谢之间的关系,用SMS的同功酶(SMS1和SMS2)的表达载体(pCMV.sport 6-SMS1和pcDNA3.1-SMS2),瞬时转染HEK293细胞,通过薄层层析法测定神经鞘磷脂合成酶活性来检测SMS的表达水平,同时... 为了研究神经鞘磷脂合成酶(SMS)活性与神经鞘磷脂(SM)代谢之间的关系,用SMS的同功酶(SMS1和SMS2)的表达载体(pCMV.sport 6-SMS1和pcDNA3.1-SMS2),瞬时转染HEK293细胞,通过薄层层析法测定神经鞘磷脂合成酶活性来检测SMS的表达水平,同时测定细胞和培养基中的SM浓度.结果显示,用pCMV.sport 6-SMS1转染细胞后与对照组相比,SMS表达水平提高65%,细胞内和培养基中的SM水平显著性升高(58%和46%,p<0.01);转染pCDNA3.1-SMS2后与对照组相比,SMS表达水平提高13%,细胞内和培养基中的SM水平显著性升高(33%和29%,p<0.05).实验结果表明,SM水平可被SMS1和SMS2调节.由于SM是冠心病和动脉粥样硬化的独立危险因子,因此本文研究结果有可能为冠心病和动脉粥样硬化的治疗提供新的靶点. 展开更多

关键词 神经鞘磷脂 神经鞘磷脂合成酶 动脉粥样硬化 瞬时转染 薄层层析

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高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死灶及bcl-2蛋白表达的影响 被引量：8

7

作者 蒋杞英 霍本良 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期890-892,共3页

目的:探讨高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死灶及bcl-2蛋白表达的影响。方法:选取健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、缺血对照组及HBO组。采用大脑中动脉(MCA)阻断3h制成局灶性脑缺血模型。用1%四氮唑染色分别观察各组大鼠... 目的:探讨高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死灶及bcl-2蛋白表达的影响。方法:选取健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、缺血对照组及HBO组。采用大脑中动脉(MCA)阻断3h制成局灶性脑缺血模型。用1%四氮唑染色分别观察各组大鼠脑梗死灶的大小,应用免疫组化方法检测再灌注6h、24h、48h、72h、120h时间点大鼠脑组织bcl-2蛋白的表达。结果:假手术组未发现脑梗死灶及bcl-2蛋白表达阴性。HBO组120h大鼠梗死灶体积(15.9±4.2)%明显小于缺血对照组(26.8±4.9)%(P<0.05);再灌注各时相点缺血对照组和HBO组bcl-2蛋白的表达均显著高于假手术组(P<0.01);HBO组大鼠再灌注各时相点bcl-2表达均显著高于缺血对照组(P<0.01)。结论:脑缺血再灌注后bcl-2蛋白表达增强,高压氧治疗可以进一步上调bcl-2蛋白的表达,抑制脑神经细胞凋亡,具有脑神经保护作用。 展开更多

关键词 高压氧 脑缺血 bcl-2 大鼠 梗死灶

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双重引物PCR鉴定APPSWE转基因小鼠 被引量：2

8

作者 范文娟 程维杰 +2 位作者 牛艳丽 张维娟 邓锦波 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期84-86,共3页

本实验旨在探讨一种简单易行,能有效识别APPSWE转基因小鼠基因检测中假阴性结果的方法。在PCR体系中设计两对引物,一对为APP基因特异性引物,另一对为根据其内源性管家基因β-actin设置的参照引物。利用同一个PCR反应体系,对两对引物进... 本实验旨在探讨一种简单易行,能有效识别APPSWE转基因小鼠基因检测中假阴性结果的方法。在PCR体系中设计两对引物,一对为APP基因特异性引物,另一对为根据其内源性管家基因β-actin设置的参照引物。利用同一个PCR反应体系,对两对引物进行扩增。结果显示,双重引物PCR扩增的特异性片段与单引物扩增片段完全吻合,利用该法检出的转基因阳性率高于单引物PCR检出的转基因阳性率。本方法简单易行,能够有效识别以往利用单一PCR检测出现的假阴性结果,并且具有很好的特异性和灵敏性,值得在转基因小鼠鉴定实验中推广。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 转基因小鼠 双重PCR

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耐阿霉素人骨肉瘤细胞株的建立及其耐药机制探讨 被引量：2

