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正常人群中DR5天然自身抗体的分布特点及与肿瘤患者的差异分析 被引量:3
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作者 王艳鸽 李燕杰 +1 位作者 都景芳 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期797-800,809,共5页
目的:探讨正常人群中DR5天然自身抗体的分布特点及与肿瘤患者的差异。方法:采用ELISA间接法检测正常人群与肿瘤患者血清中死亡受体5的天然自身抗体,并运用SPSS软件对其结果进行统计学分析。结果:正常人群中血清DR5天然自身抗体OD值平均... 目的:探讨正常人群中DR5天然自身抗体的分布特点及与肿瘤患者的差异。方法:采用ELISA间接法检测正常人群与肿瘤患者血清中死亡受体5的天然自身抗体,并运用SPSS软件对其结果进行统计学分析。结果:正常人群中血清DR5天然自身抗体OD值平均值为0.39,在人群中呈近正态分布。正常人群血清DR5自身抗体OD值在不同年龄组之间存在显著性差异(P<0.05),随年龄增大而增高。相同年龄组之间,正常人群与肿瘤患者的血清中DR5天然自身抗体的OD值存在差异,肿瘤患者的OD值(0.17±0.014)小于正常人群的OD值(0.39±0.011),P<0.01。结论:我们发现人群中存在DR5的天然自身抗体,但平均滴度较低,符合生理性天然自身抗体的特点。正常人群血清中DR5的NAA水平随着年龄增加而增高,而肿瘤患者血清中DR5的NAA水平低于正常人群。提示在衰老的过程中,血清中DR5天然自身抗体的提高可能有助于清除恶变的细胞,施行肿瘤监视功能,阻止恶变细胞进展为肿瘤。 展开更多
关键词 死亡受体5 天然自身抗体 间接ELISA
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抗DR5抗体对食管鳞癌的细胞毒作用及机制 被引量:2
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作者 刘广超 都景芳 +6 位作者 王靖 赵鹏 白慧玲 李淑莲 张军 杜耀武 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期512-517,共6页
目的:探讨抗人DR5功能性单克隆抗体mDRA-6对食管鳞癌EC9706和109细胞的细胞毒作用及其作用机制。方法:利用MTT法检测mAb mDRA-6对食管癌细胞的细胞毒作用;在显微镜下观察食管癌细胞死亡的形态变化;以琼脂糖凝胶电泳检测食管癌细胞中的DN... 目的:探讨抗人DR5功能性单克隆抗体mDRA-6对食管鳞癌EC9706和109细胞的细胞毒作用及其作用机制。方法:利用MTT法检测mAb mDRA-6对食管癌细胞的细胞毒作用;在显微镜下观察食管癌细胞死亡的形态变化;以琼脂糖凝胶电泳检测食管癌细胞中的DNA片段化。利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达、细胞凋亡率和线粒体膜电位;利用caspase抑制剂分析mAb mDRA-6的细胞毒作用机制。结果:mAb mDRA-6对食管鳞癌细胞有显著的细胞毒作用,并呈剂量和时间依赖性,但对食管上皮细胞NEC细胞没有毒性。经mAb mDRA-6处理,食管鳞癌细胞出现典型的细胞凋亡特征:细胞膜皱缩,出泡,染色质浓缩,形成凋亡小体以及DNA片段化等。流式细胞术检测结果显示,食管癌细胞表面表达DR5,而食管上皮细胞NEC细胞不表达;经1.2μg/ml的mAb mDRA-6作用24小时后,大多数食管鳞癌EC9706和109细胞的表面均表达磷脂酰丝氨酸。Caspase 8的抑制剂几乎完全抑制mAb mDRA-6诱导的细胞凋亡,Caspase 9抑制剂的则影响小。此外,在mAb mDRA-6诱导的食管癌细胞凋亡的早期,线粒体膜电位不改变,在凋亡的晚期,线粒体膜电位降低。结论:mAb mDRA-6主要通过死亡受体信号传导途径诱导细胞凋亡,对食管鳞癌细胞产生细胞毒作用,其在以TRAIL/DR5系统进行的肿瘤治疗和探讨DR5功能结构域方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 死亡受体5 TRAIL 细胞凋亡 单克隆抗体 食管鳞癌
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去黏附化增强抗DR5抗体介导食管癌细胞凋亡及其作用机制 被引量:1
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作者 刘广超 马远方 +3 位作者 都景芳 张军 李淑莲 白慧玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期961-963,共3页
目的:探讨去黏附化对抗死亡受体5(DR5)抗体诱导的食管癌鳞癌EC9706细胞系凋亡的影响及作用机制。方法:用EDTA消化对蓝菌素A预处理或未处理的贴壁生长的食管癌细胞,制备悬浮细胞;利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达及人抗DR5功能... 目的:探讨去黏附化对抗死亡受体5(DR5)抗体诱导的食管癌鳞癌EC9706细胞系凋亡的影响及作用机制。方法:用EDTA消化对蓝菌素A预处理或未处理的贴壁生长的食管癌细胞,制备悬浮细胞;利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达及人抗DR5功能抗体诱导的细胞凋亡;利用免疫荧光技术观察食管癌EC9706细胞DR5表达分布。结果:悬浮食管癌细胞对抗DR5的功能性抗体诱导的细胞凋亡的敏感性明显高于铺展者;未经蓝菌素A预处理制备的悬浮食管癌细胞的表面DR5表达明显高于经蓝菌素A处理制备的悬浮者。在铺展的食管癌EC9706细胞,DR5分布于细胞质和细胞膜表面,主要在细胞质,在细胞核没有DR5分布,但在悬浮的食管癌细胞表面DR5表达明显增强。结论:去黏附化增强食管癌细胞对抗DR5功能性抗体诱导细胞凋亡的敏感性,该作用是通过去黏附化增强DR5向细胞表面转运实现的,DR5的膜转运与高尔基体有关。该研究结果对进一步探讨DR5表达分布的机制以及TRAIL和DR5的功能性抗体的抗肿瘤临床应用有一定的指导意义。 展开更多
