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致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响
被引量：
1
1
作者
娄强
谢盼盼
+2 位作者
崔秀坤
马远方
胡延忠
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期1699-1703,共5页
目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳...
目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳定表达Hsf4b/K65R突变质粒的细胞株;Western blotting检测Hsf4b在mLEC K65R点突变细胞株和野生株中的表达;Western blotting及real-time PCR检测K65R点突变后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表达的变化。结果:阳性克隆PCR及基因测序证明慢病毒载体pWZL-blast-HAHsf4b/K65R构建成功。K65R点突变后不影响Hsf4b在小鼠晶状体上皮细胞mLEC中的表达,但能影响下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表达。结论:pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R载体可用于慢病毒感染稳定细胞株构建。Hsf4b K65R位点突变能显著影响其对热休克蛋白的调控功能。
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关键词
热休克因子4b
晶状体上皮细胞
热休克蛋白
点突变
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题名
致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响
被引量：
1
1
作者
娄强
谢盼盼
崔秀坤
马远方
胡延忠
机构
河南大学医学院医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期1699-1703,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.U1404826)
河南省教育厅项目(No.14B310015)
河南大学基本科研业务费科研专项(青年科研人才种子基金)
文摘
目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳定表达Hsf4b/K65R突变质粒的细胞株;Western blotting检测Hsf4b在mLEC K65R点突变细胞株和野生株中的表达;Western blotting及real-time PCR检测K65R点突变后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表达的变化。结果:阳性克隆PCR及基因测序证明慢病毒载体pWZL-blast-HAHsf4b/K65R构建成功。K65R点突变后不影响Hsf4b在小鼠晶状体上皮细胞mLEC中的表达,但能影响下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表达。结论:pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R载体可用于慢病毒感染稳定细胞株构建。Hsf4b K65R位点突变能显著影响其对热休克蛋白的调控功能。
关键词
热休克因子4b
晶状体上皮细胞
热休克蛋白
点突变
Keywords
Heat shock factor 4b
Lens epithelial cells
Heat shock proteins
Site-mutagenesis
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响
娄强
谢盼盼
崔秀坤
马远方
胡延忠
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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