9

作者 牛保华 王建军 席艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1103-1107,共5页

目的诱导并建立耐阿霉素(ADM)的人骨肉瘤细胞株并探讨其耐药机制。方法采用逐步增加药物剂量冲击诱导方法诱导人成骨肉瘤原代Saos-2细胞株;MTT法检测原代与耐药细胞株对ADM、顺铂(DDP)、甲氨蝶呤(MTX)、异环磷酰胺(IFO)、表柔比星(EPI)... 目的诱导并建立耐阿霉素(ADM)的人骨肉瘤细胞株并探讨其耐药机制。方法采用逐步增加药物剂量冲击诱导方法诱导人成骨肉瘤原代Saos-2细胞株;MTT法检测原代与耐药细胞株对ADM、顺铂(DDP)、甲氨蝶呤(MTX)、异环磷酰胺(IFO)、表柔比星(EPI)、比柔比星(THP)、紫杉醇(Paclitaxel,PTX)药物敏感性;利用光学显微镜、透射电镜观察细胞形态及超微结构变化;RT-PCR和IHC法分别检测多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)基因及其相应蛋白(P-gp)、MRP的表达。结果经167d的诱导,建立Saos-2/ADM1、Saos-2/ADM4细胞株,其对ADM的耐药指数分别为原代细胞株的49.8和74.6倍;耐药细胞株对MTX、EPI、THP、PTX亦产生不同程度的交叉耐药(P<0.05),对DDP仍然敏感(P>0.05);光镜观察Saos-2/ADM1、Saos-2/ADM4细胞株细胞体积增大,多核现象较原代Saos-2细胞株明显增加;透射电镜显示Saos-2/ADM1、Saos-2/ADM4细胞株表面突起较原代Saos-2细胞株减少、且核仁增大增多;细胞生长曲线显示耐药细胞株增殖能力下降。MDR1mRNA、MRPmRNA和P-gp、MRP在各耐药细胞株表达阳性。结论MDR1 mRNA、MRP mRNA及其相应蛋白参与了耐药细胞株耐药的形成,这些骨肉瘤耐药细胞株为进一步研究骨肉瘤耐药特征及逆转方法打下了基础。 展开更多

关键词 人骨肉瘤细胞 阿霉素 耐药性

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对甲氧基肉桂醛左氧氟沙星酰腙诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用 被引量：1

10

作者 付建民 王德辉 +4 位作者 孙金平 康玉华 皇甫超申 胡国强 刘彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期801-805,共5页

目的探讨喹诺酮酰腙类化合物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用。方法用不同浓度的对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙(FQ-10)与SMMC-7721细胞体外培养。MTT法检测FQ-10对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258/PI双染荧光染色法、TUNEL法... 目的探讨喹诺酮酰腙类化合物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用。方法用不同浓度的对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙(FQ-10)与SMMC-7721细胞体外培养。MTT法检测FQ-10对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258/PI双染荧光染色法、TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡变化;高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位(△ψm)变化;Western blot方法测定caspase-9、caspase-8、caspase-3、p53、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 FQ-10在0.625～10.00μmol.L-1的浓度范围能抑制细胞增殖,呈时间、浓度依赖性;作用于细胞24 h的IC50值是4.40μmol.L-1;各组FQ-10作用24 h后,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);琼脂糖凝胶电泳可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带,并伴有线粒体膜电位降低。荧光染色观察细胞形态学变化,显示凋亡细胞染色质凝集,细胞核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化,晚期凋亡细胞可见特异性PI染色。与对照组比较,FQ-10作用后p53、Bax、caspase-9、caspase-3蛋白表达量增加,其中caspase-9、caspase-3活性裂解片段明显增加,caspase-8无变化,而Bcl-2蛋白表达水平下降。结论对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙能够激活线粒体凋亡通路,诱导人肝癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 氟喹诺酮酰腙 肝癌细胞 细胞增殖 凋亡 线粒体膜电位 p53

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小鼠孕期酒精暴露可诱导仔鼠齿状回苔藓细胞的丢失 被引量：1

11

作者 王志新 邓同兴 +3 位作者 王敏丽 张勤安 邓锦波 高晓群 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期474-480,共7页