关键词 DR5 功能性抗体 TRAIL 细胞凋亡 细胞黏附
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可溶性死亡受体5在化疗前后肺癌患者外周血中的检测 被引量:1
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作者 朱诗白 杨永杰 +3 位作者 刘瑞敏 张爱红 孙颍川 白慧玲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1028-1031,共4页
目的:探讨正常人群外周血清中sDR5及与肺癌患者的差异。方法:采用ELISA夹心法检测106例正常人群、79例肺癌患者与肺癌化疗以后血清中死亡受体5的含量,并运用SPSS软件对其结果进行统计学分析。结果:正常人群外周血清中sDR5平均值为(6.25&... 目的:探讨正常人群外周血清中sDR5及与肺癌患者的差异。方法:采用ELISA夹心法检测106例正常人群、79例肺癌患者与肺癌化疗以后血清中死亡受体5的含量,并运用SPSS软件对其结果进行统计学分析。结果:正常人群外周血清中sDR5平均值为(6.25±3.09)μg/L,肺癌患者的sDR5含量为(53.91±13.42)μg/ml明显高于正常人群,P<0.001。肺癌病人化疗后外周血sDR5水平为(23.99±14.23)μg/ml较治疗前明显下降,P<0.001。结论:外周血中sDR5的消退水平有可能与肿瘤病人发病、发展及预后密切相关。 展开更多
关键词 死亡受体5 夹心ELISA 肺癌
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肠道病毒71型环介导等温扩增检测方法的建立
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作者 戴颖 刘峰涛 +1 位作者 何书 汪奇伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期240-243,共4页
目的:采用一步逆转录-环介导等温扩增(Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification,RTLAMP)肠道病毒71型(EV71)特异性基因,以建立一种快速、敏感、经济的EV71检测方法。方法:针对EV71病毒VP1基因特异性序列的8个区... 目的:采用一步逆转录-环介导等温扩增(Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification,RTLAMP)肠道病毒71型(EV71)特异性基因,以建立一种快速、敏感、经济的EV71检测方法。方法:针对EV71病毒VP1基因特异性序列的8个区域设计6条环介导等温扩增引物,Bst(Bacillus stearothermophilus)DNA聚合酶63℃扩增目的基因1 h,GoldView染色,日光下观察结果,并评价其特异性和灵敏度。结果:该方法与柯萨奇病毒A16型、轮状病毒、诺如病毒无交叉反应发生。建立的RT-LAMP检测方法灵敏,最低检测限为50拷贝/管,比定量PCR灵敏10倍。93份咽拭子标本中,RTLAMP检测示46份阳性,实时荧光定量PCR检测示44份阳性,经卡方检验分析,两者间无显著统计学差异。结论:RT-LAMP是一种快速、敏感、特异、经济的方法,适用于基层医疗机构临床检测普及。 展开更多
关键词 逆转录-环介导等温扩增技术 肠道病毒71型 手口足病
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组成性JNK活化促进B淋巴瘤细胞增殖
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作者 郭媛媛 崔健 +4 位作者 侯春梅 王庆阳 王晶 马远方 张纪岩 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期100-104,共5页
本研究以人B淋巴瘤细胞系Daudi和Raji为研究对象,探讨组成性JNK活化对B淋巴瘤细胞增殖的影响。用Western blot检测Daudi、Raji B淋巴瘤细胞中组成性JNK的变化;用免疫荧光方法检测Daudi、raji B淋巴瘤细胞中JNK的亚细胞定位;用JNK抑制因... 本研究以人B淋巴瘤细胞系Daudi和Raji为研究对象,探讨组成性JNK活化对B淋巴瘤细胞增殖的影响。用Western blot检测Daudi、Raji B淋巴瘤细胞中组成性JNK的变化;用免疫荧光方法检测Daudi、raji B淋巴瘤细胞中JNK的亚细胞定位;用JNK抑制因子(SP600125)处理Daudi和raji B淋巴瘤细胞,用流式细胞术检测其细胞周期;用ATPLite法检测SP600125对Daudi、Raji B淋巴瘤细胞生长的影响。结果显示:Daudi和raji B淋巴瘤细胞有组成性JNK活化;Daudi和raji B淋巴瘤细胞JNK亚细胞定位异常,存在不同程度的入核;JNK特异性抑制因子SP600125诱导B淋巴瘤细胞Daudi、Raji G2/M期细胞比例升高,并具有时间依赖性,且G0/G1峰前出现亚二倍体峰,证实SP600125在B淋巴瘤细胞中诱导G2/M阻滞和凋亡。ATPLite检测结果显示,SP600125显著抑制Daudi和Raji B淋巴瘤细胞的生长,并随着抑制因子浓度的升高,抑制作用更加明显,呈现剂量依赖性。结论:组成性JNK活化促进Daudi和Raji B淋巴瘤细胞增殖。JNK活性的升高通过促进JNK从胞浆进入胞核来促进B淋巴瘤细胞的增殖。SP600125通过多种机制阻抑JNK的活性抑制B淋巴瘤细胞的恶性生长。JNK可作为临床治疗B淋巴瘤的潜在靶点。 展开更多
关键词 JNK B淋巴瘤细胞 DAUDI细胞 RAJI细胞 亚细胞定位
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