目的:探讨小鼠孕期酒精暴露对仔鼠齿状回苔藓细胞的影响,并进一步观察神经鞘磷脂合成酶2基因敲除(sphingomyelin synthase 2 knockout,SMS2-/-)与孕期酒精暴露和苔藓细胞丢失之间的关系。方法:采用PCR法对各分组仔鼠进行鉴定,利用SMS2-/... 目的:探讨小鼠孕期酒精暴露对仔鼠齿状回苔藓细胞的影响,并进一步观察神经鞘磷脂合成酶2基因敲除(sphingomyelin synthase 2 knockout,SMS2-/-)与孕期酒精暴露和苔藓细胞丢失之间的关系。方法:采用PCR法对各分组仔鼠进行鉴定,利用SMS2-/-小鼠建立孕期酒精暴露模型,收集P14仔鼠,进行水迷宫实验,观察仔鼠寻台时间;然后利用免疫荧光染色法观察各分组仔鼠齿状回苔藓细胞数量的变化,免疫印迹技术检测P14仔鼠海马组织GluR2/3蛋白的相对表达量。结果:(1)与对照组相比,酒精组仔鼠的寻台时间相对较长(P<0.05),而SMS2-/-组仔鼠的寻台时间与野生组无明显的差异(P>0.05);(2)酒精组仔鼠齿状回GluR2/3的阳性细胞数明显少于对照组(P<0.05),且SMS2基因敲除后,与野生组仔鼠相比,SMS2-/-组仔鼠齿状回GluR2/3的阳性细胞数无明显差异(P>0.05)。结论:(1)酒精可诱导齿状回苔藓细胞的丢失,且降低GluR2/3的阳性表达;(2)SMS2基因的敲除对酒精诱导苔藓细胞丢失的作用相对较小;(3)苔藓细胞的丢失在一定程度上降低近期记忆功能,酒精可促进记忆功能的恶化。 展开更多

关键词 苔藓细胞 酒精暴露 胎儿酒精综合症 神经鞘磷脂合成酶2基因敲除 水迷宫 小鼠

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苯甲醛左氧氟沙星席夫碱诱导人肝癌细胞凋亡作用 被引量：3

12

作者 霍菲 唐乃夫 +5 位作者 范媛媛 刘诗濛 张莹 梁红霞 胡国强 刘彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期821-826,共6页

目的研究苯甲醛左氧氟沙星席夫碱化合物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法用不同浓度的（S）-1,8-（2-甲基亚乙氧基）-6-氟-7-（4-甲基-哌嗪-1-基）-3-[S-苄基硫基-4-（对硝基苯甲叉基氨基）-1,2,4-均三唑-3-基]-喹啉（1-H）-4... 目的研究苯甲醛左氧氟沙星席夫碱化合物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法用不同浓度的（S）-1,8-（2-甲基亚乙氧基）-6-氟-7-（4-甲基-哌嗪-1-基）-3-[S-苄基硫基-4-（对硝基苯甲叉基氨基）-1,2,4-均三唑-3-基]-喹啉（1-H）-4-酮（M18）与SMMC-7721细胞、人乳腺癌细胞MB-231、人结肠癌细胞HCT-116、人肝癌细胞HEPG-2和小鼠骨髓间充质干细胞体外培养。MTT法检测M18对各种细胞的生长抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法、TUNEL法检测细胞凋亡变化;高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位（△ψm）变化;Western blot方法测定caspase-3、p53蛋白表达量的改变,以及细胞色素C在线粒体内外的分布。结果 M18在4-32μmol·L^-1的浓度范围内能明显抑制SMMC-7721细胞、MB-231细胞、HCT-116细胞、HEPG-2细胞增殖,呈浓度、时间依赖关系,作用于细胞24 h的IC50值分别为8.65、9.37、12.74和9.40μmol·L^-1;左氧氟沙星盐酸盐作用于SMMC-7721细胞24 h的IC50值为735.10μmol·L^-1,M18作用于骨髓间充质干细胞24 h的IC50值为38.96μmol·L^-1;不同浓度M18作用人肝癌SMMC-7721细胞24h,细胞凋亡率高于对照组（P〈0.05）。M18作用于SMMC-7721细胞后,细胞线粒体膜电位降低,与对照组相比差异有统计学意义;M18明显增加SMMC-7721细胞的p53和caspase-3蛋白表达量,其中caspase-3活性裂解片段增加明显;M18作用使细胞线粒体内细胞色素C明显减少,胞质内细胞色素C明显增加。结论苯甲醛左氧氟沙星席夫碱能够诱导人肝癌细胞凋亡,作用与线粒体凋亡通路有关。 展开更多

关键词 氟喹诺酮席夫碱 肝癌细胞 细胞增殖 凋亡 线粒体膜电位 p53

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